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鹿血(xiě)清(qīng)澱(diàn)粉樣蛋白A(SAA)ELISA檢測試(shì)劑(jì)盒說(shuō)明書
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2022-8-26 瀏覽(lǎn)次(cì)數:971
鹿(lù)血(xiě)清(qīng)澱粉(fěn)樣蛋白(bái)A(SAA)ELISA檢測試劑(jì)盒(hé)說明書
產品(pǐn)名(míng)稱(chēng): 鹿血清澱粉樣蛋白A(SAA)ELISA檢(jiǎn)測試劑(jì)盒
規(guī)格(gé):96T/48T
保存(cún);2-8℃。
檢測(cè)目的(dí):用於(yú)檢(jiǎn)測血(xiě)漿,血清(qīng)及相(xiāng)關(guān)液(yè)體等樣本。例如灌(guàn)洗液(yè),腦脊液,血(xiě)清,血(xiě)漿(jiāng),尿液,胸腹水,細胞(bāo)培(péi)養(yǎng)上清,組織匀(yún)漿等標本(běn).
檢測(cè)種屬:大(dà)鼠(shǔ),小鼠(shǔ),豚(tún)鼠(shǔ),倉(cāng)鼠(shǔ),裸鼠,兔子(zǐ),豬(zhū),犬,猴,馬,牛(niú),馬鈴(líng)薯,鹿,羊,雞,鴨(yā),魚,人(rén),等(děng)動植(zhí)物。
試劑(jì)盒(hé)組成及試(shì)劑(jì)配(pèi)製 :
1.酶(méi)聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔)。
2. 標準品(pǐn)(Standard):2瓶(凍(dòng)幹品(pǐn))。
3. 樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶(píng)
4. 生物素(sù)標記(jì)抗體(tǐ)稀釋(shì)液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶(píng)。
5. 辣(là)根過(guò)氧化(huà)物酶標記親和(hé)素稀(xī)釋(shì)液(yè) (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶(píng)。
6. 生物(wù)素(sù)標記抗體(tǐ)(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(píng)(1:100)
7. 辣(là)根過氧(yǎng)化物(wù)酶(méi)標(biāo)記親(qīn)和(hé)素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9. 濃洗(xǐ)滌(dí)液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使(shǐ)用時(shí)每(měi)瓶(píng)用(yòng)蒸(zhēng)餾(liù)水(shuǐ)稀釋25倍。
10. 終(zhōng)止液(yè)(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
樣品收集(jí),處(chǔ)理(lǐ)及(jí)保存(cún)方法:
1)血(xiě)清(qīng)-----操作過(guò)程中避免任何細胞刺激(jī)。使用不(bù)含熱原和內毒(dú)素的(dí)試(shì)管。收集血液後,1000×g離心(xīn)10分(fēn)鐘將血清(qīng)和紅(hóng)細胞(bāo)迅速(sù)小(xiǎo)心(xīn)地(dì)分(fēn)離(lí)。
2)血(xiě)漿-----EDTA,檸檬酸(suān)鹽,肝素(sù)血(xiě)漿可用(yòng)於檢測。1000×g離心(xīn)30分鐘去(qù)除顆粒。
3)細(xì)胞上(shàng)清液---1000×g離心(xīn)10分鐘去除顆(kē)粒(lì)和聚(jù)合物(wù)。
4)組織匀漿(jiāng)-----將(jiāng)組(zǔ)織加入適量(liáng)生(shēng)理鹽(yán)水搗(dǎo)碎(suì)。1000×g離心10分(fēn)鐘,取(qǔ)上(shàng)清(qīng)液
5)保存------如(rú)果樣品(pǐn)不立即使用,應將(jiāng)其分成小部(bù)分(fēn)-70 ℃保(bǎo)存,避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復冷凍。盡(jìn)可能的不要使(shǐ)用溶(róng)血或(huò)血。如果血清中(zhōng)大量(liáng)顆(kē)粒,檢(jiǎn)測(cè)前(qián)先(xiān)離心或(huò)過(guò)濾。不要在37℃或(huò)更高的溫(wēn)度(dù)加熱(rè)解凍(dòng)。應在(zài)室溫下解凍並確(què)保(bǎo)樣品(pǐn)均匀(yún)地充分(fēn)解凍。
操(cāo)作(zuò)步驟:
