產品中(zhōng)心
PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé)
商(shāng)品屬性
| 產品(pǐn)名(míng)稱(chēng) | 英(yīng)文(wén)名(míng)稱 | 貨(huò)號 |
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小泰(tài)勒蟲(chóng)PCR檢測試劑盒 |
Theileria parvaPCR |
YS-P014836 |
分(fēn)類：PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé)
儲存(cún)條件：-20℃避光(guāng)保存，避免(miǎn)反復(fù)凍融。
運輸(shū)：低(dī)溫，避光。
有(yǒu)效期：一年
貨期：現(xiàn)貨PCR試(shì)劑(jì)盒(hé)的(dí)有效(xiào)期一般(bān)為1年，這(zhè)是(shì)指(zhǐ)在適(shì)當(dāng)的儲(chǔ)存溫(wēn)度(dù)下。核酸(suān)擴增部(bù)分(fēn)的試(shì)劑一般要貯存(cún)於-20℃下(xià)，產(chǎn)物(wù)檢測(cè)部分(fēn)試劑則貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡量(liáng)避免反復凍(dòng)融(róng)。
【結果分(fēn)析條件(jiàn)設(shè)定(dìng)】
u 閾(yù)值(Threshold)設(shè)定(dìng)：將閾(yù)值綫(xiàn)設(shè)定在(zài)剛(gāng)好(hǎo)超過正常(cháng)陰(yīn)性(xìng)質控(kòng)品(pǐn)擴增曲(qū)綫的最高(gāo)點。
【質控(kòng)標準】
2. 陽性質(zhì)控(kòng)品的檢(jiǎn)測結果應(yīng)為(wéi)陽(yáng)性(xìng)，有明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指數(shù)擴增期，Ct值應小(xiǎo)於等於35；
3. 以上(shàng)要求需(xū)在一次實驗(yàn)中同時滿足(zú)，否則(zé)該(gāi)次(cì)實驗(yàn)視(shì)為無(wú)效。
【結(jié)果判斷(duàn)】
2.可(kě)疑：有明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指數擴(kuò)增(zēng)期，且38≤Ct<40，此時(shí)樣本為可疑樣本(běn)；對(duì)於可疑樣本(běn)建議復核一(yī)次，若(ruò)復核(hé)結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有(yǒu)指數擴(kuò)增期，則判定為陽性，否(fǒu)則判(pàn)定為(wéi)陰性；
3. 陰性(xìng)：無(wú)指數擴增(zēng)期，Ct=40或無Ct值(zhí)均判定(dìng)為陰(yīn)性(xìng)樣(yàng)本(běn)。
【對檢驗結(jié)果的解釋(shì)】
1. 實(shí)驗室(shì)環境汙(wū)染，試(shì)劑汙染(rǎn)，樣(yàng)品交叉(chā)汙(wū)染(rǎn)會出現假陽性結(jié)果(guǒ)；
2. 試(shì)劑運輸(shū)，保(bǎo)存(cún)不(bù)當(dāng)或(huò)試(shì)劑(jì)配(pèi)製不準確引(yǐn)起的(dí)試劑(jì)檢測(cè)效能下降，可能會(huì)導致出現(xiàn)假陰(yīn)性(xìng)結果(guǒ)。
PCR反應的特異性：
②鹼基(jī)配(pèi)對原則；
③Taq DNA聚合酶合(hé)成反應(yīng)的忠(zhōng)實(shí)性(xìng)；
④靶基因(yīn)的(dí)特(tè)異性與保守性。
小泰(tài)勒(lè)蟲PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé)其(qí)中(zhōng)引物與模(mó)板(bǎn)的正確結(jié)合是關(guān)鍵(jiàn)。引物與模(mó)板的結合及(jí)引物鏈(liàn)的延伸(shēn)是(shì)遵循鹼基配(pèi)對原(yuán)則的。聚合酶(méi)合成反應的(dí)忠(zhōng)實(shí)性及(jí)Taq DNA聚合(hé)酶耐高(gāo)溫性，使反應中(zhōng)模板與(yǔ)引(yǐn)物的結合(復(fù)性)可以(yǐ)在(zài)較高(gāo)的(dí)溫度(dù)下進行(háng)，結合的(dí)特(tè)異性大(dà)大增加(jiā)，被擴(kuò)增的靶基因(yīn)片段(duàn)也(yě)就能保(bǎo)持很(hěn)高的正確(què)度。再(zài)通過選(xuǎn)擇(zé)特異(yì)性(xìng)和(hé)保守(shǒu)性高(gāo)的靶(bǎ)基(jī)因區，其特異(yì)性程(chéng)度(dù)就(jiù)更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度高(gāo)
PCR產物(wù)的(dí)生成量是以(yǐ)指數方(fāng)式增加(jiā)的(dí)，能將(jiāng)皮(pí)克(pg=10-12g)量級的(dí)起始待(dài)測模板擴增到微(wēi)克(ug=10-6g)水平。能(néng)從100萬個細(xì)胞中(zhōng)檢出(chū)一個靶(bǎ)細胞(bāo)；在(zài)病毒的檢(jiǎn)測(cè)中，PCR的(dí)靈(líng)敏度(dù)可達3個RFU(空斑形成單位(wèi))；在細(xì)菌(jūn)學(xué)中(zhōng)zui小(xiǎo)檢出率(shuài)為(wéi)3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便(biàn)，快(kuài)速(sù)
PCR反應(yīng)用耐高溫的(dí)Taq DNA聚合酶，一次(cì)性(xìng)地將(jiāng)反應(yīng)液加好後(hòu)，即在DNA擴增(zēng)液(yè)和水浴鍋上進行(háng)變性-退火(huǒ)-延(yán)伸(shēn)反應，一般在2～4 小時完成擴增(zēng)反應(yīng)。擴(kuò)增產物一(yī)般(bān)用(yòng)電泳分析，不一(yī)定要(yào)用同位素，無(wú)放(fàng)射(shè)性汙染，易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標(biāo)本的(dí)純度要(yào)求低
不需要分離(lí)病毒或細菌及培(péi)養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗(cū)製品(pǐn)及總RNA均(jūn)可(kě)作(zuò)為(wéi)擴(kuò)增模(mó)板。可直(zhí)接用臨床標(biāo)本(běn)如血(xiě)液，體(tǐ)腔液(yè)，洗嗽液(yè)，毛(máo)發，細胞，活PCR技(jì)術概論。
