技(jì)術(shù)文獻(xiàn)
技術文獻
MPO elisa酶(méi)聯(lián)免(miǎn)疫試劑(jì)盒(hé)操(cāo)作步(bù)驟
1. 標準(zhǔn)品的(dí)稀(xī)釋(shì)與(yǔ)加樣(yàng):在酶標(biāo)包被(bèi)板上(shàng)設標準(zhǔn)品(pǐn)孔10孔,在(zài)di一(yī),第二孔(kǒng)中分別加(jiā)標準品100μl,然後(hòu)在di一,第二(èr)孔(kǒng)中(zhōng)加標(biāo)準品稀(xī)釋(shì)液50μl,混匀;然後從(cóng)di一孔(kǒng),第(dì)二(èr)孔中(zhōng)各取100μl分別(bié)加到第(dì)三孔和第四(sì)孔(kǒng),再在(zài)第三(sān),第(dì)四孔分別(bié)加標(biāo)準品(pǐn)稀(xī)釋(shì)液50μl,混(hùn)匀(yún);然後在(zài)第三(sān)孔(kǒng)和(hé)第(dì)四孔中先(xiān)各取(qǔ)50μl棄掉,再各取50μl分別取(qǔ)50μl分別加到(dào)第七,第(dì)八(bā)孔(kǒng)中,再(zài)在(zài)第(dì)七(qī),第(dì)八孔中分別(bié)加標準(zhǔn)品稀釋液50μl,混匀(yún)後(hòu)從(cóng)第(dì)七,第(dì)八(bā)孔(kǒng)中加到(dào)第五,第(dì)六(liù)孔(kǒng)中,再在第五,第(dì)六孔中(zhōng)分別加標準(zhǔn)品稀(xī)釋液(yè)50ul,混匀(yún);混匀後從(cóng)第五,第(dì)六(liù)孔中各(gè)分別取50μl加(jiā)到(dào)第九,第十孔中(zhōng),再(zài)在(zài)第九第十(shí)孔分別(bié)加標準(zhǔn)品稀(xī)釋液(yè)50μl,混(hùn)匀後從(cóng)第(dì)九(jiǔ)第(dì)十孔中各取50μl棄(qì)掉(diào)。(稀(xī)釋(shì)後各孔加樣量(liáng)都(dū)為50μl,濃(nóng)度(dù)分別(bié)為180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。
2. 加(jiā)樣(yàng):分(fēn)別設空白孔(kǒng)(空(kōng)白(bái)對(duì)照孔(kǒng)不加樣(yàng)品及(jí)酶(méi)標試劑,其(qí)餘(yú)各(gè)步操作(zuò)相同(tóng)),待測樣品(pǐn)孔。在酶(méi)標包被板上(shàng)待測樣(yàng)品孔中(zhōng)先加樣品(pǐn)稀釋液40μl,然後(hòu)再加待測(cè)樣(yàng)品10μl(樣(yàng)品最(zuì)終稀(xī)釋(shì)度(dù)為5倍)。加樣將樣品(pǐn)加於酶標(biāo)板(bǎn)孔底(dǐ)部,盡(jìn)量不觸及(jí)孔壁(bì),輕輕(qīng)晃(huǎng)動混(hùn)匀。
3. 溫(wēn)育(yù):用封(fēng)板膜封板(bǎn)後(hòu)置(zhì)37℃溫育(yù)30分鐘。
4. 配(pèi)液(yè):將30(48T的20倍(bèi))倍濃縮(suō)洗滌(dí)液用(yòng)蒸餾(liù)水(shuǐ)30(48T的20倍)倍稀(xī)釋(shì)後備(bèi)用。
5. 洗滌:小心揭(jiē)掉(diào)封(fēng)板(bǎn)膜,棄去(qù)液(yè)體,甩(shuǎi)幹,每(měi)孔加(jiā)滿洗(xǐ)滌(dí)液,靜置(zhì)30秒後棄去,如(rú)此重復(fù)5次,拍幹(gān)。
6. 加酶:每孔加入酶(méi)標(biāo)試(shì)劑(jì)50μl,空(kōng)白孔除外。
7. 溫(wēn)育:操(cāo)作(zuò)同3。
8. 洗(xǐ)滌:操(cāo)作同(tóng)5。
9. 顯色:每孔先加(jiā)入顯色劑A50μl,再(zài)加入顯色劑(jì)B50μl,輕輕震(zhèn)蕩(dàng)混匀,37℃避(bì)光顯(xiǎn)色15分鐘.
10. 終止(zhǐ):每孔(kǒng)加(jiā)終(zhōng)止(zhǐ)液50μl,終止(zhǐ)反應(此(cǐ)時藍色(sè)立(lì)轉黃色(sè))。
11. 測定:以空(kōng)白空調零(líng),450nm波(bō)長依序(xù)測量(liáng)各(gè)孔的吸光(guāng)度(dù)(OD值(zhí))。 測定應在加(jiā)終(zhōng)止液(yè)後(hòu)15分(fēn)鐘。
嗜(shì)酸性(xìng)粒(lì)細胞陽離子(zǐ)蛋白(bái)抗體
類表皮(pí)生長(cháng)因子域7抗體(tǐ)
α彈(dàn)性(xìng)蛋白抗體
黃熱(rè)病(bìng)毒(dú)包膜糖蛋白抗體(tǐ)
HER2受體(tǐ)抗體(tǐ)
轉錄因子E2F-4抗體
磷(lín)酸(suān)化表皮(pí)生長因子(zǐ)受體(tǐ)抗體
磷酸(suān)化表(biǎo)皮生(shēng)長(cháng)因(yīn)子受(shòu)體(tǐ)抗(kàng)體
磷酸化表(biǎo)皮(pí)生長因子(zǐ)受(shòu)體抗體(tǐ)
磷酸化(huà)埃(āi)茲蛋(dàn)白抗體(tǐ)
磷酸化(huà)埃茲(zī)蛋(dàn)白抗體
磷酸化細(xì)胞(bāo)轉(zhuǎn)錄(lù)因子(zǐ)ELK1抗體(tǐ)
磷酸(suān)化酪氨酸蛋白激酶(méi)A2受體抗(kàng)體(tǐ)
Ephrin B抗(kàng)體
磷酸化(huà)Ephrin B抗體(tǐ)
磷(lín)酸化Ephrin B抗(kàng)體(tǐ)
磷酸化(huà)Ephrin B抗(kàng)體
磷酸(suān)化Ephrin B抗(kàng)體(tǐ)
磷(lín)酸(suān)化雌激素受體(tǐ)α抗體
磷酸(suān)化雌(cí)激素受體α抗(kàng)體
表皮(pí)生長(cháng)因子(zǐ)受體底物8抗(kàng)體(tǐ)
內皮素1抗(kàng)體
腸道病毒71型/手足口病(bìng)病毒抗體(tǐ)
絲裂原活化蛋(dàn)白(bái)激(jī)酶1抗體
