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小(xiǎo)鼠表麵膜免疫(yì)球蛋白(bái)Aelisa檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé)雙抗(kàng)體(tǐ)夾心(xīn)法(fǎ)
小(xiǎo)鼠表(biǎo)麵膜免疫球蛋白Aelisa檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé)雙(shuāng)抗體(tǐ)夾心法:
雙(shuāng)抗(kàng)體(tǐ)夾心(xīn)法是(shì)檢測抗原zui常用(yòng)的方法(fǎ),操作步驟如(rú)下:
(1)將特異性抗(kàng)體與固相載體連接,形成固相抗體:洗(xǐ)滌除去(qù)未結合(hé)的抗(kàng)體(tǐ)及雜質(zhì)。
(2)加(jiā)受檢標(biāo)本(běn):使(shǐ)之(zhī)與(yǔ)固(gù)相(xiāng)抗體接觸反應一段時(shí)間,讓(ràng)標本(běn)中(zhōng)的抗原(yuán)與同(tóng)相(xiāng)載體上(shàng)的抗(kàng)體結合,形成固相抗(kàng)原(yuán)復(fù)合物。洗(xǐ)滌除去(qù)其他未結(jié)合的物(wù)質。
(3)加酶標(biāo)抗體:使同(tóng)相免(miǎn)疫(yì)復(fù)合物上(shàng)的(dí)抗(kàng)原與酶標(biāo)抗體結合。徹底(dǐ)洗滌未結合的(dí)酶標抗體(tǐ)。此時固(gù)相載體上帶有的酶量與(yǔ)標本中受檢物質的(dí)量正(zhèng)相關。
(4)加底物:酶催化(huà)底(dǐ)物(wù)成為(wéi)有色(sè)產物。根(gēn)據顏色反(fǎn)應(yīng)的程(chéng)度進(jìn)行該抗原(yuán)的定(dìng)性或定量。
根據同樣原(yuán)理,將(jiāng)大分子(zǐ)抗(kàng)原分別製(zhì)備固相(xiāng)抗原和酶標抗(kàng)原結合(hé)物,即可(kě)雙抗原夾心法(fǎ)測(cè)定標(biāo)本中的抗體。
雙(shuāng)位點一步(bù)法(fǎ):
在(zài)雙抗(kàng)體夾(jiā)心法測(cè)定(dìng)抗原時,如(rú)應用(yòng)針(zhēn)對(duì)抗(kàng)原(yuán)分(fēn)子上兩個不(bù)同抗原(yuán)決定簇(cù)的(dí)單克隆抗體(tǐ)分別作為固(gù)相抗(kàng)體和(hé)酶標抗(kàng)體(tǐ),則(zé)在(zài)測定(dìng)時(shí)可使標(biāo)本的加(jiā)入和(hé)酶標抗體(tǐ)的加入(rù)兩步並作一步。這種雙位點一(yī)步法(fǎ)不(bù)但簡(jiǎn)化了(liǎo)操作,
縮短(duǎn)了反應(yīng)時間,如果使用高親和力(lì)的單克隆(lóng)抗體(tǐ),測定的敏感性和特(tè)異性也顯著(zhù)提高。單克(kè)隆(lóng)抗體的(dí)應(yīng)用(yòng)使(shǐ)測(cè)定(dìng)抗(kàng)原的ELISA提高(gāo)到(dào)新水(shuǐ)平(píng)。
