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PCR檢測試劑盒(hé)
商品(pǐn)屬性
| 產品(pǐn)名(míng)稱(chēng) | 規格(gé) | 貨(huò)號 |
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丁(dīng)型肝(gān)炎病毒PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒 |
50T |
YS-P015009 |
儲存(cún)條件(jiàn)：-20℃避(bì)光(guāng)保存，避免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融。
運(yùn)輸：低溫(wēn)，避(bì)光。
有效(xiào)期：一年(nián)
貨(huò)期：現貨(huò)PCR試劑盒(hé)的(dí)有效期一(yī)般(bān)為1年，這(zhè)是指在(zài)適當的儲存溫度(dù)下(xià)。核酸擴增部分的試劑(jì)一(yī)般(bān)要貯存於-20℃下(xià)，產物(wù)檢測(cè)部分(fēn)試劑(jì)則貯存於2-8℃。盡量(liáng)避(bì)免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍融。
【結果分析(xī)條件(jiàn)設(shè)定】
u 閾值(Threshold)設定(dìng)：將(jiāng)閾值綫設(shè)定在(zài)剛好超過正(zhèng)常陰性(xìng)質控品擴增曲綫的最高(gāo)點。
【質(zhì)控(kòng)標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽性質控品的檢測結果(guǒ)應為陽(yáng)性(xìng)，有明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期(qī)，Ct值(zhí)應小(xiǎo)於等(děng)於(yú)35；
3. 以上要求需(xū)在(zài)一次(cì)實(shí)驗(yàn)中同時(shí)滿(mǎn)足，否則該次實(shí)驗(yàn)視(shì)為(wéi)無(wú)效(xiào)。
【結(jié)果判(pàn)斷】
2.可疑：有明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴增(zēng)期，且38≤Ct<40，此(cǐ)時樣本為(wéi)可(kě)疑(yí)樣本；對於(yú)可(kě)疑樣本(běn)建議(yì)復核一次，若(ruò)復核結(jié)果Ct<40且(qiě)有指數擴(kuò)增期，則判(pàn)定為陽性，否(fǒu)則(zé)判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性；
3. 陰(yīn)性：無(wú)指數擴(kuò)增(zēng)期，Ct=40或(huò)無Ct值均(jūn)判定為陰(yīn)性樣(yàng)本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結(jié)果(guǒ)的解釋】
1. 實驗(yàn)室環境汙染，試劑汙染(rǎn)，樣品交(jiāo)叉(chā)汙(wū)染(rǎn)會出現(xiàn)假陽性結果；
2. 試劑運輸(shū)，保(bǎo)存不(bù)當或(huò)試劑(jì)配製不準(zhǔn)確引(yǐn)起的試(shì)劑檢(jiǎn)測效(xiào)能(néng)下降(jiàng)，可能會導(dǎo)致出現(xiàn)假陰性結果。
PCR反應的(dí)特(tè)異性(xìng)：
②鹼基配(pèi)對(duì)原則；
③Taq DNA聚合(hé)酶(méi)合成(chéng)反應的忠實(shí)性；
④靶基(jī)因(yīn)的特異性(xìng)與(yǔ)保守性。
丁(dīng)型肝炎(yán)病毒(dú)PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒(hé)其中引(yǐn)物(wù)與模板的正確(què)結(jié)合是關(guān)鍵(jiàn)。引物與模板的結合及引物(wù)鏈(liàn)的(dí)延(yán)伸是遵(zūn)循(xún)鹼基配(pèi)對(duì)原則(zé)的(dí)。聚(jù)合酶(méi)合成反應(yīng)的(dí)忠(zhōng)實性及Taq DNA聚合酶耐(nài)高(gāo)溫性(xìng)，使(shǐ)反(fǎn)應(yīng)中模(mó)板(bǎn)與(yǔ)引物的結(jié)合(hé)(復性)可以在較高的溫度下(xià)進(jìn)行，結合的特異性大大增(zēng)加(jiā)，被(bèi)擴增的(dí)靶(bǎ)基因片段也就能(néng)保持(chí)很高的正確度(dù)。再通過選(xuǎn)擇特(tè)異(yì)性(xìng)和保守性高(gāo)的靶(bǎ)基因區，其特異性(xìng)程度就更高(gāo)。
(2) 靈(líng)敏度(dù)高
PCR產物(wù)的(dí)生成量(liáng)是(shì)以(yǐ)指數方式(shì)增加(jiā)的，能將皮克(kè)(pg=10-12g)量級的起(qǐ)始(shǐ)待測(cè)模板擴增到微克(kè)(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能(néng)從100萬(wàn)個細胞(bāo)中檢(jiǎn)出(chū)一個靶細(xì)胞；在病(bìng)毒(dú)的檢測中，PCR的靈(líng)敏度可(kě)達3個(gè)RFU(空斑形(xíng)成單位(wèi))；在細菌學(xué)中zui小檢出率(shuài)為(wéi)3個細菌(jūn)。
(3) 簡便，快(kuài)速
PCR反應用耐高(gāo)溫的(dí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)，一次(cì)性(xìng)地將反應液加(jiā)好後(hòu)，即在(zài)DNA擴增液和(hé)水浴(yù)鍋(guō)上進行變性-退火(huǒ)-延(yán)伸反應，一般在2～4 小(xiǎo)時(shí)完(wán)成(chéng)擴增反(fǎn)應(yīng)。擴(kuò)增(zēng)產(chǎn)物一(yī)般用電(diàn)泳(yǒng)分析，不一定要用(yòng)同(tóng)位素，無放(fàng)射性汙染，易推廣(guǎng)。
(4) 對標本(běn)的純(chún)度要求低
不(bù)需(xū)要分離(lí)病(bìng)毒(dú)或細菌(jūn)及培養細胞，DNA 粗製(zhì)品及(jí)總RNA均(jūn)可(kě)作(zuò)為(wéi)擴(kuò)增模板。可直接用臨(lín)床標(biāo)本如(rú)血(xiě)液(yè)，體(tǐ)腔液(yè)，洗嗽液，毛(máo)發(fā)，細(xì)胞，活PCR技術概論(lùn)。
