產(chǎn)品(pǐn)中(zhōng)心
PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒
商(shāng)品(pǐn)屬(shǔ)性(xìng)
| 產品名稱 | 英(yīng)文(wén)名稱 | 貨號 |
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類(lèi)圓綫蟲通(tōng)用PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé) |
Strongyloides spp.PCR |
YS-P014804 |
分類(lèi)：PCR檢測(cè)試(shì)劑盒
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存(cún)，避(bì)免(miǎn)反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫(wēn)，避光。
有(yǒu)效期：一年(nián)
貨期：現(xiàn)貨(huò)PCR試劑盒的(dí)有效期一般為1年(nián)，這是(shì)指(zhǐ)在適當的(dí)儲存(cún)溫度下(xià)。核(hé)酸擴(kuò)增(zēng)部分的(dí)試劑一(yī)般要貯存(cún)於(yú)-20℃下(xià)，產物檢測部(bù)分(fēn)試劑則貯存於2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避(bì)免反復凍融(róng)。
【結果(guǒ)分析(xī)條件設定(dìng)】
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定：將(jiāng)閾(yù)值綫(xiàn)設定(dìng)在剛好超過正常陰性質(zhì)控(kòng)品擴(kuò)增(zēng)曲(qū)綫的(dí)最(zuì)高點(diǎn)。
【質控(kòng)標準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性質控品(pǐn)的(dí)檢測結果(guǒ)應為陽(yáng)性(xìng)，有明(míng)顯的指數(shù)擴(kuò)增期，Ct值應小(xiǎo)於等(děng)於(yú)35；
3. 以上(shàng)要求需在(zài)一次實(shí)驗中同時(shí)滿(mǎn)足，否(fǒu)則(zé)該次實(shí)驗視為無(wú)效。
【結果判斷(duàn)】
2.可疑(yí)：有(yǒu)明(míng)顯的指(zhǐ)數(shù)擴增期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣本為(wéi)可(kě)疑(yí)樣(yàng)本；對(duì)於可(kě)疑樣(yàng)本建議復核一次，若復(fù)核結(jié)果Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數擴增(zēng)期(qī)，則判定為(wéi)陽性(xìng)，否(fǒu)則判定為陰性；
3. 陰(yīn)性：無(wú)指數擴增(zēng)期，Ct=40或(huò)無Ct值(zhí)均(jūn)判定為陰性(xìng)樣本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗結果(guǒ)的解釋】
1. 實(shí)驗室環境汙(wū)染，試(shì)劑汙染(rǎn)，樣品交叉汙染(rǎn)會(huì)出(chū)現(xiàn)假陽(yáng)性(xìng)結果(guǒ)；
2. 試劑運(yùn)輸，保存(cún)不(bù)當(dāng)或(huò)試劑(jì)配製不(bù)準(zhǔn)確引(yǐn)起的(dí)試劑檢(jiǎn)測效(xiào)能下降，可能(néng)會導致出現假(jiǎ)陰性結果(guǒ)。
PCR反應(yīng)的(dí)特(tè)異性：
②鹼基配對原(yuán)則(zé)；
③Taq DNA聚合酶(méi)合(hé)成反(fǎn)應的(dí)忠實(shí)性(xìng)；
④靶(bǎ)基(jī)因的特(tè)異性與保守(shǒu)性。
類(lèi)圓綫蟲(chóng)通(tōng)用PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒(hé)其中引物(wù)與模(mó)板的正(zhèng)確結(jié)合(hé)是關鍵。引物與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的結合及引(yǐn)物鏈的(dí)延伸是(shì)遵循鹼(jiǎn)基配對原則的。聚合(hé)酶合(hé)成反應的(dí)忠實性(xìng)及Taq DNA聚合酶耐高(gāo)溫性，使反應(yīng)中模板與(yǔ)引物的結合(hé)(復(fù)性(xìng))可以(yǐ)在(zài)較高(gāo)的(dí)溫(wēn)度下進行(háng)，結合(hé)的(dí)特異(yì)性(xìng)大大增(zēng)加，被(bèi)擴(kuò)增的靶基因(yīn)片段(duàn)也(yě)就(jiù)能保持(chí)很高的正(zhèng)確度(dù)。再(zài)通過(guò)選(xuǎn)擇特(tè)異性和(hé)保守性高(gāo)的靶(bǎ)基(jī)因(yīn)區(qū)，其特異(yì)性程(chéng)度就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產物的生成量(liáng)是(shì)以(yǐ)指(zhǐ)數(shù)方式(shì)增(zēng)加的，能(néng)將皮克(kè)(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的起始(shǐ)待(dài)測(cè)模(mó)板(bǎn)擴增(zēng)到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平。能(néng)從100萬個細(xì)胞中檢(jiǎn)出(chū)一(yī)個靶(bǎ)細胞(bāo)；在(zài)病(bìng)毒(dú)的檢測中，PCR的(dí)靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形(xíng)成單位(wèi))；在(zài)細菌學中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出(chū)率為(wéi)3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡便，快(kuài)速
PCR反(fǎn)應(yīng)用耐(nài)高溫的(dí)Taq DNA聚合酶，一(yī)次(cì)性地將反(fǎn)應(yīng)液(yè)加(jiā)好後，即(jí)在DNA擴增(zēng)液和水(shuǐ)浴鍋(guō)上進行變性(xìng)-退火-延(yán)伸(shēn)反應(yīng)，一般在(zài)2～4 小(xiǎo)時(shí)完(wán)成擴增(zēng)反(fǎn)應(yīng)。擴增產物(wù)一般用電(diàn)泳(yǒng)分(fēn)析，不(bù)一定(dìng)要用同(tóng)位(wèi)素，無(wú)放射性汙(wū)染(rǎn)，易推廣(guǎng)。
(4) 對標本的純度要(yào)求低
不需(xū)要(yào)分(fēn)離病毒或(huò)細菌及(jí)培養(yǎng)細胞(bāo)，DNA 粗製品(pǐn)及總RNA均可(kě)作為擴增模板。可直(zhí)接用(yòng)臨(lín)床(chuáng)標本(běn)如血液(yè)，體腔液，洗嗽(sòu)液(yè)，毛發(fā)，細胞，活PCR技術(shù)概(gài)論。
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