產(chǎn)品中(zhōng)心
PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒
商品(pǐn)屬性(xìng)
| 產(chǎn)品名(míng)稱 | 英(yīng)文名稱(chēng) | 貨號(hào) |
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泰勒屬原蟲通(tōng)用PCR檢測試(shì)劑盒(hé) |
Theileria spp.PCR |
YS-P014838 |
分類(lèi)：PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑(jì)盒
儲存條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避光保(bǎo)存，避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍融。
運(yùn)輸(shū)：低(dī)溫(wēn)，避(bì)光。
有效期：一(yī)年
貨(huò)期：現(xiàn)貨PCR試劑盒(hé)的(dí)有(yǒu)效期一般為(wéi)1年(nián)，這是(shì)指在適(shì)當(dāng)的儲存(cún)溫(wēn)度下(xià)。核酸擴增部(bù)分的試劑一(yī)般(bān)要貯存於(yú)-20℃下，產物檢測部(bù)分試劑(jì)則貯存於(yú)2-8℃。盡量避(bì)免(miǎn)反復凍融。
【結果分(fēn)析條件設(shè)定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設(shè)定：將閾(yù)值(zhí)綫設定在剛(gāng)好超過(guò)正常陰性質控(kòng)品擴增曲綫(xiàn)的最高(gāo)點(diǎn)。
【質控標準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性質控(kòng)品的檢測(cè)結果(guǒ)應(yīng)為陽(yáng)性，有明顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數擴(kuò)增期，Ct值應(yīng)小(xiǎo)於(yú)等於(yú)35；
3. 以(yǐ)上要求(qiú)需(xū)在一次(cì)實驗(yàn)中(zhōng)同時(shí)滿足，否則該(gāi)次(cì)實驗(yàn)視(shì)為(wéi)無(wú)效。
【結果(guǒ)判斷】
2.可(kě)疑：有(yǒu)明(míng)顯(xiǎn)的指數(shù)擴增期，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣本(běn)為可(kě)疑樣本；對(duì)於可疑(yí)樣(yàng)本(běn)建議復核(hé)一(yī)次，若復核結果(guǒ)Ct<40且有指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期，則判定為(wéi)陽(yáng)性，否(fǒu)則判定(dìng)為陰性；
3. 陰性(xìng)：無(wú)指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期(qī)，Ct=40或(huò)無Ct值均判(pàn)定(dìng)為陰(yīn)性(xìng)樣(yàng)本(běn)。
【對(duì)檢(jiǎn)驗(yàn)結(jié)果的解(jiě)釋(shì)】
1. 實驗室環境(jìng)汙(wū)染，試劑汙染，樣品交叉汙染(rǎn)會出(chū)現假陽性(xìng)結果(guǒ)；
2. 試劑(jì)運(yùn)輸，保(bǎo)存(cún)不當或試劑(jì)配製不準(zhǔn)確引起的(dí)試(shì)劑檢測效(xiào)能下降(jiàng)，可能會導致(zhì)出(chū)現假陰性結果。
PCR反應的特異性：
②鹼(jiǎn)基(jī)配對原則；
③Taq DNA聚合(hé)酶合(hé)成反(fǎn)應(yīng)的忠(zhōng)實性(xìng)；
④靶(bǎ)基因的(dí)特異(yì)性(xìng)與(yǔ)保(bǎo)守性。
泰勒屬原(yuán)蟲通用PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒其(qí)中引物與(yǔ)模板(bǎn)的正確(què)結合是關鍵。引(yǐn)物(wù)與模板的結合及引物(wù)鏈的延伸是(shì)遵循鹼基配對原則(zé)的。聚合(hé)酶(méi)合成(chéng)反應的忠實性及Taq DNA聚合(hé)酶(méi)耐高溫性，使(shǐ)反應(yīng)中模板(bǎn)與引(yǐn)物的結(jié)合(hé)(復性)可以在(zài)較高(gāo)的(dí)溫(wēn)度下(xià)進行(háng)，結合(hé)的(dí)特異(yì)性大(dà)大增(zēng)加(jiā)，被擴增的靶(bǎ)基因片段(duàn)也(yě)就(jiù)能保(bǎo)持很高(gāo)的正確(què)度(dù)。再通過選擇特(tè)異(yì)性(xìng)和(hé)保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)高的靶基因(yīn)區，其(qí)特異性程度(dù)就更高。
(2) 靈敏(mǐn)度(dù)高
PCR產(chǎn)物的生(shēng)成量是以(yǐ)指(zhǐ)數(shù)方(fāng)式(shì)增加的，能(néng)將皮(pí)克(pg=10-12g)量級的起始待(dài)測(cè)模板擴增(zēng)到微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從(cóng)100萬個(gè)細胞中(zhōng)檢出一(yī)個(gè)靶(bǎ)細(xì)胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空(kōng)斑形成單(dān)位)；在(zài)細菌(jūn)學(xué)中zui小(xiǎo)檢出(chū)率為3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便，快速(sù)
PCR反應(yīng)用(yòng)耐(nài)高(gāo)溫的Taq DNA聚合酶，一次性(xìng)地(dì)將(jiāng)反(fǎn)應液加(jiā)好(hǎo)後(hòu)，即在DNA擴增(zēng)液和水浴鍋上(shàng)進行變性-退火-延伸(shēn)反應(yīng)，一般(bān)在2～4 小(xiǎo)時(shí)完成(chéng)擴增反(fǎn)應(yīng)。擴增產物一般用(yòng)電泳分析(xī)，不(bù)一(yī)定要(yào)用同(tóng)位素(sù)，無(wú)放(fàng)射性汙(wū)染，易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對標本(běn)的(dí)純(chún)度要求低
不(bù)需要分(fēn)離病毒(dú)或細菌及(jí)培養細(xì)胞，DNA 粗(cū)製品及(jí)總RNA均(jūn)可(kě)作為擴(kuò)增(zēng)模(mó)板(bǎn)。可直接用臨(lín)床標(biāo)本如(rú)血液，體(tǐ)腔液，洗嗽液，毛發，細胞(bāo)，活PCR技術概(gài)論。
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