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PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒
商品(pǐn)屬(shǔ)性
| 產(chǎn)品(pǐn)名(míng)稱 | 英(yīng)文(wén)名(míng)稱 | 貨(huò)號 |
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牛支(zhī)原(yuán)體PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé) |
Mycoplasma bovisPCR |
YS-P014472 |
分類(lèi)：PCR檢測(cè)試(shì)劑盒(hé)
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存(cún)，避(bì)免反復凍(dòng)融(róng)。
運輸：低(dī)溫(wēn)，避光。
有效期(qī)：一(yī)年
貨期：現貨(huò)PCR試劑(jì)盒(hé)的有(yǒu)效(xiào)期一般(bān)為(wéi)1年，這(zhè)是(shì)指(zhǐ)在(zài)適當的(dí)儲存(cún)溫度(dù)下(xià)。核(hé)酸擴增部分(fēn)的試(shì)劑一(yī)般要(yào)貯存(cún)於-20℃下，產物檢測部(bù)分(fēn)試劑(jì)則貯存於2-8℃。盡量避免(miǎn)反復(fù)凍融。
【結果分析(xī)條(tiáo)件(jiàn)設定】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定(dìng)：將閾(yù)值(zhí)綫設定(dìng)在剛(gāng)好超過正常陰性質控(kòng)品(pǐn)擴(kuò)增曲(qū)綫的最(zuì)高點。
【質控(kòng)標準】
2. 陽性質控(kòng)品的檢測結(jié)果(guǒ)應(yīng)為(wéi)陽(yáng)性(xìng)，有明(míng)顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴(kuò)增期，Ct值應(yīng)小(xiǎo)於(yú)等(děng)於35；
3. 以(yǐ)上要求需在一次實驗中同(tóng)時(shí)滿足，否(fǒu)則(zé)該次實(shí)驗視為(wéi)無(wú)效(xiào)。
【結(jié)果(guǒ)判斷】
2.可疑(yí)：有(yǒu)明顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數擴增期，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時樣(yàng)本為(wéi)可疑(yí)樣(yàng)本(běn)；對(duì)於(yú)可(kě)疑樣本建(jiàn)議(yì)復核(hé)一次，若復核結果Ct<40且有(yǒu)指數擴增期(qī)，則判定為陽性，否則(zé)判(pàn)定為陰性；
3. 陰(yīn)性：無指數擴增期，Ct=40或無Ct值(zhí)均(jūn)判定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性樣本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗(yàn)結果的解釋】
1. 實(shí)驗室環境汙(wū)染，試劑(jì)汙染，樣品交叉汙染會出現假陽(yáng)性結果(guǒ)；
2. 試劑(jì)運輸，保存(cún)不當或試(shì)劑(jì)配(pèi)製(zhì)不準確引(yǐn)起的試(shì)劑檢測效能下降，可能會導致出現假陰(yīn)性結果。
PCR反應(yīng)的(dí)特(tè)異性：
②鹼基(jī)配對原(yuán)則；
③Taq DNA聚(jù)合酶(méi)合成反應(yīng)的(dí)忠實性；
④靶基因(yīn)的特異(yì)性(xìng)與(yǔ)保(bǎo)守(shǒu)性。
牛支原體(tǐ)PCR檢(jiǎn)測試劑盒其中引物(wù)與模板的正(zhèng)確結(jié)合是關鍵。引物與模(mó)板(bǎn)的結合(hé)及引物鏈的(dí)延伸是遵(zūn)循鹼(jiǎn)基配對原則(zé)的。聚(jù)合(hé)酶(méi)合成(chéng)反(fǎn)應的忠實性及Taq DNA聚(jù)合酶耐高溫(wēn)性，使反應中(zhōng)模板與引(yǐn)物的(dí)結合(復(fù)性(xìng))可以在較高的溫(wēn)度(dù)下進(jìn)行(háng)，結(jié)合的(dí)特(tè)異性(xìng)大大增(zēng)加(jiā)，被擴(kuò)增(zēng)的靶基因片段也就(jiù)能保持很高(gāo)的正確(què)度。再(zài)通過選擇特異性和(hé)保守(shǒu)性高的(dí)靶(bǎ)基因區，其特異(yì)性程度(dù)就更(gēng)高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的(dí)生成(chéng)量(liáng)是以指(zhǐ)數方式(shì)增加的，能(néng)將皮克(pg=10-12g)量級的(dí)起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能(néng)從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞(bāo)中檢出(chū)一個靶細胞；在病(bìng)毒的(dí)檢(jiǎn)測中(zhōng)，PCR的靈敏度(dù)可(kě)達(dá)3個(gè)RFU(空斑(bān)形成(chéng)單位)；在細菌學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出(chū)率為3個細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快速(sù)
PCR反應用耐(nài)高溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合酶(méi)，一(yī)次性(xìng)地將反(fǎn)應液(yè)加好(hǎo)後，即在DNA擴(kuò)增液(yè)和水浴(yù)鍋(guō)上(shàng)進行變(biàn)性-退火(huǒ)-延(yán)伸反應，一般在2～4 小時完成擴(kuò)增(zēng)反應(yīng)。擴增(zēng)產物(wù)一(yī)般用電(diàn)泳分(fēn)析(xī)，不(bù)一(yī)定(dìng)要用同位(wèi)素，無(wú)放射性(xìng)汙(wū)染，易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要(yào)分離病毒(dú)或(huò)細菌(jūn)及培養細胞(bāo)，DNA 粗製品及總RNA均可作為(wéi)擴(kuò)增模(mó)板。可(kě)直接用(yòng)臨床(chuáng)標(biāo)本如血液(yè)，體腔液，洗(xǐ)嗽(sòu)液(yè)，毛(máo)發，細胞(bāo)，活PCR技(jì)術概論(lùn)。
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