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產品中心
PCR檢測(cè)試劑盒
商品(pǐn)屬性(xìng)
| 產品(pǐn)名稱(chēng) | 英文(wén)名(míng)稱(chēng) | 貨號 |
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腦膜蠕蟲(chóng)PCR檢測(cè)試(shì)劑盒 |
Parelaphostrongylus teniusPCR |
YS-P014561 |
分(fēn)類：PCR檢測試(shì)劑盒(hé)
儲存(cún)條(tiáo)件：-20℃避(bì)光(guāng)保(bǎo)存(cún)，避免反(fǎn)復凍融。
運輸(shū)：低溫(wēn)，避(bì)光。
有效期(qī)：一(yī)年
貨(huò)期(qī)：現(xiàn)貨PCR試劑(jì)盒的有效期一般為(wéi)1年，這是(shì)指(zhǐ)在(zài)適當(dāng)的(dí)儲(chǔ)存(cún)溫(wēn)度下。核酸擴增部(bù)分的(dí)試(shì)劑(jì)一(yī)般要貯存(cún)於-20℃下(xià)，產物(wù)檢測部分試劑則貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡(jìn)量避免反復(fù)凍融。
【結(jié)果分析條(tiáo)件設(shè)定】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定：將(jiāng)閾值綫(xiàn)設定在剛好(hǎo)超(chāo)過(guò)正(zhèng)常陰性質(zhì)控(kòng)品(pǐn)擴增(zēng)曲(qū)綫的最(zuì)高點(diǎn)。
【質(zhì)控(kòng)標準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性質(zhì)控品(pǐn)的檢(jiǎn)測結果(guǒ)應(yīng)為陽性(xìng)，有(yǒu)明顯的指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct值(zhí)應小於等(děng)於35；
3. 以(yǐ)上要(yào)求(qiú)需在一次(cì)實驗中(zhōng)同時滿足，否(fǒu)則(zé)該(gāi)次(cì)實驗視為(wéi)無效。
【結(jié)果判(pàn)斷】
2.可疑(yí)：有明顯(xiǎn)的指數(shù)擴增期(qī)，且38≤Ct<40，此時樣(yàng)本為(wéi)可疑(yí)樣本(běn)；對於可(kě)疑樣本建議復(fù)核(hé)一(yī)次，若復核結果(guǒ)Ct<40且有(yǒu)指數(shù)擴增期，則(zé)判定(dìng)為陽性(xìng)，否(fǒu)則判定為(wéi)陰(yīn)性；
3. 陰性(xìng)：無指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct=40或無Ct值均(jūn)判(pàn)定為(wéi)陰性樣本(běn)。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結(jié)果(guǒ)的(dí)解釋(shì)】
1. 實驗(yàn)室(shì)環境(jìng)汙染(rǎn)，試(shì)劑(jì)汙(wū)染，樣品交叉汙(wū)染(rǎn)會出現假(jiǎ)陽性(xìng)結(jié)果(guǒ)；
2. 試(shì)劑運(yùn)輸，保存不(bù)當(dāng)或(huò)試(shì)劑(jì)配(pèi)製(zhì)不準確(què)引(yǐn)起(qǐ)的(dí)試(shì)劑檢(jiǎn)測效能(néng)下(xià)降，可(kě)能(néng)會導致出現假陰(yīn)性(xìng)結(jié)果(guǒ)。
PCR反應(yīng)的(dí)特異性：
②鹼(jiǎn)基配對(duì)原(yuán)則；
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性(xìng)；
④靶(bǎ)基(jī)因(yīn)的(dí)特(tè)異性(xìng)與保守(shǒu)性。
腦膜蠕蟲PCR檢測試劑(jì)盒其(qí)中引物(wù)與模板的(dí)正確結(jié)合是關鍵。引(yǐn)物與模板的結(jié)合及引(yǐn)物鏈的延(yán)伸(shēn)是遵循(xún)鹼基配(pèi)對(duì)原則的。聚合(hé)酶(méi)合成反(fǎn)應的(dí)忠實(shí)性(xìng)及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶耐高溫(wēn)性，使反(fǎn)應(yīng)中模板與(yǔ)引物的結合(復(fù)性)可以在(zài)較高的溫(wēn)度下進(jìn)行，結合的特(tè)異(yì)性(xìng)大大增(zēng)加(jiā)，被(bèi)擴(kuò)增的靶基(jī)因(yīn)片(piàn)段也就能(néng)保(bǎo)持(chí)很高的正確度(dù)。再(zài)通(tōng)過選(xuǎn)擇(zé)特(tè)異(yì)性和(hé)保守性(xìng)高(gāo)的靶基(jī)因(yīn)區，其(qí)特異性(xìng)程度就更高。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度(dù)高(gāo)
PCR產物(wù)的生(shēng)成量(liáng)是以指數(shù)方(fāng)式(shì)增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的(dí)起(qǐ)始待(dài)測模板擴增到微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能(néng)從(cóng)100萬(wàn)個細(xì)胞中(zhōng)檢出(chū)一個靶細胞；在(zài)病毒的(dí)檢測中(zhōng)，PCR的(dí)靈敏度(dù)可達3個(gè)RFU(空斑(bān)形(xíng)成(chéng)單位)；在(zài)細(xì)菌學中zui小(xiǎo)檢出率為(wéi)3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便(biàn)，快速(sù)
PCR反應用耐(nài)高溫(wēn)的Taq DNA聚合酶，一次性地(dì)將反應液加(jiā)好(hǎo)後，即在DNA擴增液(yè)和水(shuǐ)浴鍋上(shàng)進(jìn)行變性-退火(huǒ)-延伸反(fǎn)應，一般(bān)在2～4 小(xiǎo)時完成擴增反(fǎn)應(yīng)。擴增產物(wù)一(yī)般用(yòng)電泳(yǒng)分(fēn)析，不(bù)一(yī)定(dìng)要用(yòng)同位素(sù)，無(wú)放(fàng)射(shè)性汙染，易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對標(biāo)本的(dí)純度(dù)要(yào)求(qiú)低(dī)
不需要分離病毒(dú)或(huò)細菌及培(péi)養(yǎng)細胞(bāo)，DNA 粗製品及(jí)總RNA均(jūn)可(kě)作(zuò)為(wéi)擴(kuò)增(zēng)模板。可(kě)直接用臨(lín)床(chuáng)標(biāo)本如血液，體腔液(yè)，洗(xǐ)嗽液(yè)，毛(máo)發(fā)，細(xì)胞(bāo)，活PCR技術概論(lùn)。
