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產(chǎn)品中心
PCR檢測(cè)試劑盒(hé)
商(shāng)品屬性
| 產品名稱 | 英文名(míng)稱(chēng) | 貨號(hào) |
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鯉(lǐ)春病(bìng)毒血症(zhèng)病(bìng)毒(dú)PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒 |
Spring Viraemia of Carp Virus(SVCV)RTPCR |
YS-P014761 |
分(fēn)類：PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒
儲(chǔ)存條件(jiàn)：-20℃避(bì)光保存(cún)，避免(miǎn)反復凍融(róng)。
運輸(shū)：低(dī)溫(wēn)，避光。
有效期：一(yī)年(nián)
貨(huò)期(qī)：現(xiàn)貨(huò)PCR試劑盒的(dí)有(yǒu)效期一(yī)般為(wéi)1年，這是指(zhǐ)在適(shì)當(dāng)的(dí)儲(chǔ)存(cún)溫度下。核(hé)酸擴增(zēng)部(bù)分的(dí)試劑(jì)一般要(yào)貯(zhù)存(cún)於(yú)-20℃下，產物(wù)檢測(cè)部(bù)分試劑(jì)則貯(zhù)存於2-8℃。盡量(liáng)避免(miǎn)反復(fù)凍融。
【結果(guǒ)分(fēn)析條(tiáo)件(jiàn)設(shè)定(dìng)】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定：將閾值綫設定在(zài)剛(gāng)好超(chāo)過正常(cháng)陰(yīn)性質控品擴(kuò)增曲(qū)綫(xiàn)的(dí)最高(gāo)點(diǎn)。
【質控標準】
2. 陽性(xìng)質(zhì)控(kòng)品的檢(jiǎn)測(cè)結果(guǒ)應(yīng)為陽性，有(yǒu)明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī)，Ct值應小於等於35；
3. 以上(shàng)要求需(xū)在(zài)一次(cì)實驗中同(tóng)時滿(mǎn)足，否(fǒu)則(zé)該次(cì)實驗視(shì)為無(wú)效。
【結(jié)果(guǒ)判斷】
2.可疑(yí)：有明(míng)顯的(dí)指數(shù)擴增期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此時(shí)樣本(běn)為可(kě)疑(yí)樣本(běn)；對(duì)於可疑(yí)樣本建議(yì)復核一(yī)次(cì)，若復核(hé)結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有(yǒu)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期，則判(pàn)定為(wéi)陽性，否(fǒu)則判定(dìng)為陰性；
3. 陰性：無(wú)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，Ct=40或無(wú)Ct值(zhí)均判定(dìng)為(wéi)陰性(xìng)樣(yàng)本。
【對檢驗結(jié)果的(dí)解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗室環境汙染，試(shì)劑汙(wū)染，樣品(pǐn)交叉(chā)汙染(rǎn)會出(chū)現(xiàn)假陽性結(jié)果(guǒ)；
2. 試(shì)劑(jì)運(yùn)輸，保(bǎo)存不當(dāng)或試(shì)劑配製不準確(què)引起(qǐ)的(dí)試(shì)劑檢(jiǎn)測效能下降(jiàng)，可能會(huì)導致出現假陰性結果(guǒ)。
PCR反應(yīng)的(dí)特異(yì)性：
②鹼(jiǎn)基配對原(yuán)則；
③Taq DNA聚合酶合(hé)成反(fǎn)應的忠實性；
④靶基因(yīn)的特異性與保(bǎo)守性。
鯉(lǐ)春病毒血症病毒(dú)PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒(hé)其中引物與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的(dí)正(zhèng)確結(jié)合(hé)是關鍵(jiàn)。引(yǐn)物與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的結合及引(yǐn)物(wù)鏈(liàn)的(dí)延(yán)伸(shēn)是遵循(xún)鹼基配(pèi)對原(yuán)則(zé)的(dí)。聚合(hé)酶合成(chéng)反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合(hé)酶耐高溫性(xìng)，使反(fǎn)應中模板與引物的結合(hé)(復(fù)性(xìng))可以在(zài)較高的(dí)溫(wēn)度下進行，結合的(dí)特(tè)異性(xìng)大大增加(jiā)，被擴增(zēng)的靶(bǎ)基因片(piàn)段(duàn)也就能(néng)保(bǎo)持(chí)很高的(dí)正(zhèng)確度(dù)。再通(tōng)過選(xuǎn)擇(zé)特異(yì)性和(hé)保守性(xìng)高的(dí)靶基因(yīn)區(qū)，其特異性(xìng)程(chéng)度(dù)就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏度高
PCR產物(wù)的(dí)生成量(liáng)是以指(zhǐ)數方(fāng)式(shì)增加的，能將皮克(kè)(pg=10-12g)量級的(dí)起(qǐ)始待測模板擴增(zēng)到(dào)微克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能(néng)從100萬個(gè)細(xì)胞(bāo)中檢(jiǎn)出(chū)一個靶細胞；在(zài)病毒(dú)的檢測中，PCR的(dí)靈敏度(dù)可(kě)達(dá)3個RFU(空斑形成單位)；在細菌(jūn)學中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率為(wéi)3個(gè)細菌。
(3) 簡便，快速
PCR反應用耐高溫(wēn)的Taq DNA聚合酶，一(yī)次(cì)性地將(jiāng)反(fǎn)應液(yè)加好後(hòu)，即在DNA擴(kuò)增液和(hé)水(shuǐ)浴(yù)鍋上進行變(biàn)性-退火-延(yán)伸(shēn)反應，一般在(zài)2～4 小(xiǎo)時(shí)完成(chéng)擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物(wù)一(yī)般用電(diàn)泳分(fēn)析(xī)，不(bù)一定(dìng)要用同位素，無(wú)放射性汙染，易推廣。
(4) 對標本的純度要(yào)求低(dī)
不(bù)需(xū)要分離病毒或(huò)細菌(jūn)及培(péi)養細(xì)胞(bāo)，DNA 粗製(zhì)品及總(zǒng)RNA均(jūn)可作(zuò)為(wéi)擴(kuò)增(zēng)模板。可直(zhí)接用臨床(chuáng)標(biāo)本(běn)如血液，體腔液，洗嗽液(yè)，毛發(fā)，細(xì)胞，活PCR技(jì)術概(gài)論。
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