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PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒(hé)
人(rén)免疫缺陷病(bìng)毒型(xíng)群(qún)型PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé)
| 產品名稱(chēng) | 英文名(míng)稱 | 貨(huò)號 |
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人免疫(yì)缺(quē)陷病(bìng)毒型群(qún)型(xíng)PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé) |
Human Immunodeficiency Virus 1(HIV1MA)1MARTPCR |
YS-P014307 |
分類:PCR檢(jiǎn)測試劑盒
儲(chǔ)存(cún)條件:-20℃避(bì)光保存(cún),避(bì)免(miǎn)反復凍融。
運輸:低(dī)溫,避光。
有效期:一(yī)年
貨(huò)期:現貨(huò)PCR試劑盒的有效期一般為(wéi)1年(nián),這是指(zhǐ)在適(shì)當的(dí)儲存溫度(dù)下。核酸(suān)擴(kuò)增部(bù)分(fēn)的試劑一(yī)般要貯存(cún)於-20℃下(xià),產物檢(jiǎn)測部分(fēn)試(shì)劑(jì)則貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡量避(bì)免(miǎn)反復凍融(róng)。
u 閾值(zhí)(Threshold)設定:將閾(yù)值綫設定在(zài)剛(gāng)好超(chāo)過正常陰(yīn)性質控品(pǐn)擴(kuò)增曲(qū)綫(xiàn)的(dí)最(zuì)高點(diǎn)。
2. 陽性(xìng)質控(kòng)品(pǐn)的檢測(cè)結果應(yīng)為陽性(xìng),有明顯的(dí)指數擴增期,Ct值應(yīng)小於等於35;
3. 以上(shàng)要求(qiú)需在(zài)一次(cì)實(shí)驗(yàn)中同(tóng)時(shí)滿足,否則該次(cì)實(shí)驗視(shì)為(wéi)無(wú)效。
2.可疑(yí):有(yǒu)明顯的指數(shù)擴增(zēng)期,且(qiě)38≤Ct<40,此(cǐ)時(shí)樣(yàng)本(běn)為(wéi)可(kě)疑(yí)樣(yàng)本(běn);對於可疑(yí)樣本建議(yì)復核一次,若復核(hé)結(jié)果Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期(qī),則(zé)判定(dìng)為陽(yáng)性,否(fǒu)則(zé)判定(dìng)為陰性;
3. 陰性:無指數擴(kuò)增(zēng)期(qī),Ct=40或無Ct值均判定為(wéi)陰性(xìng)樣本。
【對(duì)檢驗(yàn)結果的解釋】
1. 實驗室環(huán)境汙染(rǎn),試(shì)劑汙染,樣(yàng)品交(jiāo)叉汙染會出(chū)現假陽性(xìng)結果(guǒ);
2. 試(shì)劑運輸,保(bǎo)存不(bù)當(dāng)或試劑配製不準(zhǔn)確(què)引起的試(shì)劑檢測效(xiào)能下降(jiàng),可能會導(dǎo)致出(chū)現假(jiǎ)陰性結果。
②鹼基(jī)配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實(shí)性(xìng);
④靶基因的特異性(xìng)與保(bǎo)守性。
人免(miǎn)疫(yì)缺陷病毒型群型(xíng)PCR檢測試劑(jì)盒其中引物與(yǔ)模板的正確(què)結(jié)合是(shì)關鍵。引物與(yǔ)模板的結合及引(yǐn)物鏈(liàn)的(dí)延伸是(shì)遵(zūn)循鹼基配(pèi)對(duì)原則(zé)的。聚合(hé)酶合成(chéng)反(fǎn)應的忠(zhōng)實(shí)性及Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)耐高溫(wēn)性(xìng),使(shǐ)反(fǎn)應(yīng)中模(mó)板(bǎn)與引物的(dí)結(jié)合(復性(xìng))可以在(zài)較(jiào)高的(dí)溫(wēn)度(dù)下進行,結(jié)合(hé)的特異性(xìng)大大(dà)增加,被(bèi)擴增的(dí)靶(bǎ)基因片段也就能(néng)保持(chí)很高(gāo)的正確度(dù)。再通(tōng)過(guò)選擇(zé)特異(yì)性(xìng)和(hé)保守性(xìng)高的(dí)靶基因區,其(qí)特(tè)異性(xìng)程度就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度(dù)高(gāo)
PCR產(chǎn)物(wù)的(dí)生成(chéng)量(liáng)是以指(zhǐ)數方式增(zēng)加(jiā)的(dí),能將皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的起始待(dài)測模板擴增(zēng)到(dào)微克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從(cóng)100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個靶細胞;在病毒的(dí)檢(jiǎn)測中(zhōng),PCR的靈敏(mǐn)度(dù)可達(dá)3個RFU(空(kōng)斑(bān)形成單位(wèi));在(zài)細菌學中zui小(xiǎo)檢出(chū)率(shuài)為(wéi)3個(gè)細菌。
(3) 簡便(biàn),快速(sù)
PCR反(fǎn)應(yīng)用(yòng)耐(nài)高溫的Taq DNA聚合(hé)酶(méi),一次性(xìng)地(dì)將反(fǎn)應液加好(hǎo)後,即在DNA擴增(zēng)液和(hé)水(shuǐ)浴鍋(guō)上(shàng)進(jìn)行(háng)變(biàn)性-退火-延(yán)伸反應(yīng),一般(bān)在2~4 小(xiǎo)時(shí)完成擴(kuò)增(zēng)反(fǎn)應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物(wù)一(yī)般(bān)用(yòng)電(diàn)泳分析,不(bù)一(yī)定(dìng)要用同位素(sù),無放(fàng)射性汙染(rǎn),易推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純(chún)度要(yào)求低
不需(xū)要分離病毒(dú)或(huò)細(xì)菌及(jí)培養(yǎng)細胞,DNA 粗(cū)製品(pǐn)及(jí)總(zǒng)RNA均(jūn)可作為擴(kuò)增(zēng)模板(bǎn)。可直(zhí)接(jiē)用臨(lín)床標(biāo)本如(rú)血液,體(tǐ)腔液,洗(xǐ)嗽(sòu)液(yè),毛發,細(xì)胞(bāo),活(huó)PCR技(jì)術概(gài)論(lùn)。
