產品中(zhōng)心
PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒(hé)
大腸彎曲(qū)杆(gān)菌(jūn)海鳥彎(wān)曲(qū)杆(gān)菌(jūn)S rRNA基因(yīn)熒光PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑盒(探針法)
商品屬性
| 產品(pǐn)名稱 | 規格(gé) | 貨號 |
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大(dà)腸彎曲杆菌海鳥彎曲杆(gān)菌S rRNA基(jī)因(yīn)熒光(guāng)PCR檢測(cè)試劑(jì)盒(hé)(探(tàn)針法) |
50T |
YS-P014985 |
儲存條件：-20℃避光保存，避(bì)免反(fǎn)復凍融。
運(yùn)輸(shū)：低溫，避光。
有(yǒu)效期：一年
貨(huò)期：現貨(huò)PCR試劑盒的有(yǒu)效期(qī)一般為(wéi)1年，這是(shì)指在(zài)適(shì)當的儲存溫度(dù)下。核酸(suān)擴增(zēng)部(bù)分的試(shì)劑一般要貯存於-20℃下，產(chǎn)物檢測(cè)部分試劑(jì)則貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡量避免反復凍融(róng)。
【結(jié)果(guǒ)分析條件(jiàn)設定(dìng)】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設(shè)定：將(jiāng)閾(yù)值綫(xiàn)設(shè)定(dìng)在(zài)剛好超過(guò)正(zhèng)常(cháng)陰性質(zhì)控(kòng)品(pǐn)擴增(zēng)曲綫的最高點(diǎn)。
【質控(kòng)標準】
2. 陽性質(zhì)控(kòng)品的(dí)檢(jiǎn)測(cè)結果應為陽性(xìng)，有明顯(xiǎn)的指數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct值應小(xiǎo)於等於35；
3. 以上(shàng)要(yào)求(qiú)需(xū)在一次實驗中同(tóng)時滿足，否則(zé)該次(cì)實(shí)驗視為無(wú)效。
【結果判(pàn)斷(duàn)】
2.可(kě)疑：有明顯(xiǎn)的指數(shù)擴增(zēng)期，且38≤Ct<40，此(cǐ)時樣本為(wéi)可疑(yí)樣本；對於可疑(yí)樣本(běn)建議復(fù)核(hé)一次(cì)，若(ruò)復(fù)核(hé)結果Ct<40且有指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增(zēng)期，則判定為陽(yáng)性，否則判定為(wéi)陰(yīn)性；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無(wú)指數擴增(zēng)期，Ct=40或無(wú)Ct值均(jūn)判定(dìng)為(wéi)陰性(xìng)樣(yàng)本(běn)。
【對檢驗結果的解釋】
1. 實驗(yàn)室環境汙染，試(shì)劑(jì)汙(wū)染，樣(yàng)品交叉汙染會出現假(jiǎ)陽(yáng)性結果(guǒ)；
2. 試(shì)劑(jì)運輸，保(bǎo)存不當或試劑配(pèi)製不(bù)準確引起的試劑檢測效(xiào)能下(xià)降，可(kě)能會導(dǎo)致出(chū)現(xiàn)假陰(yīn)性結(jié)果。
PCR反(fǎn)應的(dí)特(tè)異性：
②鹼(jiǎn)基配對(duì)原(yuán)則；
③Taq DNA聚(jù)合酶(méi)合(hé)成(chéng)反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基因的特(tè)異(yì)性(xìng)與保(bǎo)守(shǒu)性(xìng)。
大(dà)腸彎曲杆(gān)菌海鳥彎曲杆菌S rRNA基(jī)因(yīn)熒光(guāng)PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒(探(tàn)針(zhēn)法(fǎ))其中引(yǐn)物與模(mó)板(bǎn)的(dí)正(zhèng)確結合是關鍵(jiàn)。引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的結合及引(yǐn)物鏈(liàn)的延(yán)伸(shēn)是(shì)遵(zūn)循鹼(jiǎn)基配對原則的。聚(jù)合酶(méi)合成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實性及Taq DNA聚合(hé)酶(méi)耐高(gāo)溫性，使反應(yīng)中模板(bǎn)與引物的結合(hé)(復性)可以(yǐ)在(zài)較高(gāo)的溫度下進行，結合的(dí)特(tè)異性大大增(zēng)加，被(bèi)擴(kuò)增的靶(bǎ)基因片段(duàn)也就能(néng)保持(chí)很(hěn)高的(dí)正(zhèng)確度。再通過選擇特(tè)異性和(hé)保(bǎo)守性(xìng)高的(dí)靶基因區，其(qí)特(tè)異(yì)性程度(dù)就更高。
(2) 靈敏(mǐn)度高
PCR產(chǎn)物(wù)的生(shēng)成量(liáng)是以(yǐ)指數方(fāng)式(shì)增(zēng)加的，能將(jiāng)皮克(kè)(pg=10-12g)量級的(dí)起始待測模板擴(kuò)增(zēng)到微(wēi)克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從(cóng)100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞(bāo)中檢(jiǎn)出一個靶細胞；在病毒(dú)的(dí)檢(jiǎn)測中，PCR的靈敏(mǐn)度(dù)可達(dá)3個RFU(空斑形成單位)；在(zài)細(xì)菌(jūn)學中zui小檢出(chū)率為(wéi)3個(gè)細菌(jūn)。
(3) 簡便，快速
PCR反應用耐(nài)高溫的Taq DNA聚合酶(méi)，一(yī)次性(xìng)地將反(fǎn)應液加好後(hòu)，即(jí)在DNA擴(kuò)增液(yè)和水浴(yù)鍋上(shàng)進(jìn)行變性-退(tuì)火(huǒ)-延(yán)伸反應(yīng)，一(yī)般在2～4 小時完(wán)成(chéng)擴增反(fǎn)應。擴增產物(wù)一(yī)般用電泳分析(xī)，不一定(dìng)要(yào)用同(tóng)位素，無放(fàng)射(shè)性(xìng)汙(wū)染，易推廣(guǎng)。
(4) 對標本(běn)的純度(dù)要求低(dī)
不需(xū)要分離病毒或(huò)細(xì)菌及(jí)培養(yǎng)細胞(bāo)，DNA 粗(cū)製品(pǐn)及總RNA均可(kě)作(zuò)為擴增模板。可(kě)直接用(yòng)臨床標(biāo)本(běn)如血液，體腔液，洗嗽(sòu)液(yè)，毛發(fā)，細胞，活(huó)PCR技術概論(lùn)。
