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PCR檢測試劑(jì)盒(hé)
商品(pǐn)屬(shǔ)性
| 產品(pǐn)名(míng)稱(chēng) | 英文(wén)名稱(chēng) | 貨號 |
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棕蜱(pí)通用PCR檢測試劑盒 |
Rhipicephalus spp.PCR |
YS-P014677 |
分類(lèi)：PCR檢測試劑盒(hé)
儲(chǔ)存(cún)條(tiáo)件：-20℃避(bì)光保存，避免反(fǎn)復(fù)凍融(róng)。
運輸：低溫，避(bì)光。
有效(xiào)期：一年
貨期：現貨PCR試劑盒的有效(xiào)期一般為(wéi)1年，這(zhè)是(shì)指(zhǐ)在適當的儲(chǔ)存溫(wēn)度(dù)下。核(hé)酸擴(kuò)增部分的試(shì)劑(jì)一般要貯存於-20℃下，產物(wù)檢測部分(fēn)試(shì)劑(jì)則(zé)貯存於2-8℃。盡量避(bì)免反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融。
【結果分(fēn)析(xī)條件(jiàn)設(shè)定】
u 閾值(Threshold)設定：將閾值(zhí)綫(xiàn)設定在剛(gāng)好超過正常陰性質(zhì)控品擴增(zēng)曲綫(xiàn)的最高(gāo)點。
【質控標準】
2. 陽性(xìng)質(zhì)控品(pǐn)的檢(jiǎn)測結果應為陽性，有明(míng)顯的指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期(qī)，Ct值(zhí)應小於等(děng)於35；
3. 以上要求需在一(yī)次實(shí)驗中同時(shí)滿(mǎn)足(zú)，否(fǒu)則該次實(shí)驗(yàn)視為(wéi)無(wú)效。
【結(jié)果(guǒ)判(pàn)斷(duàn)】
2.可疑(yí)：有明顯(xiǎn)的指數(shù)擴增(zēng)期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時樣(yàng)本為可疑樣本；對於可疑(yí)樣本(běn)建(jiàn)議(yì)復核(hé)一次(cì)，若復核(hé)結(jié)果Ct<40且有指數擴增(zēng)期(qī)，則判(pàn)定為(wéi)陽性，否則判定(dìng)為陰性；
3. 陰(yīn)性：無指(zhǐ)數擴(kuò)增期(qī)，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值(zhí)均判定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性(xìng)樣本。
【對(duì)檢驗(yàn)結果的解釋】
1. 實驗(yàn)室環境汙染(rǎn)，試(shì)劑(jì)汙染(rǎn)，樣(yàng)品(pǐn)交(jiāo)叉(chā)汙染(rǎn)會(huì)出(chū)現(xiàn)假陽(yáng)性結果(guǒ)；
2. 試劑(jì)運(yùn)輸(shū)，保(bǎo)存不當或試劑配(pèi)製(zhì)不準確引(yǐn)起的試劑檢測效能下(xià)降(jiàng)，可能會導致出現假(jiǎ)陰性結果。
PCR反應的特(tè)異(yì)性：
②鹼(jiǎn)基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反(fǎn)應的(dí)忠實性；
④靶基因的(dí)特異(yì)性與保守性。
棕蜱(pí)通用(yòng)PCR檢測試劑盒(hé)其中引物(wù)與模(mó)板的正(zhèng)確結(jié)合是關鍵。引(yǐn)物與模板(bǎn)的結合及引物鏈的延伸是遵(zūn)循鹼基配對原則(zé)的(dí)。聚合酶(méi)合成(chéng)反(fǎn)應的(dí)忠實(shí)性(xìng)及(jí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐高(gāo)溫性(xìng)，使反應中模板(bǎn)與引物(wù)的(dí)結合(hé)(復(fù)性(xìng))可以(yǐ)在(zài)較高的(dí)溫度(dù)下進(jìn)行(háng)，結合的特異性大大增加(jiā)，被擴增(zēng)的靶(bǎ)基因片段也就能保(bǎo)持很高(gāo)的正確(què)度。再(zài)通(tōng)過選擇特(tè)異性(xìng)和(hé)保(bǎo)守(shǒu)性高的(dí)靶基因(yīn)區(qū)，其特(tè)異性(xìng)程度就更高(gāo)。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產(chǎn)物的(dí)生(shēng)成量是以(yǐ)指數方(fāng)式(shì)增加(jiā)的(dí)，能(néng)將皮(pí)克(pg=10-12g)量級的(dí)起(qǐ)始待(dài)測模(mó)板(bǎn)擴(kuò)增到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶(bǎ)細(xì)胞；在(zài)病(bìng)毒(dú)的(dí)檢測(cè)中(zhōng)，PCR的靈敏(mǐn)度(dù)可(kě)達3個(gè)RFU(空(kōng)斑形成(chéng)單(dān)位)；在細菌學中zui小(xiǎo)檢出率為(wéi)3個細菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快速
PCR反(fǎn)應(yīng)用(yòng)耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性(xìng)地將(jiāng)反(fǎn)應(yīng)液加(jiā)好後，即在(zài)DNA擴增液(yè)和(hé)水(shuǐ)浴鍋(guō)上進(jìn)行變性(xìng)-退(tuì)火-延伸反(fǎn)應(yīng)，一(yī)般(bān)在2～4 小時完成擴增反應。擴增產物(wù)一般(bān)用電泳(yǒng)分析，不一(yī)定(dìng)要(yào)用同位(wèi)素，無放(fàng)射(shè)性汙(wū)染，易推廣。
(4) 對標(biāo)本的(dí)純(chún)度(dù)要求低(dī)
不需要(yào)分(fēn)離(lí)病毒或(huò)細(xì)菌及(jí)培(péi)養細(xì)胞，DNA 粗製(zhì)品(pǐn)及總RNA均可作為擴(kuò)增(zēng)模板(bǎn)。可(kě)直接用臨(lín)床(chuáng)標本如(rú)血液，體(tǐ)腔液，洗(xǐ)嗽液，毛發，細胞，活(huó)PCR技(jì)術(shù)概論。
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