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PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé)
海藻巴(bā)斯(sī)德(dé)菌(jūn)=海藻(zǎo)百伯史坦(tǎn)菌(jūn)PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒
商品(pǐn)屬(shǔ)性(xìng)
| 產品(pǐn)名稱 | 英文(wén)名(míng)稱 | 貨(huò)號(hào) |
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海藻巴斯(sī)德菌(jūn)=海藻百伯史(shǐ)坦菌PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒 |
Pasteurella trehalosi（=)PCR |
YS-P014566 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢測(cè)試劑盒
儲存(cún)條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運輸：低溫，避光(guāng)。
有(yǒu)效期(qī)：一年
貨(huò)期：現(xiàn)貨PCR試劑盒的(dí)有效(xiào)期(qī)一般(bān)為1年(nián)，這是指(zhǐ)在適(shì)當(dāng)的儲存溫(wēn)度(dù)下。核(hé)酸(suān)擴增部(bù)分的試劑(jì)一般(bān)要貯存於(yú)-20℃下，產物檢測(cè)部(bù)分試劑則貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡量避免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融。
【結果(guǒ)分析條件(jiàn)設(shè)定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設定(dìng)：將(jiāng)閾值綫設定在剛好超過(guò)正常陰(yīn)性(xìng)質(zhì)控(kòng)品(pǐn)擴(kuò)增曲(qū)綫(xiàn)的最高點。
【質控(kòng)標準(zhǔn)】
2. 陽性(xìng)質控品的檢測結果應為陽性(xìng)，有明(míng)顯的指數擴增(zēng)期(qī)，Ct值(zhí)應小(xiǎo)於(yú)等於35；
3. 以上要(yào)求(qiú)需在一次實驗(yàn)中同時滿(mǎn)足(zú)，否則(zé)該(gāi)次(cì)實驗視(shì)為(wéi)無效(xiào)。
【結果(guǒ)判斷】
2.可(kě)疑(yí)：有明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴增期，且38≤Ct<40，此時樣(yàng)本為(wéi)可疑(yí)樣本；對於可疑樣(yàng)本建議(yì)復核(hé)一(yī)次，若復核結果Ct<40且有指數擴增期，則(zé)判定(dìng)為(wéi)陽性，否則(zé)判(pàn)定為陰(yīn)性；
3. 陰性(xìng)：無(wú)指(zhǐ)數擴增(zēng)期，Ct=40或無Ct值(zhí)均判(pàn)定為陰性樣本(běn)。
【對檢驗(yàn)結果的(dí)解釋(shì)】
1. 實(shí)驗室環境汙(wū)染，試(shì)劑(jì)汙(wū)染，樣品(pǐn)交叉汙(wū)染(rǎn)會出現假(jiǎ)陽性結果；
2. 試劑運(yùn)輸，保存不當(dāng)或(huò)試劑配(pèi)製不準(zhǔn)確引起的試劑檢測(cè)效能(néng)下降，可能會導致(zhì)出現假(jiǎ)陰(yīn)性結(jié)果(guǒ)。
PCR反(fǎn)應(yīng)的特(tè)異(yì)性：
②鹼基(jī)配對(duì)原則；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)合成反應的(dí)忠實(shí)性；
④靶基(jī)因的(dí)特異(yì)性與保(bǎo)守性。
海(hǎi)藻巴斯德(dé)菌(jūn)=海藻百(bǎi)伯(bó)史坦菌(jūn)PCR檢測(cè)試(shì)劑盒其中引物(wù)與(yǔ)模板的正確結(jié)合是(shì)關鍵。引(yǐn)物(wù)與模(mó)板的結合及引物鏈的(dí)延伸是遵循鹼(jiǎn)基(jī)配對(duì)原則(zé)的。聚合酶合成反(fǎn)應的忠(zhōng)實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐高溫性，使(shǐ)反應(yīng)中(zhōng)模(mó)板與引物的結合(hé)(復(fù)性(xìng))可(kě)以(yǐ)在較高的溫度(dù)下(xià)進行，結合的特(tè)異性(xìng)大大增加(jiā)，被擴(kuò)增的靶基因(yīn)片(piàn)段(duàn)也就能保持很(hěn)高(gāo)的正(zhèng)確度。再通(tōng)過選擇特(tè)異(yì)性(xìng)和(hé)保守性高的靶基因區(qū)，其特異(yì)性程度(dù)就更(gēng)高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的生成量是(shì)以指(zhǐ)數方(fāng)式(shì)增加的(dí)，能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的起始待測(cè)模(mó)板(bǎn)擴增到微克(ug=10-6g)水平(píng)。能從(cóng)100萬(wàn)個細(xì)胞(bāo)中檢出一個靶(bǎ)細(xì)胞(bāo)；在(zài)病毒的檢測(cè)中(zhōng)，PCR的(dí)靈(líng)敏(mǐn)度可達(dá)3個RFU(空斑形(xíng)成單(dān)位)；在細(xì)菌學中(zhōng)zui小檢出率(shuài)為3個細菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快速(sù)
PCR反(fǎn)應(yīng)用耐高(gāo)溫的Taq DNA聚合酶(méi)，一次性地將(jiāng)反(fǎn)應液加(jiā)好後(hòu)，即(jí)在DNA擴增(zēng)液(yè)和(hé)水(shuǐ)浴(yù)鍋上(shàng)進行變性-退(tuì)火(huǒ)-延伸反應(yīng)，一(yī)般在2～4 小(xiǎo)時完成(chéng)擴增反應(yīng)。擴增(zēng)產(chǎn)物一(yī)般用(yòng)電泳分析，不(bù)一定(dìng)要(yào)用同(tóng)位(wèi)素(sù)，無放射(shè)性汙(wū)染，易推廣。
(4) 對標本的(dí)純度(dù)要求低(dī)
不(bù)需要(yào)分(fēn)離(lí)病毒(dú)或細菌(jūn)及培(péi)養細胞(bāo)，DNA 粗製品及總RNA均可作為(wéi)擴(kuò)增(zēng)模板。可(kě)直(zhí)接(jiē)用(yòng)臨(lín)床(chuáng)標(biāo)本如血液，體(tǐ)腔(qiāng)液，洗嗽液，毛(máo)發，細(xì)胞(bāo)，活PCR技術(shù)概論。
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