在(zài)一步(bù)法測定(dìng)中,應注意鉤(gōu)狀(zhuàng)效應(hook effect),類(lèi)同於沉(chén)澱反應中(zhōng)抗原過(guò)剩的(dí)後滯(zhì)現(xiàn)象。當標(biāo)本中待(dài)測(cè)抗原濃度(dù)相當高時,過(guò)量抗原(yuán)分別和固相(xiāng)抗體及酶標抗體(tǐ)結(jié)合,而不再形(xíng)成夾心復合(hé)物(wù),所(suǒ)得(dé)結果(guǒ)將低(dī)於實際含(hán)量。鉤狀(zhuàng)效應嚴(yán)重時甚至可(kě)出現假陰性(xìng)結果。
改(gǎi)良(liáng)克氏雙(shuāng)糖(táng)鐵
改(gǎi)良Y培(péi)養基
CIN-1培養(yǎng)基配套試劑
CIN-1培養基(jī)基礎
改良磷酸鹽緩衝液(yè)
克(kè)氏雙(shuāng)糖鐵(tiě)瓊脂(zhī)
克氏(shì)雙糖鐵瓊脂(zhī)
Skirrow瓊脂配(pèi)套試劑(jì)
改良(liáng)CCD瓊(qióng)脂(zhī)配套試劑
Bolton肉湯配套(tào)試劑
水解酪蛋(dàn)白腖(MH)瓊脂(zhī)
布(bù)氏(shì)肉(ròu)湯(tāng)
Skirrow瓊(qióng)脂
改良(liáng)CCD瓊脂(zhī)基礎(chǔ)
Bolton肉(ròu)湯基礎(chǔ)
哥倫比(bǐ)亞(yà)瓊(qióng)脂(zhī)培養(yǎng)基
Skirrow瓊脂(zhī)配套試(shì)劑(jì)
改(gǎi)良CCD瓊(qióng)脂配套試劑
Bolton肉(ròu)湯配(pèi)套(tào)試劑
水(shuǐ)解(jiě)酪(lào)蛋(dàn)白(bái)腖(dòng)(MH)瓊脂
布(bù)氏肉湯
Skirrow瓊脂(zhī)
改良(liáng)CCD瓊脂基礎(chǔ)
Bolton肉湯基礎
哥倫比(bǐ)亞瓊(qióng)脂培養基
Skirrow瓊脂配(pèi)套試(shì)劑(jì)
改(gǎi)良CCD瓊(qióng)脂配(pèi)套試(shì)劑(jì)
Bolton肉湯配(pèi)套(tào)試劑(jì)
水解(jiě)酪蛋白腖(dòng)(MH)瓊脂
布氏(shì)肉(ròu)湯
雙(shuāng)抗(kàng)體(tǐ)夾心(xīn)法是(shì)檢測抗原zui常用(yòng)的方法(fǎ),操作步驟如(rú)下:
(1)將特異性抗(kàng)體與固相載體連接,形成固相抗體:洗(xǐ)滌除去(qù)未結合(hé)的抗(kàng)體(tǐ)及雜質(zhì)。
(2)加(jiā)受檢標(biāo)本(běn):使(shǐ)之(zhī)與(yǔ)固(gù)相(xiāng)抗體接觸反應一段時(shí)間,讓(ràng)標本(běn)中(zhōng)的抗原(yuán)與同(tóng)相(xiāng)載體上(shàng)的抗(kàng)體結合,形成固相抗(kàng)原(yuán)復(fù)合物。洗(xǐ)滌除去(qù)其他未結(jié)合的物(wù)質。
(3)加酶標(biāo)抗體:使同(tóng)相免(miǎn)疫(yì)復(fù)合物上(shàng)的(dí)抗(kàng)原與酶標(biāo)抗體結合。徹底(dǐ)洗滌未結合的(dí)酶標抗體(tǐ)。此時固(gù)相載體上帶有的酶量與(yǔ)標本中受檢物質的(dí)量正(zhèng)相關。
(4)加底物:酶催化(huà)底(dǐ)物(wù)成為(wéi)有色(sè)產物。根(gēn)據顏色反(fǎn)應(yīng)的程(chéng)度進(jìn)行該抗原(yuán)的定(dìng)性或定量。
