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PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé)
商品屬(shǔ)性
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨號 |
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豚(tún)鼠(shǔ)耳炎諾(nuò)卡菌PCR檢測(cè)試劑盒 |
Nocardia otitidiscaviarumPCR |
YS-P014518 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢測試(shì)劑盒(hé)
儲存(cún)條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避(bì)光(guāng)保(bǎo)存，避免(miǎn)反復(fù)凍融(róng)。
運輸：低溫(wēn)，避光。
有(yǒu)效期(qī)：一年(nián)
貨期：現貨PCR試劑(jì)盒的有效(xiào)期一(yī)般(bān)為(wéi)1年，這(zhè)是(shì)指在(zài)適(shì)當(dāng)的儲存(cún)溫(wēn)度下。核酸擴增(zēng)部(bù)分的試(shì)劑一般要(yào)貯存(cún)於(yú)-20℃下，產物(wù)檢(jiǎn)測部(bù)分試劑(jì)則貯存於2-8℃。盡量(liáng)避(bì)免反復凍(dòng)融。
【結(jié)果分(fēn)析條件設定(dìng)】
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定(dìng)：將(jiāng)閾值綫設定在(zài)剛好(hǎo)超過正(zhèng)常陰(yīn)性質控(kòng)品擴(kuò)增(zēng)曲綫的最(zuì)高點(diǎn)。
【質(zhì)控標準】
2. 陽性(xìng)質控(kòng)品(pǐn)的檢(jiǎn)測(cè)結果應為陽(yáng)性，有(yǒu)明顯的(dí)指(zhǐ)數擴(kuò)增期，Ct值應小(xiǎo)於等(děng)於(yú)35；
3. 以上(shàng)要(yào)求(qiú)需在一(yī)次實驗中同(tóng)時滿足(zú)，否則(zé)該次(cì)實驗(yàn)視(shì)為(wéi)無效(xiào)。
【結果判(pàn)斷】
2.可疑：有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴增期(qī)，且38≤Ct<40，此時樣本為可疑(yí)樣(yàng)本；對於(yú)可疑(yí)樣(yàng)本建議(yì)復核一(yī)次(cì)，若(ruò)復核(hé)結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期(qī)，則(zé)判定為陽(yáng)性，否則判(pàn)定為(wéi)陰性；
3. 陰(yīn)性：無指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，Ct=40或無Ct值均(jūn)判定(dìng)為陰(yīn)性(xìng)樣(yàng)本。
【對檢驗結(jié)果(guǒ)的(dí)解釋】
1. 實驗室環(huán)境汙染，試劑汙(wū)染(rǎn)，樣品交叉汙染會出現假陽性(xìng)結果(guǒ)；
2. 試(shì)劑運(yùn)輸，保存不當或(huò)試(shì)劑配(pèi)製不(bù)準(zhǔn)確(què)引(yǐn)起(qǐ)的(dí)試劑檢測效能(néng)下(xià)降，可(kě)能(néng)會導(dǎo)致(zhì)出現(xiàn)假陰性結果。
PCR反應的特異(yì)性：
②鹼(jiǎn)基配對(duì)原(yuán)則；
③Taq DNA聚合酶(méi)合成(chéng)反應(yīng)的(dí)忠實(shí)性；
④靶基(jī)因的(dí)特(tè)異性與保守(shǒu)性。
豚(tún)鼠(shǔ)耳炎諾(nuò)卡(qiǎ)菌PCR檢測試劑盒其(qí)中引(yǐn)物(wù)與模板(bǎn)的(dí)正(zhèng)確結(jié)合是(shì)關鍵(jiàn)。引物(wù)與模(mó)板(bǎn)的(dí)結合及引(yǐn)物鏈的延(yán)伸(shēn)是(shì)遵循(xún)鹼基(jī)配(pèi)對(duì)原(yuán)則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐(nài)高(gāo)溫(wēn)性(xìng)，使(shǐ)反應(yīng)中模板與(yǔ)引物的(dí)結合(復性(xìng))可(kě)以在較(jiào)高(gāo)的(dí)溫度下進行，結合(hé)的特(tè)異性大大增(zēng)加(jiā)，被(bèi)擴增的(dí)靶(bǎ)基(jī)因片(piàn)段也就能保(bǎo)持(chí)很高的正確(què)度(dù)。再通(tōng)過(guò)選(xuǎn)擇特異性(xìng)和保守性高的(dí)靶基(jī)因區，其特異性(xìng)程度(dù)就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產物的生成量是以(yǐ)指(zhǐ)數(shù)方(fāng)式增(zēng)加的，能將皮克(kè)(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起始待測(cè)模板擴增到微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從100萬個細胞中檢出一(yī)個靶(bǎ)細胞；在病(bìng)毒的(dí)檢測(cè)中，PCR的(dí)靈敏度可(kě)達(dá)3個(gè)RFU(空(kōng)斑(bān)形(xíng)成單位(wèi))；在細菌學中zui小檢出率為3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便，快(kuài)速(sù)
PCR反應用耐高(gāo)溫的Taq DNA聚(jù)合(hé)酶，一(yī)次性(xìng)地將反應液(yè)加(jiā)好(hǎo)後，即(jí)在(zài)DNA擴增(zēng)液和(hé)水浴(yù)鍋(guō)上(shàng)進行(háng)變性(xìng)-退火-延伸反(fǎn)應(yīng)，一般(bān)在(zài)2～4 小(xiǎo)時完成擴增反(fǎn)應。擴增產物(wù)一般(bān)用電泳分析(xī)，不(bù)一(yī)定要用(yòng)同位素，無放射性汙染，易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對標(biāo)本的(dí)純度要求低
不(bù)需(xū)要分(fēn)離病(bìng)毒(dú)或細菌及培養(yǎng)細胞，DNA 粗製品及(jí)總(zǒng)RNA均可(kě)作為(wéi)擴增模板。可直接用(yòng)臨床(chuáng)標(biāo)本(běn)如血(xiě)液(yè)，體腔液，洗嗽液(yè)，毛發(fā)，細胞，活(huó)PCR技(jì)術(shù)概(gài)論。
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