產品(pǐn)中心(xīn)
PCR檢測試劑盒
商品屬性
| 產品名稱(chēng) | 英文名(míng)稱 | 貨號 |
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斑點病(bìng)密螺旋體PCR檢(jiǎn)測試劑盒 |
Treponema carateumPCR |
YS-P014844 |
分(fēn)類(lèi)：PCR檢測試劑盒(hé)
儲(chǔ)存條件(jiàn)：-20℃避光保存(cún)，避免反復凍(dòng)融。
運輸：低(dī)溫，避(bì)光(guāng)。
有(yǒu)效(xiào)期：一(yī)年
貨(huò)期：現貨PCR試劑盒(hé)的(dí)有效(xiào)期一般為(wéi)1年，這(zhè)是指在(zài)適(shì)當的(dí)儲存溫(wēn)度下。核(hé)酸擴增部分的(dí)試(shì)劑(jì)一般(bān)要貯存於(yú)-20℃下(xià)，產物(wù)檢(jiǎn)測(cè)部分試劑則(zé)貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡量避免反復(fù)凍(dòng)融。
【結(jié)果分析(xī)條(tiáo)件設(shè)定】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定：將閾值綫(xiàn)設定(dìng)在(zài)剛(gāng)好超(chāo)過(guò)正常陰(yīn)性(xìng)質控品(pǐn)擴(kuò)增曲綫的(dí)最高點。
【質(zhì)控標準】
2. 陽(yáng)性(xìng)質控品的檢測(cè)結果(guǒ)應(yīng)為陽(yáng)性，有明(míng)顯的(dí)指數擴(kuò)增(zēng)期，Ct值應小於(yú)等(děng)於(yú)35；
3. 以(yǐ)上要求需在(zài)一次實驗(yàn)中同時(shí)滿(mǎn)足(zú)，否則該次(cì)實(shí)驗視為(wéi)無(wú)效(xiào)。
【結果(guǒ)判(pàn)斷】
2.可疑：有(yǒu)明顯(xiǎn)的指數擴(kuò)增期，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣(yàng)本為可(kě)疑(yí)樣(yàng)本；對(duì)於可疑樣本建(jiàn)議(yì)復核一(yī)次，若復(fù)核(hé)結果Ct<40且有指數(shù)擴增期，則判(pàn)定為(wéi)陽性(xìng)，否(fǒu)則判定(dìng)為陰(yīn)性；
3. 陰性(xìng)：無指數擴增期，Ct=40或無(wú)Ct值均(jūn)判(pàn)定為陰性(xìng)樣本(běn)。
【對檢驗(yàn)結果(guǒ)的(dí)解釋】
1. 實驗(yàn)室(shì)環(huán)境汙染，試(shì)劑(jì)汙染，樣(yàng)品交(jiāo)叉汙染(rǎn)會出現假(jiǎ)陽(yáng)性結果；
2. 試劑運(yùn)輸(shū)，保存不(bù)當或試劑配製不(bù)準確(què)引(yǐn)起的試(shì)劑檢測(cè)效能下(xià)降(jiàng)，可能會導(dǎo)致出現假(jiǎ)陰性(xìng)結果。
PCR反應的特(tè)異性：
②鹼基(jī)配對原(yuán)則；
③Taq DNA聚(jù)合酶合(hé)成反(fǎn)應的(dí)忠(zhōng)實(shí)性；
④靶基因的特(tè)異性(xìng)與保守性。
斑點病密螺旋體PCR檢測試劑盒(hé)其中引物與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的正確(què)結合(hé)是關鍵(jiàn)。引物與模板(bǎn)的(dí)結(jié)合及(jí)引(yǐn)物鏈(liàn)的延伸(shēn)是遵(zūn)循(xún)鹼基(jī)配對原則(zé)的(dí)。聚(jù)合酶(méi)合成反(fǎn)應的(dí)忠實性及Taq DNA聚合酶(méi)耐(nài)高溫性(xìng)，使(shǐ)反(fǎn)應中模(mó)板與引物的結合(復(fù)性(xìng))可(kě)以(yǐ)在(zài)較高的溫度下進行，結(jié)合的(dí)特異性(xìng)大大(dà)增加(jiā)，被(bèi)擴(kuò)增的(dí)靶(bǎ)基(jī)因片(piàn)段也(yě)就(jiù)能保持很高的(dí)正(zhèng)確度(dù)。再通(tōng)過選(xuǎn)擇特異性和保守性(xìng)高的靶基因區，其特異性程(chéng)度就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏(mǐn)度(dù)高
PCR產(chǎn)物的(dí)生成量(liáng)是以指(zhǐ)數方式(shì)增(zēng)加的，能(néng)將(jiāng)皮(pí)克(pg=10-12g)量級的起始(shǐ)待測(cè)模(mó)板(bǎn)擴增(zēng)到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從(cóng)100萬(wàn)個(gè)細胞(bāo)中檢(jiǎn)出一個靶(bǎ)細胞；在病毒的(dí)檢(jiǎn)測中，PCR的(dí)靈(líng)敏(mǐn)度可達(dá)3個RFU(空(kōng)斑(bān)形成單(dān)位)；在細(xì)菌學中zui小檢(jiǎn)出(chū)率(shuài)為3個(gè)細菌(jūn)。
(3) 簡便(biàn)，快速
PCR反應(yīng)用耐(nài)高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合酶(méi)，一次(cì)性(xìng)地(dì)將反應液加好後(hòu)，即(jí)在DNA擴增(zēng)液和水浴鍋(guō)上進行變(biàn)性-退火(huǒ)-延伸反應(yīng)，一(yī)般(bān)在2～4 小時完成擴增反(fǎn)應。擴增產(chǎn)物(wù)一般用(yòng)電(diàn)泳(yǒng)分析，不一定要(yào)用同位素，無放射性汙染(rǎn)，易(yì)推(tuī)廣。
(4) 對標(biāo)本的(dí)純度(dù)要(yào)求低(dī)
不需要(yào)分離(lí)病毒或(huò)細菌及(jí)培(péi)養細胞，DNA 粗製品(pǐn)及總(zǒng)RNA均(jūn)可作為(wéi)擴增(zēng)模板。可直接用(yòng)臨床標本(běn)如(rú)血液，體腔液(yè)，洗嗽(sòu)液(yè)，毛發(fā)，細(xì)胞，活(huó)PCR技術概論。
