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產(chǎn)品中心(xīn)
PCR檢測試劑盒
商(shāng)品(pǐn)屬性
| 產(chǎn)品(pǐn)名(míng)稱 | 英文名(míng)稱 | 貨(huò)號 |
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羊(yáng)血(xiě)吸蟲(chóng)PCR檢測試(shì)劑盒(hé) |
Schistosoma mattheei,PCR |
YS-P014733 |
分類：PCR檢測試(shì)劑盒
儲(chǔ)存條件(jiàn)：-20℃避(bì)光保存，避(bì)免反(fǎn)復(fù)凍融(róng)。
運輸(shū)：低溫，避(bì)光(guāng)。
有效期(qī)：一(yī)年
貨(huò)期(qī)：現貨PCR試劑盒的(dí)有(yǒu)效期一(yī)般為1年(nián)，這是指在(zài)適當的(dí)儲(chǔ)存溫(wēn)度(dù)下。核酸擴增(zēng)部(bù)分的(dí)試劑一般(bān)要貯(zhù)存於-20℃下(xià)，產(chǎn)物(wù)檢測部分試劑(jì)則貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍融。
【結(jié)果分析條(tiáo)件設(shè)定】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設(shè)定(dìng)：將閾值(zhí)綫設定(dìng)在剛好超(chāo)過正(zhèng)常陰(yīn)性質控品(pǐn)擴增曲(qū)綫的(dí)最(zuì)高(gāo)點。
【質(zhì)控標準(zhǔn)】
2. 陽性質(zhì)控品的檢測結(jié)果應為(wéi)陽性，有明(míng)顯(xiǎn)的指數擴增期，Ct值應小(xiǎo)於(yú)等(děng)於35；
3. 以上(shàng)要求(qiú)需(xū)在一(yī)次實(shí)驗(yàn)中同(tóng)時滿足(zú)，否則(zé)該次(cì)實驗(yàn)視為無效(xiào)。
【結果判斷(duàn)】
2.可疑：有明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指數(shù)擴增期，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣本為可(kě)疑(yí)樣本；對於(yú)可疑(yí)樣本建議復核(hé)一(yī)次，若(ruò)復(fù)核(hé)結果Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數擴(kuò)增期，則判定為陽(yáng)性(xìng)，否(fǒu)則判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰性(xìng)；
3. 陰(yīn)性：無(wú)指數擴增(zēng)期(qī)，Ct=40或無(wú)Ct值均(jūn)判(pàn)定為陰性樣本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗結(jié)果(guǒ)的解(jiě)釋】
1. 實驗(yàn)室環(huán)境(jìng)汙染，試(shì)劑汙染(rǎn)，樣(yàng)品交(jiāo)叉汙染會出(chū)現假陽性結果；
2. 試(shì)劑運(yùn)輸，保存(cún)不(bù)當或(huò)試(shì)劑配(pèi)製不準(zhǔn)確(què)引(yǐn)起的(dí)試劑檢測效能下(xià)降，可能會導致(zhì)出現假陰性結果。
PCR反(fǎn)應的(dí)特異性：
②鹼基配對(duì)原則；
③Taq DNA聚合酶合(hé)成(chéng)反應的(dí)忠(zhōng)實(shí)性(xìng)；
④靶基因(yīn)的特異(yì)性(xìng)與(yǔ)保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)。
羊(yáng)血(xiě)吸蟲PCR檢測(cè)試劑盒其中引(yǐn)物(wù)與模板(bǎn)的(dí)正(zhèng)確結合是(shì)關(guān)鍵。引物與模(mó)板(bǎn)的(dí)結合(hé)及引物(wù)鏈(liàn)的延伸(shēn)是遵(zūn)循鹼基配(pèi)對原則的(dí)。聚合酶合(hé)成反(fǎn)應的忠實(shí)性(xìng)及Taq DNA聚合(hé)酶(méi)耐高溫性，使(shǐ)反應中模(mó)板與引(yǐn)物(wù)的結合(復性)可以在(zài)較高的溫(wēn)度下進行，結合(hé)的特異性大大(dà)增(zēng)加(jiā)，被(bèi)擴增的靶(bǎ)基因片段也就(jiù)能保持很(hěn)高(gāo)的(dí)正確度。再(zài)通過選(xuǎn)擇特(tè)異(yì)性和保(bǎo)守性高的靶基(jī)因區，其(qí)特異性程度(dù)就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏度(dù)高
PCR產物(wù)的生成量是以(yǐ)指數(shù)方式增(zēng)加的(dí)，能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量級的(dí)起始待測模(mó)板(bǎn)擴(kuò)增到微(wēi)克(ug=10-6g)水平(píng)。能(néng)從(cóng)100萬個(gè)細胞中檢(jiǎn)出一個(gè)靶細(xì)胞；在(zài)病(bìng)毒的(dí)檢(jiǎn)測中，PCR的(dí)靈(líng)敏(mǐn)度可達3個RFU(空斑形(xíng)成單位(wèi))；在細菌(jūn)學中zui小檢出率為3個(gè)細菌。
(3) 簡便，快速
PCR反應用耐高(gāo)溫的Taq DNA聚(jù)合酶(méi)，一次(cì)性地(dì)將反(fǎn)應液加好後，即(jí)在(zài)DNA擴(kuò)增(zēng)液和(hé)水浴(yù)鍋上(shàng)進(jìn)行(háng)變性(xìng)-退(tuì)火-延伸反應(yīng)，一般在(zài)2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增(zēng)反(fǎn)應(yīng)。擴增產物(wù)一(yī)般用(yòng)電泳(yǒng)分(fēn)析(xī)，不一(yī)定要用同位素(sù)，無(wú)放射性汙染(rǎn)，易(yì)推(tuī)廣。
(4) 對(duì)標本的純度要求(qiú)低
不需(xū)要分離病毒(dú)或細菌及(jí)培養細胞，DNA 粗製品及總RNA均可作(zuò)為擴增模板。可直(zhí)接用臨(lín)床(chuáng)標本(běn)如血(xiě)液，體(tǐ)腔(qiāng)液，洗嗽液(yè)，毛發，細(xì)胞，活(huó)PCR技術(shù)概(gài)論(lùn)。
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