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PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒
商(shāng)品屬(shǔ)性(xìng)
| 產(chǎn)品(pǐn)名(míng)稱 | 英文名(míng)稱 | 貨號 |
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賈(gǔ)第蟲(chóng)通用PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒 |
Giardia spp.PCR |
YS-P014235 |
分(fēn)類：PCR檢測試劑(jì)盒
儲存條件：-20℃避光(guāng)保存(cún)，避免反復凍融。
運(yùn)輸：低溫，避(bì)光。
有效(xiào)期(qī)：一年
貨期(qī)：現(xiàn)貨PCR試劑盒(hé)的(dí)有效(xiào)期一般(bān)為1年(nián)，這(zhè)是指在適當(dāng)的儲存(cún)溫(wēn)度下。核(hé)酸(suān)擴增部分(fēn)的試劑一般(bān)要(yào)貯存(cún)於-20℃下，產物檢(jiǎn)測(cè)部分試劑(jì)則(zé)貯存(cún)於2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避免反復(fù)凍(dòng)融。
【結果(guǒ)分析(xī)條件設(shè)定】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設(shè)定：將(jiāng)閾值綫設(shè)定在(zài)剛好超(chāo)過正(zhèng)常(cháng)陰性(xìng)質(zhì)控品擴增(zēng)曲(qū)綫的最高(gāo)點。
【質(zhì)控標準】
2. 陽性質(zhì)控(kòng)品(pǐn)的(dí)檢(jiǎn)測(cè)結果(guǒ)應為陽性，有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴增期，Ct值(zhí)應小於(yú)等(děng)於35；
3. 以(yǐ)上要(yào)求需(xū)在一次實驗(yàn)中同時滿(mǎn)足(zú)，否則該(gāi)次實(shí)驗(yàn)視為無(wú)效。
【結果判斷(duàn)】
2.可(kě)疑(yí)：有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指數(shù)擴增期，且(qiě)38≤Ct<40，此時(shí)樣(yàng)本(běn)為可(kě)疑樣本；對於可疑(yí)樣本建(jiàn)議(yì)復(fù)核一次，若(ruò)復核結(jié)果Ct<40且有指(zhǐ)數擴(kuò)增期，則判定為陽性(xìng)，否則(zé)判(pàn)定為陰性；
3. 陰性：無(wú)指數擴增期，Ct=40或無(wú)Ct值均判(pàn)定為陰性樣本。
【對檢驗結果(guǒ)的解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室環境汙染(rǎn)，試劑汙(wū)染，樣(yàng)品交叉(chā)汙染會出現假陽性結(jié)果；
2. 試(shì)劑運(yùn)輸，保存(cún)不當或試劑配(pèi)製不(bù)準確(què)引(yǐn)起(qǐ)的(dí)試(shì)劑(jì)檢測效(xiào)能下(xià)降，可能會導(dǎo)致出現假陰性結果(guǒ)。
PCR反應的特異性：
②鹼(jiǎn)基配(pèi)對(duì)原則；
③Taq DNA聚(jù)合酶合成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的忠(zhōng)實(shí)性(xìng)；
④靶(bǎ)基(jī)因的特(tè)異性(xìng)與(yǔ)保守(shǒu)性。
賈第蟲通用PCR檢測(cè)試劑盒其(qí)中引物與模板的正(zhèng)確結(jié)合(hé)是關鍵(jiàn)。引物(wù)與(yǔ)模板(bǎn)的(dí)結(jié)合(hé)及引物鏈的延(yán)伸是(shì)遵循(xún)鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對原(yuán)則(zé)的。聚合酶合成反應(yīng)的(dí)忠實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合(hé)酶(méi)耐(nài)高(gāo)溫性，使(shǐ)反應中模板與引物的結合(復(fù)性(xìng))可以在較(jiào)高的溫度下(xià)進行，結合的(dí)特異性大大增(zēng)加(jiā)，被擴增的靶(bǎ)基因片(piàn)段也(yě)就能保持(chí)很高的(dí)正確(què)度(dù)。再(zài)通過選(xuǎn)擇特(tè)異(yì)性(xìng)和保守性高的(dí)靶基因區，其(qí)特異(yì)性(xìng)程度(dù)就更(gēng)高。
(2) 靈敏度(dù)高(gāo)
PCR產(chǎn)物的(dí)生成(chéng)量是以(yǐ)指(zhǐ)數(shù)方式增(zēng)加的，能(néng)將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量級的(dí)起(qǐ)始待測模(mó)板擴增(zēng)到(dào)微克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能從(cóng)100萬(wàn)個細胞(bāo)中(zhōng)檢(jiǎn)出一(yī)個(gè)靶細胞；在(zài)病(bìng)毒的(dí)檢測中，PCR的靈敏(mǐn)度(dù)可(kě)達(dá)3個RFU(空(kōng)斑形(xíng)成單位)；在細菌(jūn)學(xué)中zui小檢(jiǎn)出率為3個細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快(kuài)速
PCR反應用耐(nài)高溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)，一次性地(dì)將(jiāng)反應(yīng)液加好(hǎo)後，即在DNA擴增(zēng)液(yè)和水浴(yù)鍋上(shàng)進行(háng)變(biàn)性(xìng)-退(tuì)火-延伸反(fǎn)應，一(yī)般(bān)在(zài)2～4 小(xiǎo)時(shí)完成擴增(zēng)反應。擴增產(chǎn)物一般(bān)用(yòng)電泳分(fēn)析(xī)，不(bù)一(yī)定要(yào)用(yòng)同(tóng)位(wèi)素，無放(fàng)射(shè)性(xìng)汙染，易推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本的(dí)純(chún)度(dù)要求低
不(bù)需要(yào)分(fēn)離(lí)病(bìng)毒或(huò)細菌(jūn)及(jí)培養(yǎng)細胞，DNA 粗(cū)製品(pǐn)及(jí)總(zǒng)RNA均(jūn)可作(zuò)為(wéi)擴(kuò)增(zēng)模(mó)板。可直接用臨床標(biāo)本如(rú)血(xiě)液，體腔(qiāng)液，洗嗽(sòu)液(yè)，毛發，細(xì)胞(bāo)，活PCR技術(shù)概論(lùn)。
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