產(chǎn)品中(zhōng)心
PCR檢測(cè)試劑盒
商品屬(shǔ)性
| 產品(pǐn)名(míng)稱 | 英文名(míng)稱 | 貨號(hào) |
|
埃立克體屬通(tōng)用PCR檢測試劑盒(hé) |
Ehrlichiae spp.PCR |
YS-P014123 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢測試(shì)劑(jì)盒
儲存(cún)條件：-20℃避光(guāng)保存(cún)，避免反復(fù)凍融(róng)。
運輸(shū)：低溫，避(bì)光。
有(yǒu)效期：一年
貨(huò)期(qī)：現貨(huò)PCR試劑(jì)盒的有效(xiào)期(qī)一(yī)般(bān)為1年(nián)，這是指在適當(dāng)的儲存(cún)溫度下。核酸擴(kuò)增部分的試劑一般要貯存(cún)於(yú)-20℃下(xià)，產(chǎn)物檢測部分(fēn)試(shì)劑(jì)則(zé)貯存於2-8℃。盡量避免(miǎn)反復(fù)凍融。
【結果分(fēn)析條件設(shè)定(dìng)】
u 閾值(zhí)(Threshold)設定：將(jiāng)閾值(zhí)綫設定在剛(gāng)好超(chāo)過(guò)正(zhèng)常陰(yīn)性(xìng)質控品擴增(zēng)曲綫(xiàn)的最(zuì)高點。
【質控(kòng)標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性質控品的檢測(cè)結果應(yīng)為(wéi)陽性，有明(míng)顯的指數(shù)擴增期(qī)，Ct值(zhí)應小於(yú)等(děng)於(yú)35；
3. 以(yǐ)上要求需(xū)在一次(cì)實驗中同時滿足(zú)，否則(zé)該次實驗視為無(wú)效。
【結果判斷】
2.可(kě)疑：有明(míng)顯的(dí)指數擴增期，且(qiě)38≤Ct<40，此時(shí)樣本(běn)為(wéi)可(kě)疑(yí)樣(yàng)本；對(duì)於可(kě)疑(yí)樣(yàng)本建議(yì)復核(hé)一(yī)次，若復(fù)核結果Ct<40且有指數擴(kuò)增期(qī)，則判(pàn)定為(wéi)陽(yáng)性，否則(zé)判定(dìng)為陰性(xìng)；
3. 陰性：無指數(shù)擴增(zēng)期(qī)，Ct=40或無Ct值均判(pàn)定為(wéi)陰性樣本(běn)。
【對檢驗結(jié)果的解(jiě)釋】
1. 實驗(yàn)室環(huán)境(jìng)汙染，試(shì)劑(jì)汙(wū)染，樣(yàng)品交(jiāo)叉汙染會出現(xiàn)假陽性結(jié)果(guǒ)；
2. 試(shì)劑運(yùn)輸(shū)，保存(cún)不當(dāng)或試劑配製不(bù)準確引(yǐn)起的試(shì)劑(jì)檢測(cè)效能(néng)下降，可(kě)能會導致出現(xiàn)假(jiǎ)陰性結(jié)果(guǒ)。
PCR反應的特異性：
②鹼基配對原則(zé)；
③Taq DNA聚合酶合(hé)成(chéng)反應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實(shí)性(xìng)；
④靶(bǎ)基因的(dí)特異(yì)性與保守性(xìng)。
埃(āi)立克體(tǐ)屬通用PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒其(qí)中(zhōng)引物(wù)與模(mó)板(bǎn)的正確(què)結合(hé)是關(guān)鍵。引(yǐn)物與(yǔ)模(mó)板的(dí)結(jié)合(hé)及(jí)引(yǐn)物鏈的(dí)延伸是遵(zūn)循(xún)鹼基配(pèi)對原(yuán)則的(dí)。聚合酶合(hé)成(chéng)反(fǎn)應的忠(zhōng)實(shí)性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合(hé)酶耐高(gāo)溫性，使(shǐ)反(fǎn)應中(zhōng)模板(bǎn)與引物(wù)的結合(復(fù)性)可以(yǐ)在(zài)較(jiào)高(gāo)的溫度下(xià)進(jìn)行(háng)，結合的特(tè)異(yì)性大大增加，被(bèi)擴增的靶基因(yīn)片(piàn)段(duàn)也(yě)就能(néng)保(bǎo)持(chí)很(hěn)高的正(zhèng)確度。再通(tōng)過(guò)選擇特異性(xìng)和保守性高(gāo)的(dí)靶(bǎ)基因區(qū)，其(qí)特異(yì)性(xìng)程度就(jiù)更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量(liáng)是以指(zhǐ)數方式增加的，能將皮(pí)克(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起始待(dài)測(cè)模板擴增到微(wēi)克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從(cóng)100萬(wàn)個細(xì)胞(bāo)中(zhōng)檢出(chū)一(yī)個靶細(xì)胞(bāo)；在(zài)病毒的檢測(cè)中，PCR的靈敏(mǐn)度可達3個(gè)RFU(空(kōng)斑形成單位(wèi))；在細(xì)菌(jūn)學(xué)中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率(shuài)為3個細菌(jūn)。
(3) 簡便，快速
PCR反應用(yòng)耐高溫(wēn)的Taq DNA聚合(hé)酶，一次性地將(jiāng)反應(yīng)液(yè)加好後(hòu)，即在(zài)DNA擴(kuò)增液和(hé)水浴鍋(guō)上進行變性(xìng)-退(tuì)火-延伸(shēn)反(fǎn)應(yīng)，一般在2～4 小(xiǎo)時完(wán)成擴增反應。擴增產(chǎn)物一般用(yòng)電泳(yǒng)分析(xī)，不一(yī)定(dìng)要(yào)用(yòng)同(tóng)位素，無放射性汙(wū)染(rǎn)，易(yì)推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標本(běn)的(dí)純(chún)度(dù)要(yào)求(qiú)低
不需要分(fēn)離(lí)病毒或(huò)細(xì)菌(jūn)及培養細胞，DNA 粗(cū)製(zhì)品(pǐn)及(jí)總(zǒng)RNA均可作為擴增模板。可(kě)直接用(yòng)臨床(chuáng)標(biāo)本如血(xiě)液(yè)，體(tǐ)腔液(yè)，洗嗽液(yè)，毛發，細(xì)胞(bāo)，活PCR技(jì)術概(gài)論。
- 上(shàng)一條：齧蝕艾肯菌PCR檢測(cè)試劑盒
- 下一(yī)條：反芻獸(shòu)埃(āi)立克體PCR檢測(cè)試劑盒
