產品(pǐn)中心(xīn)
PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒(hé)
商(shāng)品屬(shǔ)性(xìng)
| 產品(pǐn)名(míng)稱 | 英文名(míng)稱 | 貨號 |
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鏈球(qiú)菌屬(shǔ)通(tōng)用(yòng)PCR檢測試(shì)劑盒(hé) |
Streptococcus spp.PCR |
YS-P014792 |
分類：PCR檢測(cè)試劑盒
儲存(cún)條件(jiàn)：-20℃避光保存，避免(miǎn)反復凍(dòng)融(róng)。
運輸(shū)：低溫，避光。
有效期(qī)：一(yī)年
貨期：現貨PCR試劑盒(hé)的有(yǒu)效期一般為1年(nián)，這是指在適當(dāng)的(dí)儲存(cún)溫(wēn)度下。核酸擴增(zēng)部(bù)分(fēn)的試(shì)劑一般要貯(zhù)存(cún)於-20℃下(xià)，產物(wù)檢測部(bù)分試劑則(zé)貯存(cún)於2-8℃。盡量(liáng)避免反(fǎn)復凍融。
【結果分析(xī)條件(jiàn)設定】
u 閾(yù)值(Threshold)設(shè)定(dìng)：將閾值綫設定(dìng)在剛好(hǎo)超(chāo)過(guò)正常陰(yīn)性質(zhì)控品(pǐn)擴(kuò)增(zēng)曲綫(xiàn)的最高點。
【質(zhì)控(kòng)標準】
2. 陽性質控(kòng)品的檢測(cè)結果應(yīng)為(wéi)陽性(xìng)，有明(míng)顯(xiǎn)的指數(shù)擴(kuò)增期，Ct值應小於(yú)等(děng)於35；
3. 以上要(yào)求(qiú)需(xū)在(zài)一次實(shí)驗(yàn)中(zhōng)同時(shí)滿足，否則該次(cì)實驗(yàn)視為(wéi)無效。
【結果(guǒ)判(pàn)斷(duàn)】
2.可疑(yí)：有明顯(xiǎn)的(dí)指數(shù)擴增期(qī)，且38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣(yàng)本為可疑(yí)樣(yàng)本(běn)；對於可疑樣本(běn)建(jiàn)議(yì)復核一次(cì)，若復核(hé)結(jié)果Ct<40且有指(zhǐ)數擴增(zēng)期(qī)，則判定為陽(yáng)性(xìng)，否(fǒu)則判定為(wéi)陰(yīn)性；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無(wú)指(zhǐ)數(shù)擴增期，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值(zhí)均判(pàn)定(dìng)為陰性(xìng)樣(yàng)本(běn)。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結果的解釋】
1. 實(shí)驗室環(huán)境汙染(rǎn)，試劑汙染(rǎn)，樣品交叉汙染會出現(xiàn)假陽性結(jié)果；
2. 試劑運輸，保存不當(dāng)或(huò)試(shì)劑配製不準確(què)引(yǐn)起的試劑(jì)檢(jiǎn)測效(xiào)能(néng)下(xià)降，可(kě)能(néng)會導(dǎo)致(zhì)出現(xiàn)假(jiǎ)陰(yīn)性(xìng)結果。
PCR反(fǎn)應(yīng)的(dí)特(tè)異性：
②鹼基配(pèi)對(duì)原則；
③Taq DNA聚合(hé)酶合成反應的忠(zhōng)實(shí)性；
④靶基因的(dí)特異(yì)性(xìng)與(yǔ)保(bǎo)守性。
鏈球菌(jūn)屬(shǔ)通用PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒其(qí)中(zhōng)引物與模板(bǎn)的(dí)正確(què)結合是關鍵(jiàn)。引(yǐn)物與模(mó)板的(dí)結合及引物(wù)鏈的延伸(shēn)是遵循鹼基配(pèi)對(duì)原(yuán)則的。聚(jù)合(hé)酶合成反(fǎn)應的(dí)忠(zhōng)實(shí)性及(jí)Taq DNA聚合(hé)酶耐(nài)高溫(wēn)性，使(shǐ)反應中模板(bǎn)與(yǔ)引(yǐn)物的結合(hé)(復(fù)性(xìng))可以(yǐ)在(zài)較高的(dí)溫(wēn)度下(xià)進行，結(jié)合的特異性大(dà)大(dà)增(zēng)加，被(bèi)擴(kuò)增的靶(bǎ)基因片段也就(jiù)能保(bǎo)持很(hěn)高(gāo)的正確度。再通(tōng)過選擇(zé)特異性和(hé)保(bǎo)守性高的靶基(jī)因(yīn)區(qū)，其(qí)特異性(xìng)程(chéng)度就(jiù)更高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度(dù)高(gāo)
PCR產物(wù)的生(shēng)成(chéng)量是以(yǐ)指數(shù)方式增(zēng)加的，能(néng)將(jiāng)皮(pí)克(kè)(pg=10-12g)量級的(dí)起(qǐ)始(shǐ)待測(cè)模板擴增到微克(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬(wàn)個(gè)細胞(bāo)中檢出一(yī)個靶(bǎ)細胞(bāo)；在(zài)病(bìng)毒的(dí)檢測中，PCR的靈敏(mǐn)度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑(bān)形(xíng)成(chéng)單(dān)位(wèi))；在(zài)細菌學(xué)中zui小檢(jiǎn)出率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快(kuài)速
PCR反(fǎn)應用耐(nài)高溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合酶，一次(cì)性(xìng)地將(jiāng)反(fǎn)應液加好(hǎo)後，即在DNA擴(kuò)增(zēng)液(yè)和(hé)水浴鍋上(shàng)進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一(yī)般(bān)在(zài)2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應。擴增產物一般(bān)用(yòng)電泳分析(xī)，不一定(dìng)要(yào)用同位素(sù)，無(wú)放射(shè)性(xìng)汙(wū)染(rǎn)，易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需(xū)要分(fēn)離(lí)病(bìng)毒(dú)或(huò)細(xì)菌及培養細胞(bāo)，DNA 粗製(zhì)品(pǐn)及總(zǒng)RNA均(jūn)可作為(wéi)擴增模(mó)板。可(kě)直接用(yòng)臨床標本如(rú)血液(yè)，體腔液，洗(xǐ)嗽液，毛發，細胞，活PCR技術(shù)概(gài)論。
