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PCR檢測試劑(jì)盒
破傷風梭狀(zhuàng)芽孢(bāo)杆菌PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒
商品(pǐn)屬(shǔ)性
| 產品(pǐn)名稱(chēng) | 英文(wén)名稱 | 貨(huò)號 |
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破傷(shāng)風梭(suō)狀芽孢(bāo)杆(gān)菌(jūn)PCR檢(jiǎn)測試劑盒 |
Clostridium tetaniPCR |
YS-P014039 |
分類：PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒
儲存條件(jiàn)：-20℃避(bì)光(guāng)保存(cún)，避(bì)免反(fǎn)復(fù)凍融。
運輸(shū)：低溫，避(bì)光。
有(yǒu)效(xiào)期(qī)：一(yī)年
貨期：現貨PCR試劑(jì)盒的(dí)有效期(qī)一(yī)般(bān)為(wéi)1年，這(zhè)是指(zhǐ)在適(shì)當的(dí)儲存溫度下(xià)。核酸擴增(zēng)部分的試(shì)劑(jì)一(yī)般(bān)要(yào)貯(zhù)存於-20℃下，產(chǎn)物(wù)檢(jiǎn)測部分試劑(jì)則貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡量避免反復(fù)凍(dòng)融。
【結果(guǒ)分析條(tiáo)件設定(dìng)】
u 閾(yù)值(Threshold)設定：將閾值(zhí)綫(xiàn)設(shè)定(dìng)在剛好超(chāo)過(guò)正常(cháng)陰性質(zhì)控品擴增曲(qū)綫的(dí)最(zuì)高點。
【質控(kòng)標(biāo)準】
2. 陽性質控品(pǐn)的檢測(cè)結(jié)果應為陽性(xìng)，有明顯的(dí)指數擴(kuò)增期(qī)，Ct值應小於等(děng)於(yú)35；
3. 以(yǐ)上要(yào)求需(xū)在一次實(shí)驗中(zhōng)同時滿足(zú)，否則該(gāi)次實驗(yàn)視(shì)為(wéi)無效。
【結果(guǒ)判斷(duàn)】
2.可(kě)疑(yí)：有(yǒu)明(míng)顯的指(zhǐ)數擴(kuò)增期，且38≤Ct<40，此時(shí)樣本為(wéi)可(kě)疑樣(yàng)本(běn)；對(duì)於可疑樣(yàng)本(běn)建(jiàn)議(yì)復核一次，若復核(hé)結果Ct<40且有(yǒu)指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，則(zé)判定為陽(yáng)性，否則判定為(wéi)陰性(xìng)；
3. 陰性：無(wú)指數(shù)擴(kuò)增期，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值均(jūn)判(pàn)定為(wéi)陰(yīn)性(xìng)樣(yàng)本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結果的解釋(shì)】
1. 實(shí)驗室環境(jìng)汙染，試劑汙染，樣品交(jiāo)叉汙(wū)染(rǎn)會出現假(jiǎ)陽性結(jié)果(guǒ)；
2. 試劑運(yùn)輸，保存不當或試(shì)劑配製(zhì)不(bù)準確(què)引起的(dí)試劑檢(jiǎn)測效能下(xià)降(jiàng)，可能(néng)會(huì)導致(zhì)出(chū)現假(jiǎ)陰性(xìng)結果。
PCR反(fǎn)應的特異性：
②鹼基(jī)配(pèi)對原則(zé)；
③Taq DNA聚合酶合成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的忠實性(xìng)；
④靶(bǎ)基因(yīn)的(dí)特異(yì)性與保(bǎo)守性(xìng)。
破傷風梭狀芽(yá)孢杆菌PCR檢(jiǎn)測試劑盒其(qí)中引物與模板的(dí)正確結合是關(guān)鍵(jiàn)。引物與(yǔ)模板(bǎn)的結(jié)合(hé)及引物(wù)鏈的(dí)延(yán)伸是遵(zūn)循鹼基配對原則的。聚(jù)合(hé)酶(méi)合(hé)成反(fǎn)應(yīng)的忠(zhōng)實性及Taq DNA聚合酶(méi)耐高溫性(xìng)，使(shǐ)反(fǎn)應中模板與引(yǐn)物的(dí)結合(hé)(復性)可以(yǐ)在(zài)較高(gāo)的溫度下(xià)進(jìn)行(háng)，結合的特異(yì)性(xìng)大大增加，被(bèi)擴增的靶基因片段也(yě)就能保持(chí)很(hěn)高(gāo)的(dí)正(zhèng)確(què)度。再通過(guò)選擇特異性和(hé)保守性高(gāo)的靶基因(yīn)區(qū)，其特異性程度(dù)就更(gēng)高。
(2) 靈敏度高(gāo)
PCR產物(wù)的生成(chéng)量是以指數方式增(zēng)加的，能將皮克(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起始待測(cè)模(mó)板(bǎn)擴增到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出(chū)一(yī)個(gè)靶細胞；在(zài)病毒的檢(jiǎn)測中，PCR的靈敏(mǐn)度可達3個(gè)RFU(空(kōng)斑形成單(dān)位)；在細菌學(xué)中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出(chū)率為3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便，快(kuài)速
PCR反應(yīng)用(yòng)耐(nài)高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶，一(yī)次性地將反(fǎn)應液(yè)加(jiā)好(hǎo)後(hòu)，即(jí)在DNA擴(kuò)增液(yè)和水浴鍋上(shàng)進(jìn)行變性(xìng)-退火(huǒ)-延伸反(fǎn)應(yīng)，一(yī)般(bān)在(zài)2～4 小時完(wán)成(chéng)擴增(zēng)反應(yīng)。擴(kuò)增(zēng)產物一(yī)般(bān)用電(diàn)泳(yǒng)分析(xī)，不一定(dìng)要用同(tóng)位素(sù)，無放(fàng)射性汙(wū)染，易推(tuī)廣。
(4) 對標本(běn)的純度要求(qiú)低(dī)
不需要(yào)分離(lí)病毒(dú)或細(xì)菌(jūn)及(jí)培養(yǎng)細胞，DNA 粗製品(pǐn)及總RNA均可作為(wéi)擴增模板。可直接用(yòng)臨床(chuáng)標(biāo)本(běn)如血(xiě)液(yè)，體腔(qiāng)液(yè)，洗嗽液，毛發(fā)，細(xì)胞(bāo)，活(huó)PCR技(jì)術(shù)概論。
