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PCR檢(jiǎn)測試劑盒
| 產品名(míng)稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
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鵝(é)細小病毒(dú)PCR檢測試(shì)劑(jì)盒 |
Goose Parvoiruvs(GPV)PCR |
YS-P014238 |
分類(lèi):PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒
儲(chǔ)存條(tiáo)件(jiàn):-20℃避(bì)光保存(cún),避(bì)免(miǎn)反復凍融。
運(yùn)輸:低(dī)溫(wēn),避(bì)光。
有效期(qī):一(yī)年(nián)
貨期:現貨PCR試(shì)劑盒(hé)的(dí)有效(xiào)期(qī)一般為(wéi)1年,這(zhè)是(shì)指(zhǐ)在適(shì)當(dāng)的(dí)儲(chǔ)存溫(wēn)度下。核(hé)酸擴增部分的試(shì)劑一般要(yào)貯(zhù)存於-20℃下,產(chǎn)物(wù)檢測(cè)部(bù)分試(shì)劑(jì)則貯(zhù)存於2-8℃。盡量避免(miǎn)反復凍融。
u 閾值(Threshold)設定(dìng):將閾(yù)值綫(xiàn)設定(dìng)在(zài)剛好(hǎo)超過正(zhèng)常(cháng)陰性質控品(pǐn)擴增(zēng)曲綫的最(zuì)高(gāo)點。
2. 陽(yáng)性質控品的檢(jiǎn)測結果應為陽性,有明顯(xiǎn)的(dí)指數(shù)擴增期(qī),Ct值應小(xiǎo)於(yú)等於35;
3. 以上(shàng)要求需在(zài)一(yī)次實(shí)驗中(zhōng)同時滿(mǎn)足(zú),否則該次(cì)實驗視為無(wú)效。
2.可(kě)疑:有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指數擴(kuò)增(zēng)期,且38≤Ct<40,此(cǐ)時(shí)樣本(běn)為(wéi)可疑樣本;對(duì)於(yú)可(kě)疑樣本(běn)建議(yì)復(fù)核一次,若復核結果(guǒ)Ct<40且有指數擴增期(qī),則(zé)判(pàn)定(dìng)為(wéi)陽性,否則判定(dìng)為陰性;
3. 陰性:無指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期,Ct=40或(huò)無Ct值(zhí)均判定為陰性(xìng)樣本(běn)。
【對(duì)檢(jiǎn)驗(yàn)結果(guǒ)的(dí)解釋】
1. 實驗室(shì)環境汙染,試(shì)劑汙染,樣品交(jiāo)叉(chā)汙(wū)染會出現假陽性結果(guǒ);
2. 試劑運(yùn)輸,保存不當(dāng)或(huò)試(shì)劑配製不(bù)準(zhǔn)確(què)引起的試(shì)劑(jì)檢(jiǎn)測(cè)效能下降,可(kě)能(néng)會(huì)導致出現(xiàn)假陰性結果(guǒ)。
②鹼基配對原(yuán)則;
③Taq DNA聚合酶(méi)合成反(fǎn)應的忠實性;
④靶(bǎ)基因的特異(yì)性(xìng)與保(bǎo)守性。
鵝(é)細小病(bìng)毒PCR檢測試劑盒(hé)其中(zhōng)引物與(yǔ)模板的(dí)正確結合(hé)是關鍵(jiàn)。引物與模板的結合及(jí)引物(wù)鏈的延伸(shēn)是遵循鹼基配對原(yuán)則(zé)的(dí)。聚(jù)合(hé)酶(méi)合成反(fǎn)應的(dí)忠(zhōng)實性及(jí)Taq DNA聚合酶耐高(gāo)溫性,使反應(yīng)中模板與引(yǐn)物的結合(hé)(復(fù)性(xìng))可以在較高的溫(wēn)度下進行,結(jié)合(hé)的特異性大大增加,被擴增的(dí)靶(bǎ)基因片(piàn)段也就能保持很高的正確(què)度(dù)。再(zài)通過(guò)選(xuǎn)擇(zé)特異性和(hé)保守(shǒu)性(xìng)高(gāo)的(dí)靶基因(yīn)區,其特(tè)異(yì)性程(chéng)度就更(gēng)高。
(2) 靈敏(mǐn)度(dù)高(gāo)
PCR產(chǎn)物的(dí)生成(chéng)量是以指數方式(shì)增加的(dí),能(néng)將皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起始(shǐ)待測模板擴增到(dào)微克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從100萬(wàn)個(gè)細胞中檢(jiǎn)出一個靶細胞;在病(bìng)毒(dú)的(dí)檢(jiǎn)測中,PCR的靈(líng)敏(mǐn)度可(kě)達3個RFU(空(kōng)斑形(xíng)成單位(wèi));在(zài)細菌學(xué)中zui小(xiǎo)檢出率為3個(gè)細菌。
(3) 簡(jiǎn)便,快(kuài)速(sù)
PCR反應(yīng)用(yòng)耐高溫的(dí)Taq DNA聚合酶(méi),一次(cì)性地(dì)將(jiāng)反應(yīng)液加好後,即(jí)在DNA擴增液(yè)和水(shuǐ)浴(yù)鍋(guō)上(shàng)進(jìn)行變性-退火-延(yán)伸(shēn)反(fǎn)應,一般在(zài)2~4 小時完成(chéng)擴增(zēng)反應。擴(kuò)增(zēng)產物一(yī)般用(yòng)電泳分析(xī),不一定要(yào)用同位素,無放射(shè)性(xìng)汙(wū)染(rǎn),易推(tuī)廣。
(4) 對標(biāo)本(běn)的純(chún)度(dù)要求低(dī)
不(bù)需(xū)要(yào)分(fēn)離病毒(dú)或(huò)細(xì)菌及培(péi)養(yǎng)細胞(bāo),DNA 粗製品(pǐn)及(jí)總RNA均(jūn)可(kě)作為擴增模板。可(kě)直(zhí)接(jiē)用臨床(chuáng)標本(běn)如血(xiě)液,體(tǐ)腔(qiāng)液(yè),洗(xǐ)嗽(sòu)液(yè),毛發,細(xì)胞(bāo),活(huó)PCR技術概論。
