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PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒(hé)
| 產(chǎn)品(pǐn)名稱 | 英(yīng)文名稱 | 貨號 |
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細(xì)粒(lì)棘球縧蟲PCR檢測試劑盒(hé) |
Echinococcus granulosusPCR |
YS-P014111 |
分(fēn)類:PCR檢測試(shì)劑盒
儲(chǔ)存條件(jiàn):-20℃避光保存(cún),避(bì)免(miǎn)反復(fù)凍融(róng)。
運(yùn)輸(shū):低溫,避光。
有(yǒu)效期:一年
貨期(qī):現(xiàn)貨(huò)PCR試劑(jì)盒的(dí)有效(xiào)期一般為(wéi)1年(nián),這(zhè)是指(zhǐ)在(zài)適當的儲存溫(wēn)度下(xià)。核酸(suān)擴(kuò)增部分的試(shì)劑(jì)一般(bān)要貯存於(yú)-20℃下,產(chǎn)物檢(jiǎn)測部分試劑(jì)則貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡(jìn)量避免(miǎn)反復凍(dòng)融。
u 閾值(Threshold)設(shè)定(dìng):將閾值綫設(shè)定(dìng)在剛好(hǎo)超過正常陰性質控(kòng)品擴增(zēng)曲綫的最(zuì)高點(diǎn)。
2. 陽性(xìng)質(zhì)控品(pǐn)的檢(jiǎn)測結(jié)果應為(wéi)陽(yáng)性(xìng),有明(míng)顯的指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期,Ct值應小(xiǎo)於(yú)等於35;
3. 以上要(yào)求需(xū)在(zài)一次(cì)實驗中同(tóng)時滿(mǎn)足,否則該次(cì)實驗視為無效(xiào)。
2.可(kě)疑:有明(míng)顯的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期,且38≤Ct<40,此(cǐ)時樣(yàng)本為(wéi)可疑樣本(běn);對於可疑樣本(běn)建議(yì)復(fù)核一(yī)次(cì),若復(fù)核結(jié)果Ct<40且有指數擴增(zēng)期,則(zé)判定為(wéi)陽性(xìng),否則判定(dìng)為陰性;
3. 陰(yīn)性:無(wú)指數擴增期(qī),Ct=40或無Ct值(zhí)均判定為(wéi)陰性樣本(běn)。
【對(duì)檢驗結果的(dí)解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗室環(huán)境汙染,試劑汙(wū)染,樣(yàng)品(pǐn)交叉(chā)汙(wū)染會出(chū)現假陽性結果;
2. 試劑運(yùn)輸,保存(cún)不(bù)當或試(shì)劑(jì)配製(zhì)不準(zhǔn)確(què)引(yǐn)起(qǐ)的試劑(jì)檢測效(xiào)能(néng)下(xià)降,可(kě)能(néng)會導致(zhì)出現假(jiǎ)陰性結果(guǒ)。
②鹼基(jī)配對(duì)原則;
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶合(hé)成(chéng)反應的(dí)忠(zhōng)實性(xìng);
④靶基因(yīn)的(dí)特(tè)異性(xìng)與(yǔ)保(bǎo)守(shǒu)性。
細(xì)粒棘(jí)球(qiú)縧(tāo)蟲PCR檢測試劑(jì)盒(hé)其(qí)中引(yǐn)物與模板的(dí)正確(què)結(jié)合(hé)是(shì)關鍵。引(yǐn)物與模(mó)板(bǎn)的(dí)結合(hé)及引物鏈的延伸是(shì)遵循鹼基配對(duì)原則的(dí)。聚合酶(méi)合成(chéng)反應的忠實(shí)性(xìng)及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶耐(nài)高溫性(xìng),使反應(yīng)中模板與引物的結合(復(fù)性)可(kě)以在較(jiào)高的(dí)溫度下進(jìn)行,結合(hé)的特(tè)異性大(dà)大增(zēng)加,被(bèi)擴(kuò)增的靶基因片段(duàn)也(yě)就(jiù)能(néng)保持很高的正(zhèng)確(què)度(dù)。再(zài)通(tōng)過選(xuǎn)擇特(tè)異性(xìng)和保守(shǒu)性高(gāo)的(dí)靶基(jī)因區,其特(tè)異性程度就(jiù)更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生(shēng)成(chéng)量(liáng)是(shì)以指數方式增加(jiā)的(dí),能將皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測模(mó)板擴增(zēng)到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中(zhōng)檢(jiǎn)出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測中(zhōng),PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑(bān)形(xíng)成單位(wèi));在細菌學中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率(shuài)為(wéi)3個(gè)細菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便,快速(sù)
PCR反應(yīng)用耐(nài)高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚合酶(méi),一(yī)次性(xìng)地將反(fǎn)應液(yè)加(jiā)好後(hòu),即(jí)在(zài)DNA擴(kuò)增(zēng)液和(hé)水浴鍋上進(jìn)行變性-退(tuì)火-延伸(shēn)反(fǎn)應,一(yī)般(bān)在(zài)2~4 小(xiǎo)時(shí)完(wán)成擴增(zēng)反應。擴增產物(wù)一般用(yòng)電(diàn)泳分析,不(bù)一定(dìng)要(yào)用同(tóng)位素,無放(fàng)射性(xìng)汙染,易推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本(běn)的純度(dù)要求(qiú)低
不需要(yào)分(fēn)離病毒或細菌及培養細胞,DNA 粗(cū)製品(pǐn)及(jí)總RNA均可作為擴增模(mó)板。可(kě)直接用(yòng)臨床標本(běn)如血液,體(tǐ)腔(qiāng)液,洗(xǐ)嗽(sòu)液,毛(máo)發(fā),細(xì)胞,活PCR技(jì)術概論。
