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PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒
商品屬(shǔ)性(xìng)
| 產(chǎn)品(pǐn)名稱 | 英(yīng)文名(míng)稱(chēng) | 貨號 |
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萊氏無膽(dǎn)甾(zāi)原體(tǐ)PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé) |
Acholeplasma laidlawii PCR |
YS-P013772 |
分類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑(jì)盒
儲存(cún)條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避光(guāng)保存(cún)，避免(miǎn)反復凍融(róng)。
運輸：低溫，避光。
有效(xiào)期(qī)：一年
貨期：現貨PCR試劑(jì)盒的(dí)有效期一(yī)般(bān)為1年(nián)，這(zhè)是(shì)指在適當(dāng)的儲存溫度下(xià)。核酸擴增(zēng)部分的試(shì)劑一(yī)般要(yào)貯(zhù)存於(yú)-20℃下，產物檢(jiǎn)測(cè)部分試(shì)劑(jì)則貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避免反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融。
【結(jié)果分(fēn)析(xī)條件(jiàn)設定】
u 閾值(Threshold)設定：將(jiāng)閾值綫(xiàn)設(shè)定在(zài)剛好(hǎo)超過正常陰性(xìng)質(zhì)控品擴(kuò)增曲(qū)綫的最(zuì)高點(diǎn)。
【質(zhì)控(kòng)標(biāo)準】
2. 陽(yáng)性(xìng)質控品的檢測結(jié)果應(yīng)為(wéi)陽性(xìng)，有(yǒu)明顯的指數擴增期，Ct值(zhí)應小(xiǎo)於等於(yú)35；
3. 以上要(yào)求需在(zài)一次實驗中同(tóng)時滿(mǎn)足(zú)，否(fǒu)則(zé)該次實驗(yàn)視為(wéi)無效(xiào)。
【結果(guǒ)判(pàn)斷】
2.可疑：有明(míng)顯的指數(shù)擴(kuò)增期，且38≤Ct<40，此時(shí)樣本為(wéi)可疑樣本；對於(yú)可疑(yí)樣(yàng)本建議復核一(yī)次，若復核結(jié)果Ct<40且(qiě)有指數(shù)擴增期，則判(pàn)定(dìng)為(wéi)陽(yáng)性(xìng)，否則(zé)判(pàn)定為(wéi)陰性(xìng)；
3. 陰(yīn)性：無(wú)指數擴(kuò)增(zēng)期，Ct=40或(huò)無Ct值均(jūn)判定(dìng)為(wéi)陰性樣(yàng)本。
【對檢驗(yàn)結果(guǒ)的(dí)解釋】
1. 實驗(yàn)室環(huán)境(jìng)汙(wū)染，試劑(jì)汙染，樣(yàng)品(pǐn)交(jiāo)叉(chā)汙染(rǎn)會出(chū)現假(jiǎ)陽(yáng)性結(jié)果；
2. 試(shì)劑(jì)運輸，保存(cún)不(bù)當或(huò)試劑配製不準確(què)引(yǐn)起的試(shì)劑檢測(cè)效能下(xià)降(jiàng)，可(kě)能會導致(zhì)出現假陰性結果。
PCR反應的(dí)特(tè)異性：
②鹼(jiǎn)基配(pèi)對(duì)原則；
③Taq DNA聚合酶(méi)合成反應的忠實性(xìng)；
④靶(bǎ)基(jī)因的特異(yì)性與(yǔ)保守性(xìng)。
萊氏(shì)無膽甾原(yuán)體PCR檢測試劑盒其(qí)中引物(wù)與模(mó)板的(dí)正確(què)結合是(shì)關(guān)鍵(jiàn)。引物(wù)與模(mó)板(bǎn)的結(jié)合及引物鏈(liàn)的(dí)延伸(shēn)是遵循(xún)鹼基(jī)配(pèi)對(duì)原則(zé)的。聚合(hé)酶合成(chéng)反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚(jù)合酶(méi)耐高溫(wēn)性，使反應中(zhōng)模板與引物(wù)的結合(復(fù)性(xìng))可以在較(jiào)高的溫度下進行，結(jié)合的特(tè)異性大大(dà)增加，被擴增(zēng)的靶(bǎ)基因片(piàn)段(duàn)也(yě)就(jiù)能保持(chí)很高的正(zhèng)確(què)度。再通過選擇特(tè)異(yì)性和保(bǎo)守性高(gāo)的靶基因(yīn)區(qū)，其(qí)特異性程度(dù)就更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏度高(gāo)
PCR產物的生(shēng)成量是以指數(shù)方式增(zēng)加的，能(néng)將皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴增到微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從100萬個(gè)細(xì)胞(bāo)中(zhōng)檢(jiǎn)出一(yī)個(gè)靶細(xì)胞；在(zài)病毒的檢(jiǎn)測中(zhōng)，PCR的靈敏(mǐn)度可達3個RFU(空斑形成單(dān)位)；在(zài)細(xì)菌(jūn)學(xué)中(zhōng)zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率(shuài)為(wéi)3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便(biàn)，快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的(dí)Taq DNA聚合(hé)酶，一次性地將(jiāng)反(fǎn)應液加好後(hòu)，即(jí)在DNA擴增液(yè)和水浴(yù)鍋上進(jìn)行(háng)變性-退火-延伸(shēn)反應(yīng)，一般(bān)在(zài)2～4 小(xiǎo)時完成(chéng)擴增反應。擴增產物(wù)一(yī)般用電泳(yǒng)分析(xī)，不(bù)一定要(yào)用(yòng)同位素(sù)，無放射性(xìng)汙染，易推廣。
(4) 對(duì)標本(běn)的純度要求低(dī)
不(bù)需要(yào)分(fēn)離病毒或細菌(jūn)及培(péi)養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗製品及總RNA均可作為擴(kuò)增(zēng)模板。可直(zhí)接(jiē)用(yòng)臨(lín)床標本如(rú)血液，體腔液，洗嗽液，毛發，細(xì)胞，活(huó)PCR技術概(gài)論。
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