優勢：
1，原(yuán)裝進口抗(kàng)體－－－－高(gāo)效(xiào)，靈敏，特異(yì)性好
2，規範(fàn)包(bāo)被操(cāo)作－－－－吸附均匀，吸(xī)附性(xìng)好，空白值低(dī)，孔(kǒng)底透明(míng)度高
3，先進(jìn)的優(yōu)化方案(àn)－－－－重(zhòng)復(fù)性高(gāo)，可靠性(xìng)強(qiáng)
4，高標準(zhǔn)技(jì)術服務要求：靈敏度(dù)高，特(tè)異性(xìng)強 
5，適(shì)用(yòng)範(fàn)圍(wéi)廣(guǎng)：血(xiě)漿，血(xiě)清，組(zǔ)織匀(yún)漿(jiāng)液，細胞培養(yǎng)上清(qīng)液(yè)，尿(niào)液等(děng)多(duō)種類型的(dí)樣(yàng)本
檢測原理
試(shì)劑盒(hé)采用雙抗體(tǐ)一步夾心法(fǎ)酶聯免(miǎn)疫(yì)吸(xī)附(fù)試驗(yàn)（ELISA）
。往(wǎng)預先(xiān)包(bāo)被組胺（HIS）抗(kàng)體(tǐ)的包(bāo)被微孔中(zhōng)，依次(cì)加入標本，標準(zhǔn)品，HRP標(biāo)記的檢(jiǎn)測抗體，經(jīng)過(guò)溫(wēn)育並徹底洗滌
。用底(dǐ)物TMB顯色(sè)，TMB在(zài)過氧化(huà)物(wù)酶(méi)的(dí)催化下轉化(huà)成藍色，並在(zài)酸的作用(yòng)下轉化(huà)成(chéng)終的黃色(sè)
。顏色(sè)的(dí)深(shēn)淺(qiǎn)和(hé)樣(yàng)品中(zhōng)的組(zǔ)胺(àn)（HIS）呈正(zhèng)相關
。用(yòng)酶標(biāo)儀在(zài)450nm 波長下測(cè)定(dìng)吸光度（OD 值），計(jì)算(suàn)樣(yàng)品(pǐn)濃度(dù)
。
樣品收集(jí)，處(chǔ)理及保存方法
1.  血清：使用不(bù)含熱(rè)原和內毒素的試(shì)管，操作過程(chéng)中(zhōng)避(bì)免(miǎn)任何細胞(bāo)刺激(jī)，收(shōu)集血液後，3000轉(zhuǎn)離(lí)心10分(fēn)鐘將(jiāng)血清和紅細胞迅速(sù)小(xiǎo)心地(dì)分離
。
2.  血(xiě)漿：EDTA，檸(níng)檬(méng)酸(suān)鹽(yán)或肝素抗凝
。3000轉(zhuǎn)離(lí)心30分(fēn)鐘取上(shàng)清
。
3.  細(xì)胞上清液：3000轉離(lí)心(xīn)10分鐘(zhōng)去除顆(kē)粒和(hé)聚合物
。
4.  組織匀漿：將組(zǔ)織加(jiā)入(rù)適量生(shēng)理(lǐ)鹽水搗碎
。3000轉離心(xīn)10分鐘(zhōng)取上(shàng)清
。
5.  保(bǎo)存：如(rú)果樣本收(shōu)集後(hòu)不(bù)及時檢(jiǎn)測(cè)，請按一(yī)次(cì)用量分裝(zhuāng)，凍(dòng)存於-20℃，避免反(fǎn)復(fù)凍融，在室溫下解凍(dòng)並確(què)保樣品(pǐn)均匀(yún)地(dì)充(chōng)分(fēn)解(jiě)凍(dòng)
。
自備物(wù)品(pǐn)
酶(méi)標儀(yí)（450nm）
高精(jīng)度加(jiā)樣(yàng)器及槍(qiāng)頭(tóu)：0.5-10uL，2-20uL，20-200uL，200-1000uL
37℃恒(héng)溫(wēn)箱
操作(zuò)注意(yì)事項(xiàng)
  試劑(jì)盒保(bǎo)存(cún)在2-8℃，使(shǐ)用前(qián)室溫(wēn)平(píng)衡20分(fēn)鐘(zhōng)
。從(cóng)冰箱(xiāng)取(qǔ)出(chū)的(dí)濃(nóng)縮洗(xǐ)滌液(yè)會有(yǒu)結晶，這屬(shǔ)於正常(cháng)現(xiàn)象(xiàng)，水浴(yù)加(jiā)熱使結晶完全(quán)溶解(jiě)後再(zài)使(shǐ)用(yòng)
。
  實驗中不用的(dí)板(bǎn)條應(yīng)立即放回自(zì)封袋中，密封（低溫(wēn)幹燥）保(bǎo)存
。
  濃度(dù)為(wéi)0的S0號(hào)標準(zhǔn)品(pǐn)即(jí)可視為陰(yīn)性對照或者空白；按(àn)照(zhào)說(shuō)明書操作(zuò)時(shí)樣本已經稀釋5倍，終結果乘以(yǐ)5才是(shì)樣本(běn)實(shí)際(jì)濃度
。
  嚴格(gé)按照說明書中標(biāo)明的(dí)時間，加(jiā)液量及(jí)順(shùn)序(xù)進行溫育操作
。
  所有(yǒu)液(yè)體組(zǔ)分(fēn)使用前(qián)充(chōng)分搖匀
。
試(shì)劑盒(hé)組成
名稱(chēng) 96孔(kǒng)配(pèi)置 48孔配(pèi)置(zhì) 備注(zhù)
