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PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒
瑞(ruì)氏縧(tāo)蟲(chóng)通(tōng)用PCR檢測試劑(jì)盒
商品屬(shǔ)性(xìng)
| 產品名稱(chēng) | 英(yīng)文(wén)名稱 | 貨號(hào) |
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瑞(ruì)氏縧(tāo)蟲(chóng)通用PCR檢測試(shì)劑盒 |
Raillietina spp.PCR |
YS-P014666 |
分(fēn)類：PCR檢測試(shì)劑盒(hé)
儲(chǔ)存條(tiáo)件：-20℃避光保(bǎo)存，避免(miǎn)反復(fù)凍(dòng)融(róng)。
運輸(shū)：低(dī)溫，避光(guāng)。
有(yǒu)效期：一(yī)年
貨期(qī)：現貨(huò)PCR試劑(jì)盒的有效期一般為1年(nián)，這是指(zhǐ)在(zài)適當(dāng)的(dí)儲存(cún)溫度下(xià)。核酸擴(kuò)增(zēng)部分(fēn)的試(shì)劑(jì)一般要貯(zhù)存於(yú)-20℃下，產(chǎn)物(wù)檢(jiǎn)測(cè)部(bù)分(fēn)試劑則(zé)貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡(jìn)量避免反(fǎn)復凍融。
【結果分析條件(jiàn)設定】
u 閾值(Threshold)設定(dìng)：將閾值綫(xiàn)設(shè)定在剛好(hǎo)超過(guò)正(zhèng)常陰(yīn)性(xìng)質控品(pǐn)擴(kuò)增曲(qū)綫的(dí)最(zuì)高點。
【質控(kòng)標準】
2. 陽性質(zhì)控(kòng)品的檢測(cè)結果應為陽(yáng)性(xìng)，有(yǒu)明顯的(dí)指(zhǐ)數擴增(zēng)期，Ct值應(yīng)小於等於35；
3. 以上要(yào)求需(xū)在一次實驗中同時滿足(zú)，否則該次實驗視(shì)為(wéi)無效。
【結果(guǒ)判斷(duàn)】
2.可(kě)疑：有明顯(xiǎn)的指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，且38≤Ct<40，此時(shí)樣本為可疑(yí)樣本；對於(yú)可疑樣本(běn)建議復核一(yī)次，若復核(hé)結(jié)果(guǒ)Ct<40且有指數擴增期，則(zé)判定(dìng)為(wéi)陽性，否則判(pàn)定為(wéi)陰性(xìng)；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無指(zhǐ)數擴增期，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值(zhí)均(jūn)判定為陰(yīn)性樣本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結(jié)果(guǒ)的(dí)解釋】
1. 實驗(yàn)室環(huán)境(jìng)汙染，試(shì)劑汙染，樣(yàng)品(pǐn)交(jiāo)叉汙染(rǎn)會(huì)出現假陽(yáng)性(xìng)結(jié)果(guǒ)；
2. 試劑運輸，保(bǎo)存不當或試劑(jì)配製不(bù)準確引起的試劑(jì)檢測(cè)效(xiào)能(néng)下降，可(kě)能會(huì)導致(zhì)出現(xiàn)假陰性結果(guǒ)。
PCR反應(yīng)的(dí)特(tè)異(yì)性：
②鹼基(jī)配對原則；
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合成反應的忠(zhōng)實性；
④靶基(jī)因的特(tè)異(yì)性與保守性(xìng)。
瑞(ruì)氏縧(tāo)蟲通(tōng)用PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒其(qí)中引(yǐn)物(wù)與模板的(dí)正確(què)結合(hé)是關鍵(jiàn)。引物與模板的結合及引(yǐn)物鏈的(dí)延(yán)伸(shēn)是(shì)遵(zūn)循鹼(jiǎn)基(jī)配對(duì)原則的。聚合酶(méi)合成(chéng)反應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實性及Taq DNA聚合(hé)酶(méi)耐高溫(wēn)性，使反(fǎn)應(yīng)中模板與(yǔ)引物(wù)的結合(hé)(復(fù)性(xìng))可(kě)以在較(jiào)高(gāo)的溫度下(xià)進行，結合的特異(yì)性大大(dà)增加，被擴增(zēng)的靶基因片(piàn)段也就能(néng)保持很(hěn)高的(dí)正(zhèng)確(què)度。再通(tōng)過(guò)選擇(zé)特(tè)異性和保(bǎo)守(shǒu)性高(gāo)的(dí)靶(bǎ)基因(yīn)區(qū)，其(qí)特異(yì)性程度就(jiù)更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏度(dù)高(gāo)
PCR產物的生(shēng)成量(liáng)是以指(zhǐ)數方(fāng)式增加的(dí)，能(néng)將皮克(pg=10-12g)量級的(dí)起(qǐ)始(shǐ)待(dài)測(cè)模板擴(kuò)增(zēng)到微克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能(néng)從100萬個(gè)細胞中檢出一(yī)個靶細胞(bāo)；在(zài)病毒的檢(jiǎn)測中，PCR的靈敏(mǐn)度(dù)可(kě)達(dá)3個(gè)RFU(空(kōng)斑形(xíng)成單(dān)位)；在(zài)細菌(jūn)學中zui小檢(jiǎn)出率(shuài)為3個(gè)細菌(jūn)。
(3) 簡便，快速
PCR反(fǎn)應(yīng)用耐(nài)高(gāo)溫(wēn)的Taq DNA聚合酶，一次性地(dì)將反(fǎn)應(yīng)液加好後，即(jí)在DNA擴增(zēng)液和(hé)水浴(yù)鍋(guō)上進行變性(xìng)-退火(huǒ)-延(yán)伸(shēn)反應，一般在(zài)2～4 小時(shí)完成擴增反(fǎn)應。擴增(zēng)產(chǎn)物一般用電(diàn)泳分(fēn)析，不一定要(yào)用同(tóng)位素，無(wú)放(fàng)射(shè)性汙染，易(yì)推廣。
(4) 對標本(běn)的純度(dù)要求低
不需要分離(lí)病毒(dú)或細菌(jūn)及培(péi)養(yǎng)細胞，DNA 粗製(zhì)品及總(zǒng)RNA均(jūn)可作為擴(kuò)增模(mó)板(bǎn)。可(kě)直接用臨床(chuáng)標(biāo)本如血(xiě)液，體(tǐ)腔液，洗嗽液，毛(máo)發(fā)，細(xì)胞，活PCR技術概論(lùn)。
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- 下一(yī)條：棘盤瑞(ruì)氏縧蟲PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑(jì)盒
