產(chǎn)品中心(xīn)
PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé)
商品屬(shǔ)性(xìng)
| 產(chǎn)品名稱 | 英(yīng)文名(míng)稱(chēng) | 貨(huò)號 |
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非洲馬瘟病毒PCR檢測試劑盒(hé) |
African Horse Sickness Virus(AHSV)RTPCR |
YS-P013797 |
分類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒
儲(chǔ)存(cún)條件：-20℃避(bì)光保存(cún)，避免(miǎn)反(fǎn)復凍(dòng)融。
運(yùn)輸(shū)：低溫，避光。
有效(xiào)期(qī)：一年
貨期：現(xiàn)貨(huò)PCR試劑盒(hé)的(dí)有(yǒu)效期一(yī)般為(wéi)1年，這是指(zhǐ)在(zài)適當的儲存(cún)溫(wēn)度(dù)下。核(hé)酸擴增(zēng)部(bù)分的試劑(jì)一(yī)般(bān)要(yào)貯存(cún)於-20℃下(xià)，產(chǎn)物檢(jiǎn)測部分(fēn)試劑則(zé)貯(zhù)存於2-8℃。盡量(liáng)避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍(dòng)融。
【結果(guǒ)分析(xī)條件設定(dìng)】
【質(zhì)控(kòng)標準(zhǔn)】
2. 陽性質控(kòng)品的(dí)檢測結(jié)果應(yīng)為陽性，有(yǒu)明顯的指(zhǐ)數擴(kuò)增期，Ct值應(yīng)小於等(děng)於(yú)35；
3. 以(yǐ)上要(yào)求需在一次實(shí)驗中同(tóng)時(shí)滿足，否則(zé)該次(cì)實驗(yàn)視為無效。
【結果(guǒ)判斷(duàn)】
2.可疑(yí)：有(yǒu)明顯的指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期，且38≤Ct<40，此時樣(yàng)本(běn)為可(kě)疑樣本(běn)；對(duì)於(yú)可疑(yí)樣本建議(yì)復核一(yī)次，若復(fù)核結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指數(shù)擴增期，則判定(dìng)為(wéi)陽性(xìng)，否則(zé)判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰性(xìng)；
3. 陰性(xìng)：無指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct=40或(huò)無Ct值均判定為陰性(xìng)樣本(běn)。
【對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的解(jiě)釋(shì)】
1. 實驗室環(huán)境汙染(rǎn)，試劑汙(wū)染，樣品交叉汙(wū)染會出現(xiàn)假(jiǎ)陽性結果(guǒ)；
2. 試劑運(yùn)輸，保存不當或試(shì)劑配製不準確引起的試(shì)劑檢(jiǎn)測效(xiào)能下降(jiàng)，可(kě)能(néng)會導(dǎo)致出現假陰性(xìng)結(jié)果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應的(dí)特(tè)異性：
②鹼基配對原則；
③Taq DNA聚(jù)合酶(méi)合成反應的忠(zhōng)實性(xìng)；
④靶基因的特異性與保守性。
非(fēi)洲(zhōu)馬瘟(wēn)病毒(dú)PCR檢測試(shì)劑盒(hé)其中(zhōng)引物(wù)與模(mó)板(bǎn)的正確(què)結(jié)合是(shì)關鍵(jiàn)。引物與(yǔ)模(mó)板的(dí)結(jié)合及(jí)引(yǐn)物鏈的延伸是(shì)遵(zūn)循(xún)鹼基(jī)配對(duì)原(yuán)則的(dí)。聚合(hé)酶合成反應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實(shí)性(xìng)及Taq DNA聚合(hé)酶耐高溫(wēn)性(xìng)，使反(fǎn)應中模板(bǎn)與(yǔ)引(yǐn)物(wù)的結合(復性(xìng))可(kě)以在較高的溫度下(xià)進行，結合(hé)的(dí)特(tè)異性(xìng)大大增加，被(bèi)擴增(zēng)的(dí)靶基因片(piàn)段也就(jiù)能保持(chí)很(hěn)高的正確度(dù)。再(zài)通(tōng)過選擇特異性(xìng)和(hé)保(bǎo)守性(xìng)高(gāo)的(dí)靶基因區，其特(tè)異性程度就更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產物的生成量(liáng)是以(yǐ)指數方式(shì)增加的，能將皮(pí)克(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起始待(dài)測(cè)模板擴增(zēng)到微克(ug=10-6g)水平(píng)。能(néng)從(cóng)100萬個(gè)細(xì)胞(bāo)中檢出(chū)一(yī)個(gè)靶細(xì)胞；在(zài)病毒的(dí)檢測(cè)中，PCR的(dí)靈(líng)敏(mǐn)度(dù)可(kě)達(dá)3個RFU(空(kōng)斑形(xíng)成單位(wèi))；在(zài)細菌學(xué)中(zhōng)zui小檢(jiǎn)出(chū)率為(wéi)3個細菌(jūn)。
(3) 簡便，快速
PCR反應用耐高(gāo)溫的Taq DNA聚合(hé)酶，一次性地(dì)將反應(yīng)液(yè)加(jiā)好後，即在(zài)DNA擴(kuò)增液和水浴鍋(guō)上進行(háng)變(biàn)性(xìng)-退(tuì)火(huǒ)-延(yán)伸反應(yīng)，一(yī)般在2～4 小時完成(chéng)擴增反應(yīng)。擴(kuò)增產物一(yī)般(bān)用(yòng)電(diàn)泳分析，不(bù)一定要用(yòng)同位素，無放(fàng)射性汙染，易推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本(běn)的(dí)純度(dù)要(yào)求低
不需(xū)要分離病(bìng)毒(dú)或細(xì)菌(jūn)及培養細(xì)胞(bāo)，DNA 粗製(zhì)品(pǐn)及總RNA均(jūn)可作為擴增模(mó)板。可直接(jiē)用臨床(chuáng)標本如血液(yè)，體(tǐ)腔液，洗嗽(sòu)液，毛(máo)發(fā)，細胞，活PCR技(jì)術概論。
