產品(pǐn)中(zhōng)心(xīn)
PCR檢(jiǎn)測試劑盒
商品屬性(xìng)
| 產品(pǐn)名(míng)稱(chēng) | 英(yīng)文名稱 | 貨號(hào) |
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布氏羅(luó)得西(xī)亞錐蟲(chóng)PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒(hé) |
Trypanosoma brucei rhodesiensePCR |
YS-P014883 |
分(fēn)類：PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé)
儲存(cún)條件：-20℃避(bì)光(guāng)保存，避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復凍(dòng)融(róng)。
運(yùn)輸：低(dī)溫，避光(guāng)。
有(yǒu)效(xiào)期：一年
貨期：現(xiàn)貨PCR試(shì)劑盒的有效期一般為1年(nián)，這是指在(zài)適當(dāng)的(dí)儲存(cún)溫(wēn)度下。核酸(suān)擴增(zēng)部分的試(shì)劑一(yī)般(bān)要貯存於-20℃下，產物檢(jiǎn)測部分(fēn)試劑(jì)則貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡(jìn)量避免反復凍(dòng)融(róng)。
【結果分析條(tiáo)件(jiàn)設定】
u 閾值(zhí)(Threshold)設定：將閾(yù)值綫設(shè)定在(zài)剛好超(chāo)過(guò)正(zhèng)常陰性(xìng)質(zhì)控品擴(kuò)增曲綫的(dí)最高(gāo)點。
【質控標(biāo)準】
2. 陽性質(zhì)控(kòng)品(pǐn)的(dí)檢(jiǎn)測(cè)結(jié)果(guǒ)應(yīng)為陽性，有明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期，Ct值(zhí)應小於等於35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要求需在一(yī)次(cì)實(shí)驗(yàn)中(zhōng)同(tóng)時(shí)滿(mǎn)足，否(fǒu)則該次(cì)實(shí)驗視(shì)為(wéi)無(wú)效。
【結果判斷】
2.可(kě)疑：有明(míng)顯的指數擴(kuò)增期，且38≤Ct<40，此時(shí)樣本為(wéi)可疑樣本(běn)；對於(yú)可(kě)疑(yí)樣本建議(yì)復(fù)核一(yī)次(cì)，若復核(hé)結果(guǒ)Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數擴(kuò)增期，則判(pàn)定為(wéi)陽(yáng)性，否則判定為(wéi)陰性；
3. 陰(yīn)性：無指數擴增期，Ct=40或(huò)無Ct值均判定(dìng)為陰性樣本(běn)。
【對檢驗結(jié)果(guǒ)的(dí)解釋】
1. 實驗室(shì)環(huán)境汙染，試劑(jì)汙(wū)染(rǎn)，樣品(pǐn)交(jiāo)叉汙染(rǎn)會出(chū)現假陽(yáng)性結果；
2. 試(shì)劑運(yùn)輸，保存不(bù)當或(huò)試(shì)劑(jì)配製(zhì)不準(zhǔn)確引起(qǐ)的試劑檢測效(xiào)能下降，可能會導致(zhì)出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陰(yīn)性結果。
PCR反(fǎn)應的特異(yì)性(xìng)：
②鹼基配(pèi)對原則(zé)；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的(dí)忠實性；
④靶基因的特異性(xìng)與保守(shǒu)性。
布氏(shì)羅得西亞錐蟲PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(hé)其(qí)中(zhōng)引物與模板的正確(què)結合是關鍵。引物(wù)與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的(dí)結合(hé)及(jí)引物鏈(liàn)的延伸是(shì)遵(zūn)循鹼(jiǎn)基配對原則的(dí)。聚合(hé)酶(méi)合(hé)成(chéng)反應的忠實性(xìng)及Taq DNA聚合酶(méi)耐高溫(wēn)性，使(shǐ)反應中模板與引(yǐn)物的結合(復(fù)性)可以在較高(gāo)的(dí)溫度下進行，結合的特(tè)異性(xìng)大大增(zēng)加，被(bèi)擴(kuò)增(zēng)的(dí)靶(bǎ)基(jī)因(yīn)片段(duàn)也就(jiù)能(néng)保(bǎo)持(chí)很高(gāo)的正(zhèng)確度。再通過選擇(zé)特異性(xìng)和保(bǎo)守性(xìng)高的(dí)靶基因區，其(qí)特異性程度(dù)就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏度(dù)高(gāo)
PCR產(chǎn)物的生成(chéng)量是以指(zhǐ)數方(fāng)式增加的(dí)，能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量(liáng)級的起(qǐ)始待(dài)測模板擴(kuò)增(zēng)到微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從100萬個細胞中(zhōng)檢(jiǎn)出(chū)一個靶(bǎ)細(xì)胞(bāo)；在病(bìng)毒(dú)的(dí)檢(jiǎn)測中，PCR的(dí)靈敏(mǐn)度可達3個RFU(空斑形(xíng)成(chéng)單(dān)位)；在(zài)細菌(jūn)學中zui小檢出率(shuài)為(wéi)3個細菌。
(3) 簡(jiǎn)便，快(kuài)速(sù)
PCR反(fǎn)應用(yòng)耐高溫的Taq DNA聚(jù)合酶，一次(cì)性(xìng)地將反應液加好(hǎo)後，即(jí)在DNA擴(kuò)增液(yè)和水(shuǐ)浴(yù)鍋(guō)上進行變性(xìng)-退(tuì)火-延伸反(fǎn)應，一般在2～4 小(xiǎo)時(shí)完(wán)成(chéng)擴增(zēng)反(fǎn)應。擴增(zēng)產物(wù)一般用電(diàn)泳分析(xī)，不(bù)一(yī)定要(yào)用同(tóng)位素，無(wú)放(fàng)射性(xìng)汙(wū)染，易推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對標本(běn)的(dí)純(chún)度要求低
不需要(yào)分離(lí)病毒(dú)或(huò)細菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗製(zhì)品(pǐn)及總RNA均可作為(wéi)擴(kuò)增模(mó)板。可直接用臨床(chuáng)標本如血液，體腔(qiāng)液(yè)，洗嗽(sòu)液，毛(máo)發，細胞(bāo)，活PCR技術概論。
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