產(chǎn)品中心(xīn)
PCR檢測試(shì)劑(jì)盒
商品(pǐn)屬(shǔ)性
| 產(chǎn)品名(míng)稱(chēng) | 英(yīng)文(wén)名(míng)稱 | 貨(huò)號(hào) |
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單核(hé)細胞增(zēng)生(shēng)李(lǐ)斯特菌PCR檢測試劑盒 |
Listeria monocytogenesPCR |
YS-P014379 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé)
儲存(cún)條件：-20℃避(bì)光保存，避(bì)免反復凍融(róng)。
運輸：低(dī)溫(wēn)，避(bì)光(guāng)。
有效期：一年
貨期：現(xiàn)貨PCR試(shì)劑盒(hé)的有效(xiào)期一般為1年，這是(shì)指(zhǐ)在(zài)適當(dāng)的(dí)儲(chǔ)存(cún)溫度下(xià)。核酸擴(kuò)增(zēng)部(bù)分的(dí)試劑一般(bān)要(yào)貯存(cún)於-20℃下，產物(wù)檢(jiǎn)測部(bù)分試(shì)劑則貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡(jìn)量避(bì)免(miǎn)反復凍(dòng)融。
【結果分析條件(jiàn)設(shè)定】
u 閾(yù)值(Threshold)設定：將閾(yù)值綫設定在(zài)剛(gāng)好(hǎo)超(chāo)過正(zhèng)常(cháng)陰(yīn)性質(zhì)控品擴(kuò)增曲(qū)綫(xiàn)的最高(gāo)點。
【質控(kòng)標(biāo)準】
2. 陽性質(zhì)控品(pǐn)的(dí)檢(jiǎn)測(cè)結(jié)果(guǒ)應為(wéi)陽性(xìng)，有明顯的(dí)指數(shù)擴增期(qī)，Ct值(zhí)應小於(yú)等(děng)於35；
3. 以上(shàng)要求需在一(yī)次實驗中(zhōng)同時滿(mǎn)足(zú)，否(fǒu)則(zé)該(gāi)次實驗視(shì)為(wéi)無效。
【結(jié)果判斷】
2.可(kě)疑：有明顯的指數擴增期(qī)，且38≤Ct<40，此時(shí)樣本(běn)為(wéi)可(kě)疑樣(yàng)本；對(duì)於(yú)可疑(yí)樣(yàng)本(běn)建(jiàn)議復核一次(cì)，若復核結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有(yǒu)指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，則判(pàn)定(dìng)為陽性，否(fǒu)則(zé)判定為陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰(yīn)性：無指(zhǐ)數擴增期，Ct=40或(huò)無Ct值(zhí)均判定為(wéi)陰性樣(yàng)本。
【對檢驗結(jié)果(guǒ)的解釋】
1. 實驗室(shì)環境(jìng)汙(wū)染，試(shì)劑(jì)汙染，樣品交叉汙染會出(chū)現(xiàn)假陽(yáng)性(xìng)結果；
2. 試劑(jì)運輸，保(bǎo)存不當或試劑配製不準(zhǔn)確引(yǐn)起的試(shì)劑(jì)檢(jiǎn)測(cè)效能(néng)下(xià)降(jiàng)，可能會(huì)導(dǎo)致出(chū)現假(jiǎ)陰性(xìng)結果。
PCR反(fǎn)應(yīng)的特異(yì)性(xìng)：
②鹼基(jī)配(pèi)對原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合酶合成反(fǎn)應的忠(zhōng)實(shí)性；
④靶(bǎ)基因的特(tè)異性與保(bǎo)守性(xìng)。
單核細胞增生李(lǐ)斯(sī)特菌(jūn)PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé)其中(zhōng)引(yǐn)物與模板的(dí)正確(què)結(jié)合(hé)是(shì)關(guān)鍵。引(yǐn)物與模(mó)板(bǎn)的結(jié)合及引物(wù)鏈的延(yán)伸(shēn)是遵循鹼基配(pèi)對(duì)原(yuán)則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐(nài)高溫性(xìng)，使(shǐ)反應(yīng)中(zhōng)模(mó)板與(yǔ)引物(wù)的結(jié)合(復性)可(kě)以在較(jiào)高(gāo)的溫(wēn)度(dù)下進(jìn)行，結合(hé)的特異性(xìng)大大(dà)增加，被擴增的(dí)靶(bǎ)基(jī)因片(piàn)段也就能保(bǎo)持(chí)很(hěn)高的正(zhèng)確度。再通過(guò)選擇特(tè)異性和(hé)保守性(xìng)高(gāo)的靶(bǎ)基(jī)因區，其(qí)特異性程(chéng)度(dù)就(jiù)更高。
(2) 靈敏(mǐn)度(dù)高(gāo)
PCR產物的生成量是以(yǐ)指數(shù)方式增(zēng)加(jiā)的，能將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量級的起始(shǐ)待(dài)測(cè)模(mó)板(bǎn)擴(kuò)增(zēng)到(dào)微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從(cóng)100萬個細(xì)胞中(zhōng)檢出一(yī)個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的(dí)靈敏度可(kě)達3個(gè)RFU(空斑(bān)形成單(dān)位)；在細菌(jūn)學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出(chū)率(shuài)為3個(gè)細菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便，快速
PCR反應用耐(nài)高溫的(dí)Taq DNA聚合酶，一次性(xìng)地將反(fǎn)應液加好(hǎo)後，即在DNA擴增液(yè)和(hé)水浴鍋上進(jìn)行變性-退(tuì)火-延(yán)伸反(fǎn)應(yīng)，一(yī)般在(zài)2～4 小時完成(chéng)擴增反應。擴增(zēng)產物(wù)一般(bān)用(yòng)電泳分(fēn)析，不一定要用同(tóng)位(wèi)素，無放射(shè)性(xìng)汙(wū)染，易(yì)推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本(běn)的(dí)純度要(yào)求(qiú)低
不(bù)需要(yào)分(fēn)離(lí)病(bìng)毒或細菌及(jí)培(péi)養細胞，DNA 粗製(zhì)品(pǐn)及總(zǒng)RNA均可作(zuò)為擴增(zēng)模(mó)板(bǎn)。可直接用(yòng)臨床標本如血液，體腔液(yè)，洗嗽(sòu)液，毛(máo)發(fā)，細胞，活(huó)PCR技(jì)術概論。
