產(chǎn)品(pǐn)中心
PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒(hé)
商(shāng)品(pǐn)屬(shǔ)性(xìng)
| 產(chǎn)品名(míng)稱 | 英(yīng)文名稱(chēng) | 貨號 |
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古柏綫蟲通用PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé) |
Cooperia spp.PCR |
YS-P014052 |
分(fēn)類：PCR檢測試劑(jì)盒
儲(chǔ)存條(tiáo)件：-20℃避(bì)光保(bǎo)存(cún)，避(bì)免反復(fù)凍融。
運輸：低(dī)溫(wēn)，避光(guāng)。
有(yǒu)效期(qī)：一年
貨(huò)期：現(xiàn)貨PCR試劑盒的(dí)有效(xiào)期一般為(wéi)1年，這是(shì)指在適當的儲存溫(wēn)度下。核酸擴增部分(fēn)的(dí)試劑(jì)一(yī)般要貯(zhù)存於-20℃下(xià)，產(chǎn)物(wù)檢(jiǎn)測部(bù)分試(shì)劑(jì)則貯存於2-8℃。盡量(liáng)避免反復(fù)凍融。
【結(jié)果(guǒ)分(fēn)析條件設定(dìng)】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定(dìng)：將閾值綫設定在(zài)剛(gāng)好超過(guò)正常陰性(xìng)質控品擴增(zēng)曲綫(xiàn)的最高(gāo)點(diǎn)。
【質控標準(zhǔn)】
2. 陽性(xìng)質(zhì)控品的(dí)檢測結果(guǒ)應為陽性(xìng)，有明(míng)顯的指數擴增期(qī)，Ct值應小(xiǎo)於等(děng)於(yú)35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要求需(xū)在一(yī)次(cì)實(shí)驗(yàn)中(zhōng)同時(shí)滿足，否則該(gāi)次(cì)實(shí)驗視為無(wú)效。
【結果判斷】
2.可疑(yí)：有(yǒu)明(míng)顯的指(zhǐ)數擴增期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣(yàng)本為(wéi)可疑樣(yàng)本；對於(yú)可(kě)疑樣(yàng)本(běn)建(jiàn)議復核(hé)一(yī)次(cì)，若復(fù)核結(jié)果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期(qī)，則(zé)判定為(wéi)陽(yáng)性(xìng)，否(fǒu)則判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性；
3. 陰性：無(wú)指數擴(kuò)增(zēng)期，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值(zhí)均判定為陰(yīn)性樣本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結(jié)果的解釋】
1. 實(shí)驗室環境汙染，試劑汙染，樣(yàng)品交叉(chā)汙染會(huì)出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陽性(xìng)結果(guǒ)；
2. 試劑(jì)運(yùn)輸，保存不(bù)當或試劑(jì)配(pèi)製(zhì)不(bù)準(zhǔn)確引起的試(shì)劑檢測(cè)效能下降，可(kě)能會(huì)導(dǎo)致出(chū)現假(jiǎ)陰(yīn)性結果。
PCR反應的(dí)特異性：
②鹼基(jī)配對原則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合酶合成反應的忠(zhōng)實性(xìng)；
④靶(bǎ)基因的(dí)特異性與(yǔ)保(bǎo)守性(xìng)。
古柏(bǎi)綫蟲(chóng)通(tōng)用PCR檢測試劑(jì)盒(hé)其中引物與模板的正確結合(hé)是(shì)關鍵(jiàn)。引物與模板的結(jié)合及引(yǐn)物(wù)鏈(liàn)的延(yán)伸(shēn)是(shì)遵循(xún)鹼基(jī)配對(duì)原(yuán)則的。聚合(hé)酶合成反(fǎn)應的忠(zhōng)實性及Taq DNA聚合(hé)酶耐高(gāo)溫(wēn)性，使(shǐ)反(fǎn)應中模板(bǎn)與引物(wù)的(dí)結(jié)合(hé)(復性)可以(yǐ)在較高的(dí)溫度(dù)下進行，結(jié)合的特異(yì)性大(dà)大增加，被(bèi)擴(kuò)增的靶(bǎ)基因(yīn)片段(duàn)也就(jiù)能保(bǎo)持很高的正(zhèng)確度(dù)。再通過選(xuǎn)擇特異(yì)性和保守性高(gāo)的靶基因區，其(qí)特異(yì)性程度(dù)就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度(dù)高
PCR產物的生成(chéng)量(liáng)是以指數方式增加(jiā)的，能(néng)將皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量級的起(qǐ)始(shǐ)待測(cè)模(mó)板擴增(zēng)到微克(kè)(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個細(xì)胞中檢(jiǎn)出一個靶細胞；在(zài)病毒的檢測(cè)中，PCR的靈敏度(dù)可(kě)達3個RFU(空(kōng)斑(bān)形(xíng)成(chéng)單(dān)位)；在(zài)細(xì)菌學中(zhōng)zui小檢出(chū)率(shuài)為3個細菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快(kuài)速
PCR反(fǎn)應用(yòng)耐高溫(wēn)的Taq DNA聚合(hé)酶，一(yī)次(cì)性(xìng)地將反應(yīng)液(yè)加好後，即在DNA擴增液和(hé)水浴鍋(guō)上進(jìn)行變性-退火-延伸(shēn)反應(yīng)，一般在(zài)2～4 小時完(wán)成(chéng)擴增反(fǎn)應(yīng)。擴(kuò)增產物一般用(yòng)電(diàn)泳分析，不一定要用(yòng)同位素，無放(fàng)射性汙染(rǎn)，易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本的(dí)純度要求低
不需(xū)要分離(lí)病(bìng)毒或(huò)細菌(jūn)及(jí)培(péi)養細(xì)胞(bāo)，DNA 粗(cū)製品(pǐn)及(jí)總RNA均可作為擴增模板。可(kě)直接用(yòng)臨床標本如血液，體腔(qiāng)液(yè)，洗(xǐ)嗽液(yè)，毛(máo)發(fā)，細(xì)胞，活PCR技(jì)術概論(lùn)。
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