產品(pǐn)中(zhōng)心
PCR檢測(cè)試劑盒
肉芽(yá)腫(zhǒng)性(xìng)曼(màn)氏(shì)杆菌(jūn)病(bìng)PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒
| 產(chǎn)品名(míng)稱 | 英文名稱(chēng) | 貨號(hào) |
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肉芽腫(zhǒng)性曼(màn)氏杆菌(jūn)病PCR檢(jiǎn)測試劑盒 |
Mannheimia granulomatisPCR |
YS-P014399 |
分類:PCR檢測試劑(jì)盒(hé)
儲存條(tiáo)件:-20℃避光保存(cún),避(bì)免(miǎn)反復(fù)凍(dòng)融(róng)。
運輸(shū):低溫,避(bì)光。
有(yǒu)效(xiào)期:一年
貨(huò)期:現(xiàn)貨PCR試劑(jì)盒的有(yǒu)效(xiào)期(qī)一(yī)般(bān)為1年(nián),這是指在適(shì)當的儲存(cún)溫度下(xià)。核酸(suān)擴(kuò)增(zēng)部分的(dí)試劑一般(bān)要貯存於(yú)-20℃下,產物檢測部(bù)分(fēn)試劑則(zé)貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避免(miǎn)反復凍(dòng)融。
u 閾值(zhí)(Threshold)設定:將(jiāng)閾(yù)值綫設定在(zài)剛(gāng)好超(chāo)過正(zhèng)常陰性質控品擴(kuò)增(zēng)曲(qū)綫的(dí)最高點。
2. 陽(yáng)性質控品(pǐn)的(dí)檢測(cè)結(jié)果(guǒ)應為(wéi)陽(yáng)性(xìng),有明顯的指(zhǐ)數擴增(zēng)期,Ct值應小於等於35;
3. 以(yǐ)上要求(qiú)需在一次實驗(yàn)中(zhōng)同(tóng)時(shí)滿足(zú),否(fǒu)則該次(cì)實(shí)驗(yàn)視為(wéi)無效。
2.可疑:有明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴(kuò)增期(qī),且38≤Ct<40,此(cǐ)時樣本為可(kě)疑(yí)樣本;對於可疑樣(yàng)本(běn)建(jiàn)議復(fù)核一次,若(ruò)復(fù)核結果Ct<40且有指數擴(kuò)增期,則判(pàn)定(dìng)為陽性,否(fǒu)則判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性(xìng);
3. 陰性(xìng):無(wú)指數擴(kuò)增(zēng)期,Ct=40或無Ct值(zhí)均(jūn)判定(dìng)為陰性(xìng)樣本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗(yàn)結(jié)果(guǒ)的(dí)解釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室(shì)環(huán)境(jìng)汙(wū)染(rǎn),試劑汙染(rǎn),樣品交(jiāo)叉汙染會(huì)出現假(jiǎ)陽(yáng)性結(jié)果(guǒ);
2. 試劑(jì)運(yùn)輸,保存不(bù)當(dāng)或(huò)試(shì)劑配製不準確引起的試(shì)劑檢(jiǎn)測(cè)效(xiào)能下降(jiàng),可(kě)能(néng)會導(dǎo)致出現(xiàn)假陰(yīn)性(xìng)結(jié)果。
②鹼(jiǎn)基(jī)配對原(yuán)則;
③Taq DNA聚(jù)合酶合(hé)成(chéng)反應的忠(zhōng)實性(xìng);
④靶基(jī)因的(dí)特(tè)異(yì)性與(yǔ)保守(shǒu)性(xìng)。
肉芽腫(zhǒng)性曼氏杆(gān)菌病PCR檢測(cè)試劑盒其中引物與模板(bǎn)的正(zhèng)確結(jié)合(hé)是關鍵。引(yǐn)物(wù)與模板(bǎn)的結(jié)合(hé)及(jí)引(yǐn)物(wù)鏈的延(yán)伸是(shì)遵循(xún)鹼(jiǎn)基配對(duì)原(yuán)則(zé)的。聚合酶合成反(fǎn)應(yīng)的忠實(shí)性(xìng)及Taq DNA聚(jù)合酶耐高溫性(xìng),使反(fǎn)應中模(mó)板與(yǔ)引(yǐn)物(wù)的(dí)結合(復(fù)性)可(kě)以(yǐ)在(zài)較高的(dí)溫度下(xià)進(jìn)行(háng),結合(hé)的(dí)特(tè)異性(xìng)大大增(zēng)加(jiā),被擴增的靶(bǎ)基(jī)因片段(duàn)也(yě)就能保持很高的正(zhèng)確(què)度。再通過(guò)選擇特異性和(hé)保守性高(gāo)的靶基因區(qū),其特異性程(chéng)度就(jiù)更高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏度(dù)高
PCR產(chǎn)物的生成量是以(yǐ)指數(shù)方(fāng)式(shì)增(zēng)加(jiā)的,能將(jiāng)皮(pí)克(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起(qǐ)始(shǐ)待測(cè)模板擴增(zēng)到(dào)微克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從(cóng)100萬個細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒(dú)的(dí)檢測中,PCR的靈敏(mǐn)度(dù)可達3個RFU(空斑形成單位(wèi));在(zài)細菌學(xué)中(zhōng)zui小檢出率(shuài)為(wéi)3個細菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn),快速(sù)
PCR反(fǎn)應(yīng)用(yòng)耐(nài)高溫的Taq DNA聚合(hé)酶,一次性(xìng)地將反(fǎn)應(yīng)液加(jiā)好後,即(jí)在(zài)DNA擴(kuò)增液和水浴(yù)鍋上進行變性-退(tuì)火-延伸反應,一(yī)般在(zài)2~4 小時完(wán)成擴(kuò)增(zēng)反應。擴(kuò)增產物(wù)一(yī)般用電泳(yǒng)分析,不(bù)一(yī)定要用(yòng)同(tóng)位素,無放射(shè)性汙染(rǎn),易推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低(dī)
不(bù)需要分離病(bìng)毒或細菌及培養細(xì)胞,DNA 粗(cū)製品(pǐn)及(jí)總(zǒng)RNA均(jūn)可(kě)作(zuò)為(wéi)擴(kuò)增模(mó)板(bǎn)。可直(zhí)接用臨床(chuáng)標(biāo)本如血(xiě)液,體(tǐ)腔液(yè),洗(xǐ)嗽(sòu)液,毛(máo)發,細胞(bāo),活(huó)PCR技術概(gài)論(lùn)。
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