產(chǎn)品(pǐn)中(zhōng)心(xīn)
PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒
商(shāng)品屬(shǔ)性(xìng)
| 產品(pǐn)名稱 | 英文(wén)名(míng)稱 | 貨號(hào) |
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綿羊莫拉菌(jūn)PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé) |
Moraxella ovisPCR |
YS-P014433 |
分類：PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒(hé)
儲(chǔ)存條件(jiàn)：-20℃避(bì)光保存，避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍(dòng)融(róng)。
運(yùn)輸：低(dī)溫(wēn)，避(bì)光。
有效(xiào)期：一年(nián)
貨(huò)期：現貨PCR試劑(jì)盒的有(yǒu)效(xiào)期一般(bān)為1年(nián)，這是指(zhǐ)在(zài)適(shì)當的儲存(cún)溫度(dù)下(xià)。核酸擴增部分(fēn)的(dí)試(shì)劑一般要貯存於-20℃下，產物(wù)檢測(cè)部(bù)分試劑(jì)則貯(zhù)存於2-8℃。盡(jìn)量避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍融。
【結果(guǒ)分析條件設定】
u 閾值(Threshold)設(shè)定：將(jiāng)閾(yù)值綫設定在(zài)剛(gāng)好超(chāo)過(guò)正(zhèng)常陰性質(zhì)控(kòng)品擴增(zēng)曲(qū)綫(xiàn)的最(zuì)高點(diǎn)。
【質控(kòng)標準】
2. 陽性質控品(pǐn)的檢(jiǎn)測結果應(yīng)為陽性(xìng)，有明顯的指數(shù)擴增(zēng)期(qī)，Ct值應(yīng)小於(yú)等於35；
3. 以上要(yào)求需(xū)在一(yī)次(cì)實驗(yàn)中(zhōng)同(tóng)時滿(mǎn)足，否則該次(cì)實(shí)驗視(shì)為無(wú)效。
【結(jié)果判斷(duàn)】
2.可疑(yí)：有(yǒu)明顯(xiǎn)的指數擴(kuò)增期，且38≤Ct<40，此時樣(yàng)本(běn)為可疑樣本(běn)；對(duì)於可疑樣(yàng)本(běn)建(jiàn)議(yì)復核一次，若(ruò)復核結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數擴增期，則(zé)判(pàn)定為陽性(xìng)，否則判定為陰性(xìng)；
3. 陰性：無指數(shù)擴增(zēng)期(qī)，Ct=40或無Ct值均判定(dìng)為陰性(xìng)樣(yàng)本。
【對檢(jiǎn)驗(yàn)結果的解(jiě)釋(shì)】
1. 實驗室環(huán)境(jìng)汙染，試(shì)劑汙(wū)染，樣品交(jiāo)叉(chā)汙染會(huì)出現(xiàn)假陽性(xìng)結果(guǒ)；
2. 試(shì)劑運輸(shū)，保存不(bù)當(dāng)或試劑(jì)配製(zhì)不準(zhǔn)確引起(qǐ)的(dí)試劑檢測效能(néng)下降(jiàng)，可能會導致(zhì)出(chū)現假(jiǎ)陰(yīn)性結(jié)果。
PCR反應的(dí)特異性(xìng)：
②鹼基配(pèi)對原則；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)合成反應的忠實性；
④靶基因的特異性與保守(shǒu)性(xìng)。
綿(mián)羊莫拉菌(jūn)PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒(hé)其中引物與模板(bǎn)的正(zhèng)確結(jié)合是關鍵。引(yǐn)物與(yǔ)模(mó)板的結(jié)合及引物鏈(liàn)的(dí)延(yán)伸(shēn)是遵(zūn)循(xún)鹼(jiǎn)基(jī)配對原則的。聚(jù)合酶合成(chéng)反(fǎn)應的(dí)忠實性(xìng)及Taq DNA聚合(hé)酶耐高溫性(xìng)，使(shǐ)反應中模(mó)板與(yǔ)引物(wù)的(dí)結合(hé)(復(fù)性)可以(yǐ)在較高(gāo)的(dí)溫度下進行，結(jié)合(hé)的特(tè)異性(xìng)大大增加，被擴增的靶基(jī)因片段(duàn)也(yě)就(jiù)能保(bǎo)持很高的正(zhèng)確(què)度。再通過(guò)選擇特(tè)異性和保守性(xìng)高(gāo)的(dí)靶(bǎ)基(jī)因(yīn)區(qū)，其(qí)特異(yì)性(xìng)程(chéng)度(dù)就更高。
(2) 靈敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產物的(dí)生(shēng)成(chéng)量是(shì)以指(zhǐ)數(shù)方式(shì)增加(jiā)的，能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始(shǐ)待測(cè)模板擴(kuò)增到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞(bāo)中(zhōng)檢出(chū)一(yī)個靶細(xì)胞(bāo)；在病(bìng)毒(dú)的檢測中(zhōng)，PCR的靈(líng)敏(mǐn)度(dù)可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形(xíng)成(chéng)單位)；在細菌學(xué)中zui小(xiǎo)檢出(chū)率為(wéi)3個細菌。
(3) 簡便(biàn)，快速(sù)
PCR反(fǎn)應用耐(nài)高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚合酶，一(yī)次(cì)性地將(jiāng)反應(yīng)液加(jiā)好後(hòu)，即在(zài)DNA擴(kuò)增液和水浴(yù)鍋(guō)上進行變性-退(tuì)火-延伸反(fǎn)應(yīng)，一般(bān)在(zài)2～4 小時完成(chéng)擴增反(fǎn)應。擴增(zēng)產物一般用電泳(yǒng)分析，不(bù)一(yī)定要(yào)用(yòng)同(tóng)位素，無(wú)放射(shè)性汙染，易(yì)推(tuī)廣。
(4) 對標本的(dí)純(chún)度(dù)要求低
不需(xū)要分離病(bìng)毒(dú)或細菌(jūn)及培養(yǎng)細胞，DNA 粗製品及總RNA均可作(zuò)為擴增模板。可直接用臨(lín)床標本如(rú)血(xiě)液(yè)，體腔液，洗嗽(sòu)液(yè)，毛發(fā)，細胞(bāo)，活(huó)PCR技術(shù)概論。
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