產品(pǐn)中心(xīn)
PCR檢測(cè)試(shì)劑盒(hé)
商(shāng)品屬(shǔ)性
| 產品名稱 | 英文名稱(chēng) | 貨(huò)號 |
|
牛莫(mò)拉氏(shì)菌PCR檢測試(shì)劑盒 |
Moraxella bovisPCR |
YS-P014430 |
分類：PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒
儲(chǔ)存條(tiáo)件：-20℃避光(guāng)保存(cún)，避免反復(fù)凍融(róng)。
運輸：低溫(wēn)，避光。
有效期(qī)：一(yī)年(nián)
貨(huò)期：現貨(huò)PCR試劑(jì)盒(hé)的有(yǒu)效(xiào)期一(yī)般(bān)為1年(nián)，這是指(zhǐ)在(zài)適當(dāng)的(dí)儲存(cún)溫(wēn)度下(xià)。核酸擴增部分的試劑一般(bān)要貯(zhù)存(cún)於(yú)-20℃下(xià)，產物檢測(cè)部分試劑(jì)則(zé)貯存(cún)於2-8℃。盡(jìn)量避免(miǎn)反復(fù)凍(dòng)融(róng)。
【結(jié)果分(fēn)析條(tiáo)件(jiàn)設定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設定：將閾值綫設(shè)定在(zài)剛好超過正常陰(yīn)性(xìng)質控品擴(kuò)增曲綫(xiàn)的最高(gāo)點。
【質(zhì)控(kòng)標(biāo)準】
2. 陽性質控(kòng)品(pǐn)的檢(jiǎn)測結(jié)果應(yīng)為陽性，有明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期，Ct值(zhí)應(yīng)小於(yú)等於(yú)35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要求(qiú)需在一(yī)次實(shí)驗中(zhōng)同時滿(mǎn)足(zú)，否則該次(cì)實(shí)驗(yàn)視(shì)為無效。
【結(jié)果判斷】
2.可(kě)疑(yí)：有明顯(xiǎn)的(dí)指數擴(kuò)增期(qī)，且38≤Ct<40，此時(shí)樣本為可(kě)疑樣本(běn)；對於(yú)可疑樣本建議復(fù)核(hé)一(yī)次(cì)，若復核(hé)結果(guǒ)Ct<40且有指(zhǐ)數(shù)擴增期，則(zé)判(pàn)定為(wéi)陽(yáng)性，否則判定為陰性(xìng)；
3. 陰性：無指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī)，Ct=40或無Ct值均(jūn)判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰性樣(yàng)本。
【對(duì)檢驗結(jié)果(guǒ)的解釋(shì)】
1. 實(shí)驗(yàn)室(shì)環(huán)境汙染，試劑汙染(rǎn)，樣(yàng)品(pǐn)交叉(chā)汙(wū)染(rǎn)會(huì)出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陽性結果；
2. 試劑(jì)運輸，保存(cún)不(bù)當或試劑配製(zhì)不準確引(yǐn)起(qǐ)的(dí)試(shì)劑檢(jiǎn)測(cè)效能下降，可能會(huì)導致(zhì)出現假陰(yīn)性結果。
PCR反應的特異性(xìng)：
②鹼基配(pèi)對原則；
③Taq DNA聚(jù)合酶合(hé)成(chéng)反應的忠實(shí)性；
④靶基(jī)因的(dí)特(tè)異性與(yǔ)保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)。
牛(niú)莫拉氏菌(jūn)PCR檢測試劑盒其中(zhōng)引(yǐn)物與(yǔ)模板的正(zhèng)確結(jié)合是關(guān)鍵(jiàn)。引物與模板(bǎn)的結(jié)合及(jí)引(yǐn)物(wù)鏈的延伸(shēn)是(shì)遵循鹼基(jī)配對原(yuán)則的。聚合(hé)酶合成反(fǎn)應的忠實性及Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐高溫(wēn)性，使反應(yīng)中(zhōng)模板與(yǔ)引物的結(jié)合(復性(xìng))可(kě)以在(zài)較高的溫(wēn)度下(xià)進行(háng)，結(jié)合的特異性大(dà)大增加(jiā)，被(bèi)擴增的(dí)靶(bǎ)基因(yīn)片段也(yě)就(jiù)能保(bǎo)持(chí)很(hěn)高的(dí)正(zhèng)確度(dù)。再通過(guò)選擇(zé)特異性和保守(shǒu)性(xìng)高(gāo)的靶(bǎ)基(jī)因(yīn)區，其特(tè)異性(xìng)程度就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈敏(mǐn)度(dù)高
PCR產物的生(shēng)成(chéng)量是以指數(shù)方式增(zēng)加(jiā)的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起(qǐ)始(shǐ)待測(cè)模板(bǎn)擴增到微克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能(néng)從(cóng)100萬個細(xì)胞中檢出一(yī)個靶(bǎ)細胞(bāo)；在(zài)病(bìng)毒(dú)的(dí)檢(jiǎn)測中(zhōng)，PCR的靈敏(mǐn)度(dù)可達3個(gè)RFU(空斑形成(chéng)單(dān)位)；在細(xì)菌學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率(shuài)為(wéi)3個細菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快速
PCR反(fǎn)應(yīng)用(yòng)耐高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚合(hé)酶，一次性地(dì)將反應液(yè)加(jiā)好後，即在DNA擴增(zēng)液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般(bān)在2～4 小(xiǎo)時完成(chéng)擴增反應(yīng)。擴(kuò)增產物一(yī)般(bān)用(yòng)電(diàn)泳分析(xī)，不一(yī)定要用(yòng)同位(wèi)素，無放射性汙染(rǎn)，易推(tuī)廣。
(4) 對標(biāo)本的純(chún)度要求低
不(bù)需要(yào)分(fēn)離病(bìng)毒(dú)或細菌及(jí)培養細胞(bāo)，DNA 粗(cū)製品及總RNA均可(kě)作為擴增(zēng)模(mó)板(bǎn)。可直接用(yòng)臨床(chuáng)標本如(rú)血(xiě)液(yè)，體腔(qiāng)液(yè)，洗(xǐ)嗽液，毛(máo)發(fā)，細胞，活PCR技術(shù)概論(lùn)。
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