產(chǎn)品中(zhōng)心(xīn)
PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒
| 產品名稱 | 英(yīng)文名稱(chēng) | 貨(huò)號 |
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皮(pí)欽德(dé)病毒PCR檢(jiǎn)測試劑盒 |
Pichinde virus(PARV)RTPCR |
YS-P014588 |
分類:PCR檢測試劑(jì)盒
儲(chǔ)存(cún)條(tiáo)件:-20℃避光(guāng)保存,避免(miǎn)反復凍融(róng)。
運(yùn)輸:低溫,避(bì)光(guāng)。
有效(xiào)期:一年(nián)
貨期:現貨PCR試(shì)劑(jì)盒的有效(xiào)期一般為1年,這(zhè)是指(zhǐ)在適當(dāng)的(dí)儲(chǔ)存(cún)溫度(dù)下。核酸擴(kuò)增部分的(dí)試劑一(yī)般要(yào)貯存於-20℃下(xià),產物檢(jiǎn)測部(bù)分(fēn)試(shì)劑則(zé)貯(zhù)存於2-8℃。盡量(liáng)避免反復凍融(róng)。
u 閾值(Threshold)設定(dìng):將(jiāng)閾值綫設(shè)定(dìng)在剛好(hǎo)超過正(zhèng)常陰性(xìng)質(zhì)控品(pǐn)擴(kuò)增曲綫的最高點(diǎn)。
2. 陽(yáng)性質控(kòng)品的(dí)檢測結(jié)果(guǒ)應為陽性,有(yǒu)明(míng)顯的指(zhǐ)數擴增期,Ct值(zhí)應小(xiǎo)於等(děng)於35;
3. 以上(shàng)要(yào)求需(xū)在一(yī)次(cì)實(shí)驗(yàn)中同時滿足,否則(zé)該次實(shí)驗視為(wéi)無效(xiào)。
2.可疑:有明顯的指數擴增(zēng)期,且(qiě)38≤Ct<40,此(cǐ)時樣本為可疑(yí)樣本;對於可(kě)疑樣本建議(yì)復核一次,若復核(hé)結果(guǒ)Ct<40且有(yǒu)指數擴(kuò)增(zēng)期,則判定為陽(yáng)性,否(fǒu)則判(pàn)定為(wéi)陰性;
3. 陰(yīn)性:無(wú)指數擴(kuò)增(zēng)期,Ct=40或無(wú)Ct值均判(pàn)定(dìng)為陰性(xìng)樣(yàng)本。
【對檢驗(yàn)結(jié)果(guǒ)的解釋】
1. 實驗(yàn)室環(huán)境汙染(rǎn),試劑汙染,樣品(pǐn)交(jiāo)叉(chā)汙(wū)染會(huì)出現假(jiǎ)陽(yáng)性(xìng)結果;
2. 試劑(jì)運(yùn)輸,保(bǎo)存不(bù)當或試劑配(pèi)製(zhì)不(bù)準確(què)引(yǐn)起的試(shì)劑(jì)檢(jiǎn)測(cè)效能下降(jiàng),可能會導致出現(xiàn)假陰性結果。
②鹼基(jī)配對原則;
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶合(hé)成反應的忠(zhōng)實(shí)性;
④靶基因(yīn)的特(tè)異性與保(bǎo)守性。
皮欽德(dé)病(bìng)毒PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒其中引物與(yǔ)模板的正確(què)結合是(shì)關(guān)鍵。引(yǐn)物與模板的結合及引(yǐn)物鏈(liàn)的(dí)延伸(shēn)是遵循鹼基(jī)配對原(yuán)則(zé)的(dí)。聚合酶(méi)合成反應的忠(zhōng)實性及Taq DNA聚(jù)合酶(méi)耐高溫性(xìng),使(shǐ)反應中(zhōng)模(mó)板(bǎn)與引(yǐn)物的(dí)結(jié)合(復性(xìng))可以(yǐ)在(zài)較高(gāo)的(dí)溫度下進行,結(jié)合的(dí)特異(yì)性大大(dà)增加,被擴增(zēng)的靶(bǎ)基(jī)因片段(duàn)也(yě)就(jiù)能(néng)保持(chí)很高的正確度(dù)。再通過(guò)選(xuǎn)擇(zé)特異性(xìng)和保(bǎo)守(shǒu)性高的靶基因區(qū),其(qí)特異性(xìng)程度(dù)就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏度高(gāo)
PCR產(chǎn)物的(dí)生成量是(shì)以指數方(fāng)式增加的,能(néng)將皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級的起(qǐ)始(shǐ)待測模板擴增(zēng)到(dào)微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平(píng)。能從100萬個(gè)細胞(bāo)中檢出一個靶細(xì)胞;在病(bìng)毒的檢測(cè)中(zhōng),PCR的(dí)靈敏(mǐn)度可達(dá)3個(gè)RFU(空(kōng)斑形(xíng)成單位);在細菌(jūn)學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細菌。
(3) 簡便(biàn),快(kuài)速
PCR反應用耐高溫(wēn)的Taq DNA聚合酶(méi),一次性(xìng)地將(jiāng)反應(yīng)液(yè)加好後,即在(zài)DNA擴(kuò)增(zēng)液和(hé)水浴鍋(guō)上(shàng)進行(háng)變性(xìng)-退(tuì)火(huǒ)-延(yán)伸反應,一般在(zài)2~4 小(xiǎo)時(shí)完(wán)成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產物一般(bān)用電泳分析(xī),不一定要用同位素,無(wú)放(fàng)射性(xìng)汙(wū)染,易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本的(dí)純度要求(qiú)低(dī)
不需(xū)要(yào)分離病毒或細菌及培(péi)養細胞(bāo),DNA 粗製品(pǐn)及總(zǒng)RNA均可作為擴增模板。可直接用臨(lín)床(chuáng)標本如血液,體(tǐ)腔(qiāng)液,洗(xǐ)嗽液(yè),毛發(fā),細胞,活PCR技術概論(lùn)。
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