產(chǎn)品(pǐn)中(zhōng)心(xīn)
PCR檢測(cè)試劑盒(hé)
商品(pǐn)屬(shǔ)性(xìng)
| 產品(pǐn)名稱 | 英文(wén)名稱 | 貨號(hào) |
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衣(yī)阿(ā)華(huá)支原體(tǐ)PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒 |
Mycoplasma iowaePCR |
YS-P014484 |
分(fēn)類：PCR檢測試(shì)劑盒(hé)
儲存(cún)條(tiáo)件：-20℃避光保存(cún)，避免反(fǎn)復(fù)凍融。
運(yùn)輸(shū)：低(dī)溫(wēn)，避光。
有效期：一年(nián)
貨(huò)期(qī)：現貨PCR試(shì)劑盒(hé)的有效(xiào)期一(yī)般為(wéi)1年(nián)，這是(shì)指在(zài)適當的(dí)儲存溫(wēn)度下(xià)。核(hé)酸擴(kuò)增(zēng)部分(fēn)的試劑(jì)一般要貯存(cún)於-20℃下，產物檢(jiǎn)測(cè)部(bù)分(fēn)試劑則(zé)貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避(bì)免反(fǎn)復凍(dòng)融。
【結果(guǒ)分析(xī)條件設(shè)定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設(shè)定：將閾值(zhí)綫設定(dìng)在剛好超過(guò)正常陰性質控品擴增曲(qū)綫的(dí)最高(gāo)點。
【質控標準】
2. 陽性質控品的檢測結果(guǒ)應為(wéi)陽性(xìng)，有明顯的指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，Ct值應小(xiǎo)於等於(yú)35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要求需在一次實驗中(zhōng)同時滿足(zú)，否則(zé)該次(cì)實驗視為無(wú)效(xiào)。
【結果(guǒ)判斷】
2.可(kě)疑(yí)：有明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴(kuò)增期，且38≤Ct<40，此(cǐ)時樣本(běn)為(wéi)可疑樣本；對於(yú)可疑(yí)樣(yàng)本(běn)建議復核(hé)一次，若復(fù)核結果Ct<40且有(yǒu)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，則判定(dìng)為陽性(xìng)，否(fǒu)則判(pàn)定為(wéi)陰性；
3. 陰性：無(wú)指數擴(kuò)增期，Ct=40或無Ct值均(jūn)判(pàn)定為(wéi)陰性樣本(běn)。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結果(guǒ)的解(jiě)釋】
1. 實驗(yàn)室環(huán)境汙染，試(shì)劑汙染，樣品(pǐn)交叉汙(wū)染會出現假(jiǎ)陽(yáng)性(xìng)結(jié)果；
2. 試(shì)劑運(yùn)輸(shū)，保存不(bù)當或(huò)試(shì)劑配(pèi)製不準確(què)引(yǐn)起的試劑檢測(cè)效能(néng)下(xià)降，可能(néng)會導(dǎo)致(zhì)出現假陰性結果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應的特異(yì)性：
②鹼基配對(duì)原則；
③Taq DNA聚(jù)合酶合成(chéng)反應(yīng)的(dí)忠實性(xìng)；
④靶基因的(dí)特異性(xìng)與(yǔ)保守(shǒu)性。
衣(yī)阿(ā)華支原體PCR檢測試(shì)劑(jì)盒其中(zhōng)引物(wù)與(yǔ)模板的(dí)正(zhèng)確結(jié)合是(shì)關(guān)鍵(jiàn)。引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的結合及引(yǐn)物鏈(liàn)的延(yán)伸是(shì)遵循(xún)鹼基配對原則(zé)的(dí)。聚(jù)合酶合成反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實性及(jí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)耐高(gāo)溫性，使反應中(zhōng)模(mó)板與(yǔ)引物(wù)的結(jié)合(hé)(復(fù)性)可以在(zài)較高(gāo)的溫度(dù)下進(jìn)行，結合(hé)的(dí)特(tè)異性(xìng)大(dà)大(dà)增(zēng)加(jiā)，被(bèi)擴增(zēng)的(dí)靶基因(yīn)片段(duàn)也就能(néng)保持(chí)很高(gāo)的正(zhèng)確(què)度(dù)。再(zài)通(tōng)過選(xuǎn)擇(zé)特(tè)異性(xìng)和(hé)保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)高的靶基(jī)因區，其(qí)特(tè)異(yì)性程(chéng)度就(jiù)更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏度高(gāo)
PCR產物的生(shēng)成量(liáng)是以指數方式增加(jiā)的，能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量級的(dí)起(qǐ)始待(dài)測模板(bǎn)擴增到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水平。能從(cóng)100萬個(gè)細胞中檢出一個靶(bǎ)細胞(bāo)；在(zài)病(bìng)毒的檢測(cè)中(zhōng)，PCR的靈(líng)敏度(dù)可達3個RFU(空斑(bān)形成單(dān)位(wèi))；在(zài)細菌學(xué)中zui小(xiǎo)檢出(chū)率(shuài)為3個細菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快速
PCR反(fǎn)應用耐(nài)高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶，一(yī)次性地將反應液加(jiā)好後，即(jí)在DNA擴(kuò)增液(yè)和水浴鍋(guō)上進(jìn)行變性-退(tuì)火-延(yán)伸(shēn)反(fǎn)應，一般(bān)在(zài)2～4 小時完成擴增(zēng)反應。擴增產物(wù)一般(bān)用電泳(yǒng)分析(xī)，不(bù)一(yī)定要用(yòng)同位素，無(wú)放射(shè)性汙染，易推廣。
(4) 對(duì)標本(běn)的(dí)純度要求(qiú)低(dī)
不(bù)需(xū)要分(fēn)離(lí)病毒或細菌及(jí)培養細胞，DNA 粗(cū)製(zhì)品(pǐn)及(jí)總RNA均(jūn)可(kě)作為(wéi)擴(kuò)增模(mó)板(bǎn)。可直(zhí)接用(yòng)臨床(chuáng)標本如(rú)血液(yè)，體(tǐ)腔液(yè)，洗(xǐ)嗽液，毛(máo)發，細胞，活PCR技術(shù)概論(lùn)。
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