技術文(wén)獻
技(jì)術(shù)文(wén)獻
大鼠肝細(xì)胞生(shēng)長因子激(jī)活(huó)物加樣的操作步(bù)驟(zhòu)詳(xiáng)解
大(dà)鼠肝細(xì)胞生長(cháng)因子(zǐ)激(jī)活物加(jiā)樣的操(cāo)作步驟(zhòu)詳(xiáng)解(jiě)
1.細胞上清:前(qián)處理(lǐ)必須是細(xì)胞離(lí)心(xīn)去(qù)除(chú),每孔(kǒng)直接(jiē)加100p1即可(kě)。如(rú)果濃度(dù)太高需(xū)稀
釋時,用(yòng)標(biāo)準品稀釋(shì)液直(zhí)接(jiē)稀釋(shì)。
2.腦脊液(yè):前(qián)處(chǔ)理(lǐ)必須(xū)是細(xì)胞離心去除,每孔(kǒng)直接(jiē)加100W1即(jí)可(kě)。如(rú)果濃度太(tài)高(gāo)需稀釋(shì)
時,用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋(shì)液直接稀(xī)釋。
3.血(xiě)清血漿(jiāng):加入50u山(shān)樣(yàng)本分析緩(huǎn)衝液後(hòu)加(jiā)50u標(biāo)本如(rú)稀(xī)釋量(liáng)大,請將(jiāng)樣(yàng)本(běn)與樣本
分析(xī)緩神液(yè)等量(liáng)加(jiā)入(rù),不(bù)足部分(fēn)用(yòng)標準品稀(xī)釋液補充至(zhì)100u
①血清標本(běn)應(yīng)是(shì)自然凝固後(hòu),取(qǔ)上(shàng)清,避免(miǎn)在(zài)冰箱中(zhōng)凝(níng)固(gù)血(xiě)液(yè)
②血漿(jiāng)標本,推薦用EDTA的方法(fǎ)收集若待(dài)測(cè)樣(yàng)本不(bù)能(néng)及時檢測(cè),標本收集後請分裝
凍(dòng)存於(yú)-20℃,避(bì)免(miǎn)反復凍融(róng)
③血(xiě)清標(biāo)本不(bù)應(yīng)添加(jiā)任(rèn)何防(fáng)腐劑或抗凝劑(jì)
④標(biāo)本應清澈(chè)透明(míng),檢測前(qián)樣(yàng)本中如有(yǒu)懸(xuán)浮物應通(tōng)過離心去(qù)除
⑤請勿使用(yòng)溶血(xiě),高血(xiě)脂或汙(wū)染(rǎn)的標本檢測(cè),否(fǒu)則結果(guǒ)將(jiāng)不準(zhǔn)確
4.組織匀(yún)漿液(yè)的樣本:要(yào)製備(bèi)過(guò)程中需要在緩衝(chōng)液中(zhōng)加入蛋(dàn)白酶抑製劑,防(fáng)止蛋白成(chéng)份(fèn)被內源性蛋白酧降解,造成(chéng)檢(jiǎn)測結果的(dí)值偏低。因組(zǔ)織匀(yún)漿(jiāng)液的樣(yàng)本(běn)蛋(dàn)白(bái)種(zhǒng)類多,含(hán)量豐富,驗參照血(xiě)清血(xiě)漿(jiāng)標本的處理方法進行(háng),否則(zé)就(jiù)會(huì)影(yǐng)響(xiǎng)實驗(yàn)結果。具體(tǐ)是(shì)加入50u樣本分析(xī)緩(huǎn)衝液(yè)後加50u標(biāo)本(běn),需(xū)稀(xī)釋(shì)時(shí),請將樣本與樣本分析(xī)緩神液等量(liáng)加入,不足(zú)部分(fēn)用標準品稀釋(shì)液補(bǔ)充至100ul
