產(chǎn)品(pǐn)中(zhōng)心(xīn)
PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒
商品(pǐn)屬性
| 產品名(míng)稱 | 英文名(míng)稱(chēng) | 貨(huò)號(hào) |
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同人(rén)皰疹病(bìng)毒(dú)型(xíng)PCR檢測試劑(jì)盒 |
Human Herpesvirus 4 (HHV4，EB) )4 PCR |
YS-P014301 |
分(fēn)類：PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒
儲存條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避(bì)光(guāng)保存，避(bì)免反(fǎn)復凍融。
運輸：低溫，避(bì)光(guāng)。
有效(xiào)期(qī)：一年(nián)
貨(huò)期(qī)：現(xiàn)貨PCR試(shì)劑盒的(dí)有(yǒu)效(xiào)期(qī)一(yī)般(bān)為1年(nián)，這(zhè)是指在適(shì)當(dāng)的儲存(cún)溫(wēn)度(dù)下。核酸擴增部(bù)分(fēn)的(dí)試劑(jì)一般要(yào)貯(zhù)存於(yú)-20℃下，產(chǎn)物檢測(cè)部(bù)分(fēn)試劑則(zé)貯(zhù)存(cún)於(yú)2-8℃。盡量避免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍融(róng)。
【結果分析條件設(shè)定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設定：將閾值(zhí)綫設定在剛好(hǎo)超過(guò)正(zhèng)常(cháng)陰(yīn)性(xìng)質控(kòng)品(pǐn)擴增(zēng)曲(qū)綫(xiàn)的最高(gāo)點。
【質控標準】
2. 陽性質控(kòng)品(pǐn)的檢測(cè)結果(guǒ)應為陽性，有明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴增期，Ct值應小於(yú)等(děng)於35；
3. 以(yǐ)上要求(qiú)需(xū)在一(yī)次(cì)實驗中同時滿(mǎn)足，否(fǒu)則該次實驗視(shì)為無(wú)效。
【結果(guǒ)判斷】
2.可疑：有明顯的指數擴(kuò)增(zēng)期，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時樣(yàng)本為(wéi)可疑(yí)樣本；對於可(kě)疑樣(yàng)本(běn)建(jiàn)議(yì)復(fù)核一次(cì)，若復核結果Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數擴增期，則(zé)判定為陽(yáng)性(xìng)，否(fǒu)則判定(dìng)為陰(yīn)性；
3. 陰(yīn)性：無指數擴增(zēng)期，Ct=40或無Ct值均(jūn)判定為陰(yīn)性樣本。
【對檢驗結(jié)果(guǒ)的解釋(shì)】
1. 實驗(yàn)室環境(jìng)汙染，試劑汙染(rǎn)，樣品交叉(chā)汙染(rǎn)會出現假(jiǎ)陽(yáng)性(xìng)結果(guǒ)；
2. 試劑運(yùn)輸，保存不當或試(shì)劑配製不準確(què)引起的(dí)試(shì)劑(jì)檢測(cè)效能下降(jiàng)，可(kě)能會(huì)導(dǎo)致出(chū)現假(jiǎ)陰性(xìng)結(jié)果。
PCR反應(yīng)的(dí)特異性：
②鹼基配(pèi)對(duì)原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性；
④靶基(jī)因的特異性(xìng)與(yǔ)保(bǎo)守性(xìng)。
同人皰疹病毒(dú)型PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé)其中引物與(yǔ)模板(bǎn)的正(zhèng)確(què)結合是(shì)關鍵(jiàn)。引物(wù)與(yǔ)模板的結(jié)合(hé)及引物(wù)鏈的(dí)延伸是(shì)遵循鹼(jiǎn)基配對(duì)原則的。聚合酶合成反(fǎn)應的(dí)忠實性及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶(méi)耐(nài)高(gāo)溫性(xìng)，使(shǐ)反應(yīng)中(zhōng)模(mó)板(bǎn)與(yǔ)引物(wù)的結合(hé)(復性(xìng))可以在(zài)較高(gāo)的溫(wēn)度下進行，結(jié)合的特異(yì)性大(dà)大(dà)增加，被擴(kuò)增的靶基(jī)因(yīn)片(piàn)段也就(jiù)能保持很(hěn)高的(dí)正確度。再(zài)通過選擇(zé)特異性和(hé)保(bǎo)守性高(gāo)的靶基因區(qū)，其特異性(xìng)程(chéng)度就更(gēng)高。
(2) 靈敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產(chǎn)物的(dí)生(shēng)成(chéng)量是以(yǐ)指數(shù)方(fāng)式(shì)增加(jiā)的，能(néng)將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量(liáng)級的起始(shǐ)待(dài)測模板擴增(zēng)到(dào)微克(ug=10-6g)水平。能(néng)從100萬(wàn)個(gè)細胞中(zhōng)檢(jiǎn)出一個靶細胞；在病毒(dú)的(dí)檢(jiǎn)測中，PCR的(dí)靈敏(mǐn)度可達3個RFU(空(kōng)斑形成單位)；在細(xì)菌學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出(chū)率(shuài)為3個(gè)細菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快速
PCR反應用耐(nài)高溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶，一(yī)次(cì)性地(dì)將(jiāng)反(fǎn)應(yīng)液加(jiā)好(hǎo)後(hòu)，即在(zài)DNA擴增液和(hé)水(shuǐ)浴(yù)鍋(guō)上進行變性-退火-延伸反(fǎn)應，一般(bān)在(zài)2～4 小(xiǎo)時(shí)完成(chéng)擴增反(fǎn)應(yīng)。擴(kuò)增(zēng)產物一般(bān)用(yòng)電泳分(fēn)析(xī)，不一定(dìng)要用同位(wèi)素(sù)，無放(fàng)射(shè)性汙(wū)染，易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本的純度(dù)要求(qiú)低(dī)
不(bù)需要分離(lí)病毒或細菌及培養(yǎng)細胞，DNA 粗(cū)製品(pǐn)及總(zǒng)RNA均可作為(wéi)擴增模(mó)板。可(kě)直接用(yòng)臨床標(biāo)本如(rú)血液(yè)，體腔液，洗嗽液(yè)，毛發，細(xì)胞(bāo)，活(huó)PCR技術概論。
