埃(āi)博(bó)拉(lā)病(bìng)毒(EBOV)核酸檢(jiǎn)測(cè)試劑盒(PCR-熒(yíng)光探針(zhēn)法)準備試劑(jì)與收(shōu)集血(xiě)樣：

雙(shuāng)重核(hé)酸試(shì)劑盒（熒(yíng)光PCR法）　1.  收集標(biāo)本：血(xiě)清，血漿（EDTA ，檸(níng)檬(méng)酸(suān)鹽(yán)，肝(gān)素(sù)抗(kàng)凝(níng)），細(xì)胞培養上清液(yè)，組織匀(yún)漿(jiāng)等(děng)盡(jìn)早檢(jiǎn)測， 2-8 ℃ 保存48 小時；更長(cháng)時間須(xū)冷凍(dòng)（ -20   ℃或(huò) -70   ℃ ）保存，避免反復凍融。

2.  標(biāo)準品(pǐn)液配(pèi)製：使用(yòng)前加(jiā)入(rù)0.5ml 蒸餾(liù)水(shuǐ) 混匀，配成(chéng) 120 0ng/ml 的(dí)溶液 。 設標(biāo)準 管 8 管，管加(jiā)標本稀(xī)釋液(yè) 900ul ，第(dì)二至(zhì)第(dì)八(bā)管加入(rù)標本稀釋(shì)液 500ul 。在管中加入(rù) 120 0ng/ml 的標準品溶(róng)液(yè) 100ul 混(hùn)匀後用(yòng)加(jiā)樣(yàng)器吸(xī)出 500ul ，移至第二管 。如此(cǐ)反(fǎn)復(fù)作對倍稀釋(shì)，從第(dì)七 管 中吸出 500ul 棄(qì)去(qù)。第八(bā) 管(guǎn) 為空(kōng)白對(duì)照(zhào)。

3.  10× 標本(běn)稀釋(shì)液(yè)用(yòng)蒸餾水(shuǐ)作 1: 1 0 倍(bèi)稀釋（ 示(shì)例(lì)： 1ml濃(nóng)稀(xī)釋(shì)液 +9ml 蒸(zhēng)餾水）。

4.  洗滌液：用重蒸水 1:20 稀釋（示例：1ml 濃(nóng)縮洗滌(dí)液加(jiā)入 19ml 的重(zhòng)蒸(zhēng)水）

檢(jiǎn)測程序(xù)：

1.  加樣：每孔各加入標準品或待(dài)測(cè)樣品 100ul ，將(jiāng)反(fǎn)應(yīng)板充(chōng)分(fēn)混(hùn)匀後置(zhì) 37 ℃ 120 分鐘。

2.  洗(xǐ)板：用洗滌(dí)液將反(fǎn)應(yīng)板充分洗滌(dí) 4-6 次(cì)，向濾(lǜ)紙(zhǐ)上(shàng)印(yìn)幹。

3.  每孔(kǒng)中(zhōng)加入抗體工(gōng)作(zuò)液(yè)10 0ul 。將反應板充(chōng)分混匀(yún)後(hòu)置(zhì) 37 ℃ 6 0 分(fēn)鐘(zhōng)。

4.  洗板(bǎn)：同(tóng)前。

5.  每(měi)孔加酶標(biāo)抗體工作液(yè)100ul 。將(jiāng)反應板(bǎn)置 37 ℃ 3 0 分鐘(zhōng)。

6.  洗板：同前(qián)。

7.  每(měi)孔(kǒng)加(jiā)入(rù)底物工(gōng)作液(yè)100ul ，置 37   ℃ 暗(àn)處反(fǎn)應15 分(fēn)鐘。

8.  每孔加入(rù)100ul 終(zhōng)止(zhǐ)液混(hùn)匀(yún)。

9.  30分鐘(zhōng)內用(yòng)酶(méi)標儀在(zài) 45 0 nm 處測 吸光(guāng)值。

性能(néng)：

1. 準確(què)性：標(biāo)準品綫性回歸與預(yù)期濃(nóng)度相(xiāng)關係數(shù)R值(zhí)，大於(yú)等(děng)於0.9900。

2. 靈敏度：檢測濃(nóng)度(dù)小於0.1 U/mL。

3. 特(tè)異性(xìng)：不與(yǔ)其(qí)它(tā)可溶(róng)性結(jié)構類似(sì)物(wù)交叉反(fǎn)應。

4. 重(zhòng)復性：板(bǎn)內(nèi)，板(bǎn)間(jiān)變異係(xì)數均(jūn)小(xiǎo)於15%。

5. 貯藏：2-8℃，避(bì)光防潮保存(cún)。

6. 有(yǒu)效期(qī)：6個月(yuè)

盤羊(yáng)皮(pí)膚(fū)細胞；ASHS3

山(shān)羊(yáng)腎上皮(pí)樣細(xì)胞；DG-K1

山(shān)羊皮(pí)膚成纖維樣細胞；DG-S1

豬(zhū)源細(xì)胞

豬腎細胞(bāo)；LLC-PK1

豬腎細(xì)胞；PK(15)

豬(zhū)腎傳代細(xì)胞(bāo)；IBRS-2

豬腎細(xì)胞；PK（15）

豬睾(gāo)丸細(xì)胞；ST

小(xiǎo)型豬腎細(xì)胞(bāo)；MPK

小(xiǎo)鼠髖(kuān)動脈(mài)內(nèi)皮細胞(bāo)；PIEC

豬(zhū)胚胎睾丸(wán)傳(chuán)代細胞；ST

豬(zhū)腎傳代細(xì)胞(bāo)；IBRS－2

豬腎(shèn)細胞(bāo)；PK-15

豬靜(jìng)脈(mài)血(xiě)管(guǎn)內(nèi)皮細胞(bāo)；ZYM-SVEC01

豬小腸上皮細(xì)胞；ZYM-DIEC02

小耳(ěr)豬腎(shèn)細胞；SEPfk

小(xiǎo)耳豬(zhū)肺(fèi)細胞(bāo)；SEP-L1

小耳(ěr)豬肺細胞(bāo)；SEP-L2

家(jiā)豬(zhū)皮(pí)膚(fū)細(xì)胞(bāo)；SSC-S1

小香豬皮膚(fū)細胞(bāo)；SSC-S2

長白山豬(zhū)胚胎(tāi)皮(pí)膚(fū)成(chéng)纖維(wéi)樣細胞；201184

貂源細(xì)胞(bāo)

鼬肺上皮(pí)細(xì)胞；MV-1-Lu

水貂(diāo)肺上皮細胞；Mv.1.Lu(NBL-7)

水貂肺上(shàng)皮細胞(bāo)；Mv.1.Lu(NBL-7)

牛源細胞(bāo)

新生牛(niú)眼晶(jīng)體(tǐ)上皮細胞(bāo)；NBLE

新生牛眼Tenon＇s囊(náng)成纖(xiān)維細胞(bāo)；NBTF