產品(pǐn)中心
人(rén)體(tǐ)細胞(bāo)
|
細(xì)胞名稱(chēng) |
培養(yǎng)條(tiáo)件： |
傳代方法 |
貨(huò)號 |
|
UT-7 人急(jí)性成巨核細胞白(bái)血病細胞(bāo) |
DMEM+10% FBS +1%雙(shuāng)抗(kàng) |
維持(chí)細胞濃度(dù)在1.0~1.5×106 cells/ml，1：2傳代(dài)，2~3天1次(cì)。 |
C1171 |
詳(xiáng)細(xì)介(jiè)紹(shào)：
細(xì)胞名稱 人類原巨核細胞型(xíng)白(bái)血病細胞；UT-7
形態(tài)特(tè)性 圓(yuán)形(xíng)
生長特(tè)性 懸(xuán)浮(fú)生長(cháng)，有(yǒu)1%~2%的細胞(bāo)可(kě)輕微(wēi)貼(tiē)壁。
特征特性(xìng) 該細(xì)胞(bāo)於1988年建係；源(yuán)於(yú)一(yī)名64歲患(huàn)有急(jí)性(xìng)粒細胞白血(xiě)病(bìng)（AML M7）的(dí)男性的(dí)骨(gǔ)髓(suǐ)；對多種(zhǒng)細胞(bāo)因(yīn)子(zǐ)有反(fǎn)應(yīng)。
培養條(tiáo)件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS；5-7u/ml Epo
傳代方(fāng)法 維持(chí)細胞(bāo)濃度(dù)在1.0~1.5×106 cells/ml，1：2傳代(dài)，2~3天1次。
傳代(dài)情況 C7
凍(dòng)存條(tiáo)件 基(jī)礎培(péi)養(yǎng)基(jī)+5%DMSO+20%FBS
相(xiāng)關資料(liào)：
支原體(tǐ)檢測(cè) 培養法（-）
STR
Amelogenin：X，Y；CSF1PO：12；D13S317：8；D16S539：10，12；D18S51：14，17；D19S433：14，14.2；D21S11：31.2；D2S1338：18，23；D3S1358：16；D5S818：12；D7S820：8；D8S1179：11，15；FGA：23；TH01：6，9；TPOX：10；vWA：14，18，19；
同工酶
染(rǎn)色體(tǐ)
使(shǐ)用權限 A類
細胞服(fú)務(wù)內容:
1，協助(zhù)引(yǐn)進科(kē)研急需 的(dí)細(xì)胞(bāo)株/係。
2，提供(gōng)細胞保藏服(fú)務。
3，提(tí)供細胞供(gōng)應(yīng)服務(wù)。
4，提(tí)供細胞(bāo)篩選或(huò)建立特(tè)殊細胞株/係(xì)的服務。
5， 提供(gōng)與細胞(bāo)培養(yǎng)配(pèi)套的部(bù)分(fēn)試劑(jì)
6， 提供(gōng)支(zhī)原體等各(gè)項(xiàng)檢(jiǎn)測(cè)的(dí)技術服(fú)務
細胞培(péi)養步驟：
一．培養基(jī)及培養凍存條件(jiàn)準備：
1） 準備(bèi)培(péi)養基；北美(měi)胎牛(niú)血清，10%；雙抗(kàng)1%。
2） 培(péi)養條件(jiàn)： 氣相(xiāng)：空(kōng)氣(qì)，95%；二(èr)氧(yǎng)化碳(tàn)，5%。 溫度：37攝(shè)氏度，培(péi)養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 3） 凍存(cún)液(yè)：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現配。液氮(dàn)儲存(cún)。
二．細(xì)胞(bāo)處理：