1. 標準(zhǔn)品的稀(xī)釋:本試(shì)劑(jì)盒提供(gōng)原(yuán)倍(bèi)標(biāo)準(zhǔn)品一(yī)支,用戶可按照下(xià)列圖表(biǎo)在小(xiǎo)試(shì)管中進行(háng)稀釋(shì)。
2. 加樣:分別設空白孔(空(kōng)白(bái)對(duì)照孔(kǒng)不加樣(yàng)品及酶標(biāo)試劑,其(qí)餘各步操作(zuò)相同),標準孔(kǒng),待測樣品孔(kǒng)。在酶標包(bāo)被(bèi)板上標(biāo)準(zhǔn)品準確加樣 50μl,待(dài)測樣品(pǐn)孔中(zhōng)先(xiān)加樣品稀(xī)釋(shì)液(yè) 40μl,然(rán)後(hòu)再(zài)加(jiā)待測樣品 10μl(樣品(pǐn)終(zhōng)稀釋(shì)度(dù)為(wéi) 5 倍(bèi))。加(jiā)樣將樣(yàng)品加(jiā)於酶標(biāo)板(bǎn)孔底部(bù),盡量(liáng)不觸(chù)及(jí)孔壁,輕輕晃動混匀。
3. 溫(wēn)育:用封板膜封板(bǎn)後(hòu)置 37℃溫(wēn)育 30 分(fēn)鐘(zhōng)。
4. 配液:將 30 倍濃縮(suō)洗滌液用(yòng)蒸(zhēng)餾水 30 倍(bèi)稀釋後備(bèi)用
5. 洗滌(dí):小心(xīn)揭掉(diào)封板膜,棄去液體(tǐ),甩(shuǎi)幹(gān),每(měi)孔(kǒng)加(jiā)滿(mǎn)洗(xǐ)滌液(yè),靜置 30 秒後(hòu)棄去(qù),如此重復 5 次(cì),拍幹。
6. 加(jiā)酶:每(měi)孔加入(rù)酶(méi)標(biāo)試劑(jì) 50μl,空(kōng)白(bái)孔除(chú)外。
7. 溫育:操作同 3。
8. 洗(xǐ)滌(dí):操作同 5。
9. 顯(xiǎn)色:每(měi)孔先加入(rù)顯(xiǎn)色(sè)劑(jì) A50μl,再加入顯色劑(jì) B50μl,輕輕震蕩混(hùn)匀,37℃避光(guāng)顯(xiǎn)色15 分鐘(zhōng).
10. 終(zhōng)止(zhǐ):每孔加(jiā)終(zhōng)止(zhǐ)液 50μl,終止反應(此(cǐ)時藍(lán)色立(lì)轉黃色)。
11. 測定:以空(kōng)白(bái)空(kōng)調零(líng),450nm 波長依序(xù)測量(liáng)各(gè)孔的吸光度(dù)(OD 值(zhí))。 測定(dìng)應在加(jiā)終止液後(hòu) 15 分鐘(zhōng)以內進行。
使用(yòng)注(zhù)意事項:
1. 試劑盒使用前(qián)請保存在(zài)2-8℃。復(fù)溶(róng)後的標(biāo)準品若(ruò)未用完(wán),請(qǐng)廢(fèi)棄。
2. 微量(liáng)試劑運輸(shū)中顛簸和可能的倒(dǎo)置,會(huì)使液(yè)體(tǐ)沾到管壁或瓶蓋(gài)。因此(cǐ)使用前請1000轉/分離(lí)心(xīn)1分(fēn)鐘,以使附(fù)著(zhuó)管壁(bì)或(huò)瓶(píng)蓋(gài)的(dí)液體(tǐ)沉積到管底。
3. 從冰箱(xiāng)中取出的(dí)濃(nóng)縮(suō)洗滌(dí)液可(kě)能有(yǒu)結晶(jīng),屬(shǔ)於正常現(xiàn)象,微加(jiā)熱(rè)至40℃使(shǐ)結(jié)晶完(wán)全溶(róng)解後(hòu)再配製(zhì)洗滌(dí)液。
(加熱溫度(dù)不要超過50℃)使(shǐ)用(yòng)時洗(xǐ)滌(dí)液應(yīng)為室溫(wēn)。
4. 不(bù)同批號的(dí)試(shì)劑(jì)盒組份避免混(hùn)用(yòng)(洗(xǐ)滌(dí)液和(hé)反(fǎn)應終(zhōng)止液除(chú)外(wài))。
5. 充分(fēn)輕微(wēi)混(hùn)匀(yún)對反(fǎn)應結(jié)果(guǒ)尤為(wéi)重(zhòng)要,zui好(hǎo)使(shǐ)用微量振蕩器(使(shǐ)用zui低(dī)頻(pín)率),如無微量振蕩器,可在(zài)反應(yīng)孵(fū)育(yù)前手工輕(qīng)輕混(hùn)匀(yún)。
6. 在試(shì)驗中標準品和樣(yàng)本(běn)檢測時建議(yì)作(zuò)雙(shuāng)孔檢測。
7. 試(shì)驗中(zhōng)所用的試管(guǎn)和吸(xī)頭均為(wéi)一(yī)次(cì)性使(shǐ)用,嚴禁在(zài)不同(tóng)的液(yè)體(tǐ)之(zhī)間混用!否則將影響(xiǎng)試驗(yàn)結果(guǒ)。
8. 試驗中(zhōng)請穿著試驗(yàn)服(fú)並帶乳膠手套(tào)做(zuò)好防護(hù)工(gōng)作。特(tè)別是(shì)檢測(cè)血(xiě)液(yè)或(huò)者(zhě)其(qí)他(tā)體(tǐ)液(yè)標本時,請(qǐng)按國(guó)家生物(wù)試驗室安全防護條列(liè)執行(háng)。
本公(gōng)司(sī)產(chǎn)品僅用(yòng)於科(kē)研。
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