根據同樣原(yuán)理,將(jiāng)大分子(zǐ)抗(kàng)原分別製(zhì)備固相(xiāng)抗原和酶標抗(kàng)原結合(hé)物,即可(kě)雙抗原夾心法(fǎ)測(cè)定標(biāo)本中的抗體。
雙(shuāng)位點一步(bù)法(fǎ):
在(zài)雙抗(kàng)體夾(jiā)心法測(cè)定(dìng)抗原時,如(rú)應用(yòng)針(zhēn)對(duì)抗(kàng)原(yuán)分(fēn)子上兩個不(bù)同抗原(yuán)決定簇(cù)的(dí)單克隆抗體(tǐ)分別作為固(gù)相抗(kàng)體和(hé)酶標抗(kàng)體(tǐ),則(zé)在(zài)測定(dìng)時(shí)可使標(biāo)本的加(jiā)入和(hé)酶標抗體(tǐ)的加入(rù)兩步並作一步。這種雙位點一(yī)步法(fǎ)不(bù)但簡(jiǎn)化了(liǎo)操作,
縮短(duǎn)了反應(yīng)時間,如果使用高親和力(lì)的單克隆(lóng)抗體(tǐ),測定的敏感性和特(tè)異性也顯著(zhù)提高。單克(kè)隆(lóng)抗體的(dí)應(yīng)用(yòng)使(shǐ)測(cè)定(dìng)抗(kàng)原的ELISA提高(gāo)到(dào)新水(shuǐ)平(píng)。
在(zài)一步(bù)法測定(dìng)中,應注意鉤(gōu)狀(zhuàng)效應(hook effect),類(lèi)同於沉(chén)澱反應中(zhōng)抗原過(guò)剩的(dí)後滯(zhì)現(xiàn)象。當標(biāo)本中待(dài)測(cè)抗原濃度(dù)相當高時,過(guò)量抗原(yuán)分別和固相(xiāng)抗體及酶標抗體(tǐ)結(jié)合,而不再形(xíng)成夾心復合(hé)物(wù),所(suǒ)得(dé)結果(guǒ)將低(dī)於實際含(hán)量。鉤狀(zhuàng)效應嚴(yán)重時甚至可(kě)出現假陰性(xìng)結果。
改(gǎi)良(liáng)克氏雙(shuāng)糖(táng)鐵
改(gǎi)良Y培(péi)養基
CIN-1培養(yǎng)基配套試劑
CIN-1培養基(jī)基礎
改良磷酸鹽緩衝液(yè)
克(kè)氏雙(shuāng)糖鐵(tiě)瓊脂(zhī)
克氏(shì)雙糖鐵瓊脂(zhī)
Skirrow瓊脂配(pèi)套試劑(jì)
改良(liáng)CCD瓊(qióng)脂(zhī)配套試劑
Bolton肉湯配套(tào)試劑
水解酪蛋(dàn)白腖(MH)瓊脂(zhī)
布(bù)氏(shì)肉(ròu)湯(tāng)
Skirrow瓊(qióng)脂
改良(liáng)CCD瓊脂(zhī)基礎(chǔ)
Bolton肉(ròu)湯基礎(chǔ)
哥倫比(bǐ)亞(yà)瓊(qióng)脂(zhī)培養(yǎng)基
Skirrow瓊脂(zhī)配套試(shì)劑(jì)
改(gǎi)良CCD瓊(qióng)脂配套試劑
Bolton肉(ròu)湯配(pèi)套(tào)試劑
水(shuǐ)解(jiě)酪(lào)蛋(dàn)白(bái)腖(dòng)(MH)瓊脂
布(bù)氏肉湯
Skirrow瓊脂(zhī)
改良(liáng)CCD瓊脂基礎(chǔ)
Bolton肉湯基礎
哥倫比(bǐ)亞瓊(qióng)脂培養基
Skirrow瓊脂配(pèi)套試(shì)劑(jì)
改(gǎi)良CCD瓊(qióng)脂配(pèi)套試(shì)劑(jì)
Bolton肉湯配(pèi)套(tào)試劑(jì)
水解(jiě)酪蛋白腖(dòng)(MH)瓊脂
布氏(shì)肉(ròu)湯