1） 復蘇(sū)細胞：將(jiāng)含有(yǒu)1mL細(xì)胞懸液的凍存(cún)管在(zài)37℃水浴(yù)中迅速搖晃解凍(dòng)，加入(rù)4mL培養基(jī)混合均匀。在(zài)1000RPM條件下離心(xīn)4分鐘，棄去上(shàng)清(qīng)液，補(bǔ)加(jiā)1-2mL培(péi)養基後(hòu)吹匀(yún)。然(rán)後將所有細胞懸液加入(rù)培養瓶(píng)中培養過夜(yè)（或將細胞懸(xuán)液(yè)加(jiā)入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培(péi)養(yǎng)過(guò)夜）。第二(èr)天換液(yè)並(bìng)檢(jiǎn)查細胞(bāo)密(mì)度(dù)。
2） 細胞傳代(dài)：如(rú)果(guǒ)細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。 對於(yú)貼(tiē)壁細胞(bāo)，傳代可參考以下方(fāng)法： 棄去培養上(shàng)清，用不含鈣，鎂離子(zǐ)的(dí)PBS潤洗細(xì)胞(bāo)1-2次(cì)。
1. 加2ml消(xiāo)化(huà)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yú)培(péi)養(yǎng)瓶中，置於37℃培養(yǎng)箱(xiāng)中消化(huà)1-2分鐘，然後(hòu)在(zài)顯(xiǎn)微鏡(jìng)下觀察細胞(bāo)消化情況，若(ruò)細胞(bāo)大(dà)部分變(biàn)圓(yuán)並脫(tuō)落(là)，迅(xùn)速(sù)拿(ná)回操作台(tái)，輕敲(qiāo)幾(jī)下培養(yǎng)瓶(píng)後(hòu)加少(shǎo)量(liáng)培養(yǎng)基(jī)終止消化。
2. 按6-8ml/瓶補加(jiā)培養(yǎng)基，輕輕打匀後(hòu)吸(xī)出，在1000RPM條件下離(lí)心(xīn)4分鐘，棄(qì)去上(shàng)清(qīng)液，補(bǔ)加1-2mL培(péi)養(yǎng)液(yè)後吹匀。
3. 將細胞(bāo)懸液按(àn)1：2到1：5的比例分到(dào)新(xīn)的含8ml培(péi)養基(jī)的新(xīn)皿中或者(zhě)瓶(píng)中。 細胞凍(dòng)存：待細(xì)胞生長(cháng)狀態良好(hǎo)時，可進(jìn)行細(xì)胞(bāo)凍存。 下麵T25瓶為(wéi)例(lì)；
1．細胞凍存(cún)時，棄(qì)去培養基後，PBS清(qīng)洗瓶底1-2次後加入1ml胰酶，細胞(bāo)變圓脫落(là)後(hòu)，加(jiā)入2ml完(wán)全培養基終止(zhǐ)消(xiāo)化，可(kě)使(shǐ)用血(xiě)球計數板計(jì)數。
2．1000RPM離心5分(fēn)鐘去掉(diào)上(shàng)清。用(yòng)血清重懸浮，加(jiā)DMSO至(zhì)最終濃(nóng)度(dù)為10%。加入DMSO後迅(xùn)速混匀，按(àn)每1ml的數量(liáng)分配到凍(dòng)存(cún)管(guǎn)中，注意凍存管(guǎn)做好標識。本(běn)公司(sī)按每個凍存(cún)管(guǎn)細胞(bāo)數目(mù)大於(yú)1X106個細(xì)胞凍存(cún)。
3．將(jiāng)凍(dòng)存(cún)管(guǎn)置於程序降(jiàng)溫(wēn)盒中(zhōng)，放(fàng)入-80度冰(bīng)箱(xiāng)，至少(shǎo)2個(gè)小(xiǎo)時以(yǐ)後轉入液氮灌(guàn)儲存。記錄(lù)凍(dòng)存管位置(zhì)以(yǐ)便下次拿取。
- 上(shàng)一條：人乳腺(xiàn)導(dǎo)管瘤細胞(bāo)；UACC812
- 下一(yī)條：人十二(èr)脂腸(cháng)腺(xiàn)癌；HuTu-80
