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產品中心(xīn)
PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒(hé)
商(shāng)品屬性
| 產(chǎn)品(pǐn)名(míng)稱 | 英文名(míng)稱(chēng) | 貨號 |
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貝巴魯(lǔ)病(bìng)毒PCR檢(jiǎn)測試劑盒 |
Bebaru Virus(BEBV)RTPCR |
YS-P013898 |
分類：PCR檢測試劑(jì)盒
儲存條件：-20℃避(bì)光(guāng)保存，避免反(fǎn)復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低(dī)溫(wēn)，避(bì)光。
有效(xiào)期(qī)：一年
貨期(qī)：現貨PCR試(shì)劑盒(hé)的(dí)有(yǒu)效(xiào)期(qī)一(yī)般為(wéi)1年，這(zhè)是(shì)指在適(shì)當(dāng)的儲(chǔ)存溫度下。核(hé)酸(suān)擴增(zēng)部(bù)分(fēn)的(dí)試劑一(yī)般要(yào)貯(zhù)存於-20℃下，產(chǎn)物(wù)檢測部分(fēn)試劑(jì)則貯存於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避免反(fǎn)復凍融(róng)。
【結果(guǒ)分(fēn)析條件(jiàn)設定】
u 閾值(Threshold)設(shè)定：將(jiāng)閾(yù)值(zhí)綫(xiàn)設(shè)定在剛好超(chāo)過正常陰性質控(kòng)品擴增曲綫(xiàn)的最高點(diǎn)。
【質控標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽性質(zhì)控品(pǐn)的(dí)檢測結(jié)果(guǒ)應(yīng)為陽性，有(yǒu)明顯(xiǎn)的指數(shù)擴增期，Ct值應小於等(děng)於35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要求(qiú)需(xū)在一次實(shí)驗(yàn)中同(tóng)時(shí)滿足(zú)，否則(zé)該(gāi)次實驗視(shì)為(wéi)無(wú)效(xiào)。
【結果判(pàn)斷】
2.可疑：有明(míng)顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，且38≤Ct<40，此(cǐ)時樣(yàng)本為(wéi)可疑樣本；對(duì)於(yú)可疑(yí)樣(yàng)本建議復核一次，若復核結(jié)果Ct<40且有(yǒu)指數(shù)擴增期，則(zé)判定(dìng)為陽性，否則判定為陰(yīn)性；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無指數擴增(zēng)期，Ct=40或(huò)無Ct值(zhí)均(jūn)判(pàn)定為陰(yīn)性樣本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗(yàn)結果(guǒ)的解釋(shì)】
1. 實驗室環境汙染(rǎn)，試劑汙染，樣品(pǐn)交(jiāo)叉汙(wū)染(rǎn)會(huì)出現假陽性結果；
2. 試劑(jì)運輸，保存(cún)不(bù)當或試(shì)劑(jì)配製不準確(què)引起(qǐ)的試(shì)劑(jì)檢(jiǎn)測(cè)效(xiào)能(néng)下降(jiàng)，可能會(huì)導致(zhì)出現假(jiǎ)陰性結果。
PCR反應(yīng)的(dí)特異性：
②鹼基(jī)配對原(yuán)則；
③Taq DNA聚合酶合成反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實(shí)性(xìng)；
④靶基(jī)因(yīn)的特異性與保守(shǒu)性(xìng)。
貝巴(bā)魯病毒PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒其中引物與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的正確結合(hé)是關鍵。引物(wù)與(yǔ)模(mó)板的結合及引(yǐn)物(wù)鏈的(dí)延(yán)伸(shēn)是遵循(xún)鹼(jiǎn)基(jī)配對原則的。聚(jù)合(hé)酶合(hé)成反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐(nài)高溫性(xìng)，使(shǐ)反(fǎn)應中(zhōng)模板與(yǔ)引(yǐn)物的結(jié)合(復(fù)性(xìng))可(kě)以(yǐ)在(zài)較(jiào)高的溫度(dù)下進(jìn)行，結合的特(tè)異性(xìng)大(dà)大(dà)增加(jiā)，被擴增(zēng)的靶(bǎ)基因片(piàn)段(duàn)也就能保持(chí)很高的(dí)正(zhèng)確度(dù)。再通過選擇特異(yì)性(xìng)和保守(shǒu)性高的(dí)靶基(jī)因區，其(qí)特異性(xìng)程(chéng)度(dù)就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度(dù)高(gāo)
PCR產(chǎn)物的(dí)生(shēng)成量(liáng)是以指(zhǐ)數方式(shì)增(zēng)加的，能將皮(pí)克(pg=10-12g)量級的起始(shǐ)待(dài)測(cè)模(mó)板(bǎn)擴增到(dào)微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能(néng)從(cóng)100萬(wàn)個(gè)細胞(bāo)中檢出(chū)一個(gè)靶(bǎ)細(xì)胞(bāo)；在(zài)病毒(dú)的檢測中(zhōng)，PCR的靈(líng)敏(mǐn)度可(kě)達(dá)3個RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌(jūn)學(xué)中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出(chū)率為3個細(xì)菌。
(3) 簡便(biàn)，快速
PCR反應用耐高(gāo)溫的Taq DNA聚(jù)合酶(méi)，一(yī)次性地將反應液加(jiā)好(hǎo)後，即在DNA擴(kuò)增液(yè)和水(shuǐ)浴鍋上(shàng)進(jìn)行變性-退火-延伸(shēn)反(fǎn)應(yīng)，一般(bān)在2～4 小時完(wán)成(chéng)擴(kuò)增(zēng)反應(yīng)。擴增產物一(yī)般(bān)用電(diàn)泳分析，不一(yī)定(dìng)要(yào)用(yòng)同(tóng)位(wèi)素(sù)，無放(fàng)射(shè)性汙(wū)染(rǎn)，易推(tuī)廣。
(4) 對標本的(dí)純度要求(qiú)低(dī)
不需(xū)要分離病毒或細(xì)菌及培(péi)養(yǎng)細胞，DNA 粗製品及總RNA均可作(zuò)為擴增模板。可直接用臨(lín)床(chuáng)標本(běn)如(rú)血液，體(tǐ)腔液，洗嗽(sòu)液(yè)，毛發，細(xì)胞，活PCR技術概論。
