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PCR檢測試劑盒
商(shāng)品屬(shǔ)性
| 產(chǎn)品名(míng)稱(chēng) | 規(guī)格(gé) | 貨(huò)號(hào) |
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蠶微粒子病PCR檢測(cè)試劑(jì)盒(hé) |
50T |
YS-P014962 |
儲(chǔ)存條(tiáo)件(jiàn)：-20℃避(bì)光保(bǎo)存(cún)，避免反復凍融。
運(yùn)輸(shū)：低溫，避(bì)光。
有(yǒu)效期：一(yī)年
貨期：現(xiàn)貨(huò)PCR試劑(jì)盒(hé)的有效(xiào)期(qī)一般為1年(nián)，這是(shì)指(zhǐ)在適(shì)當(dāng)的(dí)儲(chǔ)存溫(wēn)度(dù)下(xià)。核酸擴增(zēng)部(bù)分(fēn)的試劑一(yī)般(bān)要(yào)貯(zhù)存於-20℃下，產物(wù)檢測(cè)部分(fēn)試劑則(zé)貯存(cún)於2-8℃。盡量(liáng)避(bì)免反(fǎn)復凍(dòng)融(róng)。
【結果(guǒ)分(fēn)析條(tiáo)件設定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設定：將(jiāng)閾(yù)值綫(xiàn)設定在剛好(hǎo)超過(guò)正(zhèng)常(cháng)陰性質控(kòng)品擴增曲(qū)綫的最(zuì)高點。
【質控標(biāo)準】
2. 陽(yáng)性質控品(pǐn)的檢(jiǎn)測結果應為(wéi)陽(yáng)性，有明(míng)顯(xiǎn)的(dí)指數(shù)擴(kuò)增期(qī)，Ct值應小於等於(yú)35；
3. 以(yǐ)上要求需在(zài)一(yī)次實(shí)驗中(zhōng)同時(shí)滿足，否則該(gāi)次(cì)實(shí)驗視(shì)為無效(xiào)。
【結果(guǒ)判斷(duàn)】
2.可(kě)疑：有明顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數擴(kuò)增期(qī)，且38≤Ct<40，此時樣本為可(kě)疑(yí)樣本；對於(yú)可疑(yí)樣(yàng)本(běn)建議復核一次，若復核結(jié)果Ct<40且有(yǒu)指數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，則(zé)判(pàn)定為(wéi)陽(yáng)性(xìng)，否(fǒu)則判定為陰(yīn)性；
3. 陰性(xìng)：無(wú)指數擴(kuò)增期，Ct=40或無Ct值均判(pàn)定(dìng)為陰性樣本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結果的解釋】
1. 實驗室(shì)環境(jìng)汙(wū)染(rǎn)，試(shì)劑(jì)汙(wū)染，樣品(pǐn)交叉(chā)汙染(rǎn)會出現假(jiǎ)陽(yáng)性(xìng)結(jié)果(guǒ)；
2. 試劑(jì)運(yùn)輸(shū)，保(bǎo)存(cún)不(bù)當或試劑配製不(bù)準確引起的(dí)試(shì)劑(jì)檢測效(xiào)能(néng)下降(jiàng)，可(kě)能(néng)會導致(zhì)出現假陰性(xìng)結果。
PCR反應的(dí)特異性：
②鹼(jiǎn)基配(pèi)對原則；
③Taq DNA聚合酶(méi)合成反(fǎn)應的忠(zhōng)實(shí)性；
④靶(bǎ)基因的特異性與保守(shǒu)性(xìng)。
蠶微粒(lì)子病(bìng)PCR檢測(cè)試劑(jì)盒其(qí)中(zhōng)引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模板的正確(què)結合是(shì)關鍵。引物與模(mó)板的結(jié)合及引物鏈的(dí)延(yán)伸是遵循鹼基配對原(yuán)則的。聚(jù)合酶合(hé)成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實性及Taq DNA聚合(hé)酶耐(nài)高溫性(xìng)，使反應(yīng)中(zhōng)模板(bǎn)與引物(wù)的(dí)結(jié)合(復(fù)性)可(kě)以(yǐ)在(zài)較高(gāo)的溫(wēn)度下進行，結合(hé)的特(tè)異性(xìng)大(dà)大增加，被(bèi)擴(kuò)增的靶基因片(piàn)段(duàn)也(yě)就(jiù)能保持(chí)很(hěn)高的(dí)正(zhèng)確度。再通過選擇特(tè)異性和(hé)保守性高的(dí)靶基(jī)因區，其(qí)特異性(xìng)程度就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度(dù)高(gāo)
PCR產(chǎn)物的生(shēng)成(chéng)量(liáng)是以指(zhǐ)數(shù)方(fāng)式增(zēng)加(jiā)的(dí)，能(néng)將皮(pí)克(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起(qǐ)始待測(cè)模(mó)板(bǎn)擴(kuò)增(zēng)到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水平(píng)。能(néng)從100萬個(gè)細(xì)胞中檢(jiǎn)出(chū)一個靶細(xì)胞(bāo)；在(zài)病毒的(dí)檢(jiǎn)測中，PCR的靈敏度可(kě)達3個RFU(空斑形(xíng)成單(dān)位(wèi))；在細菌學中(zhōng)zui小檢出率為3個(gè)細菌。
(3) 簡便，快(kuài)速
PCR反(fǎn)應用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次(cì)性地(dì)將(jiāng)反應液(yè)加(jiā)好(hǎo)後，即在DNA擴增液和水(shuǐ)浴鍋(guō)上(shàng)進行變性(xìng)-退火(huǒ)-延伸反應，一般在2～4 小時完成(chéng)擴增反(fǎn)應(yīng)。擴增(zēng)產物(wù)一般(bān)用電(diàn)泳分析，不一定要用同位(wèi)素，無(wú)放射性(xìng)汙染(rǎn)，易(yì)推廣(guǎng)。
(4) 對標(biāo)本的純度要求(qiú)低(dī)
不需要(yào)分離病毒或細菌及培養細胞(bāo)，DNA 粗製品(pǐn)及總(zǒng)RNA均可(kě)作(zuò)為擴增模(mó)板。可直(zhí)接(jiē)用(yòng)臨床(chuáng)標(biāo)本如血(xiě)液，體(tǐ)腔液(yè)，洗嗽液，毛發(fā)，細胞，活PCR技術(shù)概(gài)論。
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