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PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒(hé)
商品屬(shǔ)性
| 產(chǎn)品名(míng)稱(chēng) | 英(yīng)文名稱 | 貨(huò)號(hào) |
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鮭魚(yú)立(lì)克次氏(shì)體PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒 |
Piscirickettsia salmonisPCR |
YS-P014593 |
分類：PCR檢測試劑(jì)盒(hé)
儲存條件(jiàn)：-20℃避(bì)光(guāng)保存(cún)，避(bì)免反(fǎn)復(fù)凍融。
運輸(shū)：低(dī)溫(wēn)，避(bì)光。
有效期：一年(nián)
貨(huò)期：現貨PCR試(shì)劑(jì)盒(hé)的(dí)有效期一(yī)般為1年，這(zhè)是(shì)指在適當(dāng)的儲存溫度(dù)下(xià)。核(hé)酸擴增部分(fēn)的(dí)試劑(jì)一(yī)般要貯存(cún)於(yú)-20℃下，產物(wù)檢(jiǎn)測(cè)部分試(shì)劑(jì)則(zé)貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避免(miǎn)反復凍(dòng)融(róng)。
【結(jié)果(guǒ)分析條件設(shè)定(dìng)】
u 閾值(zhí)(Threshold)設定(dìng)：將(jiāng)閾(yù)值(zhí)綫設定在(zài)剛(gāng)好超(chāo)過(guò)正(zhèng)常(cháng)陰(yīn)性(xìng)質(zhì)控(kòng)品擴(kuò)增曲綫(xiàn)的最(zuì)高點。
【質控標(biāo)準】
2. 陽性質控(kòng)品(pǐn)的檢測結(jié)果應為陽(yáng)性(xìng)，有(yǒu)明(míng)顯的指(zhǐ)數擴增期，Ct值應小(xiǎo)於(yú)等(děng)於(yú)35；
3. 以上要求需在(zài)一次(cì)實(shí)驗(yàn)中同時(shí)滿足(zú)，否則(zé)該次實驗視(shì)為(wéi)無(wú)效。
【結果判(pàn)斷(duàn)】
2.可疑(yí)：有明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期，且38≤Ct<40，此時樣本為可疑樣本(běn)；對於可(kě)疑(yí)樣本建議復核(hé)一(yī)次，若復核結果(guǒ)Ct<40且有(yǒu)指(zhǐ)數擴增期，則判定(dìng)為陽(yáng)性(xìng)，否則(zé)判定為陰(yīn)性(xìng)；
3. 陰性：無指(zhǐ)數擴(kuò)增期(qī)，Ct=40或(huò)無Ct值(zhí)均(jūn)判(pàn)定為(wéi)陰性樣本(běn)。
【對檢驗結(jié)果的(dí)解釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室(shì)環(huán)境汙染(rǎn)，試(shì)劑汙(wū)染，樣(yàng)品交叉汙(wū)染會出現(xiàn)假陽性結果；
2. 試(shì)劑(jì)運輸(shū)，保(bǎo)存(cún)不當(dāng)或(huò)試(shì)劑(jì)配(pèi)製不準(zhǔn)確引起(qǐ)的試劑檢測(cè)效能下(xià)降(jiàng)，可能會導(dǎo)致出(chū)現假(jiǎ)陰(yīn)性結果。
PCR反(fǎn)應的特(tè)異(yì)性：
②鹼(jiǎn)基配對(duì)原則；
③Taq DNA聚合(hé)酶合成反(fǎn)應的忠實(shí)性(xìng)；
④靶(bǎ)基因(yīn)的特異(yì)性(xìng)與保(bǎo)守性。
鮭(guī)魚立克次氏(shì)體PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒其中(zhōng)引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的正(zhèng)確結(jié)合(hé)是關(guān)鍵。引物(wù)與模(mó)板(bǎn)的結合及引(yǐn)物(wù)鏈的(dí)延伸(shēn)是(shì)遵循鹼基配對(duì)原則的。聚(jù)合(hé)酶合成反應的忠實(shí)性及Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)耐(nài)高(gāo)溫性，使反(fǎn)應中模(mó)板與引(yǐn)物(wù)的結合(hé)(復(fù)性)可以在較高的溫(wēn)度下進行，結(jié)合的特(tè)異(yì)性(xìng)大大增加(jiā)，被擴(kuò)增的靶基因片段也(yě)就(jiù)能保持很高(gāo)的正確度(dù)。再(zài)通過選(xuǎn)擇特異性和(hé)保守性(xìng)高的(dí)靶基因(yīn)區(qū)，其特異性(xìng)程(chéng)度(dù)就(jiù)更高。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度高
PCR產(chǎn)物(wù)的(dí)生成量是以指數(shù)方式(shì)增加的(dí)，能(néng)將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量(liáng)級的起(qǐ)始(shǐ)待測(cè)模(mó)板(bǎn)擴增(zēng)到微克(kè)(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細胞(bāo)中(zhōng)檢(jiǎn)出(chū)一(yī)個靶(bǎ)細(xì)胞(bāo)；在病毒的檢(jiǎn)測(cè)中，PCR的靈敏(mǐn)度可(kě)達3個RFU(空(kōng)斑形(xíng)成單位)；在(zài)細菌學中(zhōng)zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率為3個(gè)細菌(jūn)。
(3) 簡便，快速(sù)
PCR反應用耐高(gāo)溫(wēn)的Taq DNA聚合酶(méi)，一(yī)次性地(dì)將(jiāng)反應液加好(hǎo)後(hòu)，即(jí)在(zài)DNA擴增液(yè)和水浴鍋(guō)上(shàng)進(jìn)行變性-退(tuì)火(huǒ)-延(yán)伸(shēn)反應，一般在2～4 小(xiǎo)時(shí)完成(chéng)擴(kuò)增反應。擴增(zēng)產(chǎn)物一般用(yòng)電泳(yǒng)分析，不(bù)一定(dìng)要(yào)用同(tóng)位素(sù)，無(wú)放(fàng)射(shè)性汙染，易推廣。
(4) 對(duì)標本(běn)的(dí)純度要求低
不需要(yào)分離(lí)病(bìng)毒或細菌及培(péi)養(yǎng)細胞(bāo)，DNA 粗(cū)製品(pǐn)及總RNA均(jūn)可作為擴增模(mó)板(bǎn)。可(kě)直接用(yòng)臨(lín)床(chuáng)標(biāo)本(běn)如血(xiě)液，體腔(qiāng)液(yè)，洗(xǐ)嗽液，毛發(fā)，細胞，活PCR技術概論。
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