微(wēi)孔酶標(biāo)板 12孔×8條 12孔×4條(tiáo) 無(wú)
標準(zhǔn)品 0.3mL*6管 0.3mL*6管(guǎn) 無
樣本稀釋(shì)液 6mL 3mL 無(wú)
檢測抗體(tǐ)-HRP 10mL 5mL 無(wú)
20×洗(xǐ)滌緩(huǎn)衝(chōng)液 25mL 15mL 按(àn)說明書進行稀(xī)釋(shì)
底物A 6mL 3mL 無
底物(wù)B 6mL 3mL 無(wú)
終止液(yè) 6mL 3mL 無
封板膜 2張(zhāng) 2張 無(wú)
說(shuō)明(míng)書(shū) 1份 1份(fèn) 無
自封袋(dài) 1個(gè) 1個 無(wú)
注：標(biāo)準品（S0-S5）濃度依次為：0，12.5，25，50，100，200 mg/L
試劑的準備
 20×洗(xǐ)滌緩衝液的(dí)稀釋：蒸(zhēng)餾水按(àn)1：20稀釋，即1份(fèn)的20×洗(xǐ)滌(dí)緩(huǎn)衝液加19份的(dí)蒸餾(liù)水
。
洗板(bǎn)方(fāng)法
  手工(gōng)洗(xǐ)板：甩盡孔內液(yè)體，每孔加滿(mǎn)洗滌液，靜(jìng)置1min後甩盡(jìn)孔內(nèi)液體，在吸(xī)水(shuǐ)紙(zhǐ)上(shàng)拍幹，如此洗板(bǎn)5次(cì)
。
  自動洗板機：每(měi)孔注入(rù)洗(xǐ)液(yè)350μL，浸泡1min，洗板(bǎn)5次(cì)
。
操作步(bù)驟(zhòu)
  從室(shì)溫平衡(héng)20min後(hòu)的鋁箔(bó)袋(dài)中(zhōng)取出所(suǒ)需板(bǎn)條，剩餘(yú)板條用自(zì)封袋(dài)密封放回(huí)4℃
。
  設置標(biāo)準品孔(kǒng)和樣(yàng)本(běn)孔(kǒng)，標準品孔各加不同濃(nóng)度的(dí)標準(zhǔn)品50μL；
  樣(yàng)本孔(kǒng)先(xiān)加待(dài)測樣本10μL，再(zài)加樣本(běn)稀釋(shì)液40μL；空(kōng)白(bái)孔不(bù)加(jiā)
。
  除空白孔(kǒng)外，標準品(pǐn)孔(kǒng)和(hé)樣(yàng)本孔中每孔加入辣根過氧(yǎng)化物酶(méi)（HRP）標記的檢(jiǎn)測抗體100μL，用(yòng)封(fēng)板(bǎn)膜(mó)封住反應孔，37℃水(shuǐ)浴(yù)鍋(guō)或(huò)恒溫箱(xiāng)溫育60min
。
  棄去液體(tǐ)，吸水紙(zhǐ)上拍(pāi)幹，每孔加(jiā)滿洗滌液，靜(jìng)置1min，甩去洗滌液(yè)，吸水(shuǐ)紙上拍幹(gān)，如(rú)此(cǐ)重復洗板5次（也(yě)可用洗(xǐ)板(bǎn)機洗板(bǎn)）
。
  每(měi)孔加入底物A，B各50μL，37℃避(bì)光孵(fū)育15min
。
  每孔(kǒng)加(jiā)入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測(cè)定各孔(kǒng)的(dí)OD值(zhí)
。
結(jié)果判斷
 繪製標準(zhǔn)曲(qū)綫(xiàn)：在(zài)Excel工(gōng)作(zuò)表中，以(yǐ)標準品濃度(dù)作(zuò)橫(héng)坐(zuò)標，對(duì)應OD值(zhí)作(zuò)縱(zòng)坐標(biāo)，繪(huì)製出標(biāo)準(zhǔn)品綫(xiàn)性回(huí)歸(guī)曲(qū)綫，按(àn)曲(qū)綫方程計(jì)算各樣本濃(nóng)度(dù)值
。
 
試劑盒性能
 準(zhǔn)確性(xìng)：標準品(pǐn)綫(xiàn)性回歸與預期濃度相(xiāng)關(guān)係數R值，大(dà)於(yú)等(děng)於(yú)0.9900
。
 靈(líng)敏度：低(dī)檢測(cè)濃(nóng)度小(xiǎo)於1.0 mg/L
。
 特(tè)異(yì)性：不(bù)與(yǔ)其它可溶性結構(gòu)類似物(wù)交(jiāo)叉(chā)反(fǎn)應
。
 重復性：板內，板(bǎn)間變(biàn)異係數(shù)均(jūn)小於15%
。
 貯藏：2-8℃，避光(guāng)防潮保存
。
 有效期(qī)：6個(gè)月(yuè)
免責(zé)聲(shēng)明(míng)
  試劑盒(hé)僅供研究(jiū)使用，不(bù)得(dé)用(yòng)於(yú)臨(lín)床實(shí)驗(yàn)或人體實(shí)驗，否則所產(chǎn)生的一切(qiē)後(hòu)果(guǒ)，由實驗者承(chéng)擔，本公(gōng)司(sī)概不負責
。
  嚴格(gé)按照(zhào)說明書操(cāo)作，實驗(yàn)者(zhě)違(wéi)反說明(míng)書(shū)操作，後(hòu)果(guǒ)由實驗者(zhě)承擔
。