產(chǎn)品(pǐn)中心(xīn)
PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑盒(hé)
商品屬(shǔ)性
| 產品(pǐn)名(míng)稱(chēng) | 規(guī)格 | 貨(huò)號 |
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鵝(é)特(tè)定基因(yīn)序列PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒 |
50T |
YS-P015014 |
儲存(cún)條件：-20℃避(bì)光(guāng)保存，避免反復(fù)凍(dòng)融(róng)。
運輸(shū)：低溫，避(bì)光。
有效期(qī)：一(yī)年
貨期：現貨PCR試(shì)劑盒的有效(xiào)期(qī)一般為(wéi)1年(nián)，這(zhè)是(shì)指在適(shì)當(dāng)的(dí)儲存(cún)溫度(dù)下。核酸(suān)擴(kuò)增部分的(dí)試劑一般要(yào)貯(zhù)存(cún)於-20℃下(xià)，產物(wù)檢(jiǎn)測部分試劑(jì)則(zé)貯(zhù)存於(yú)2-8℃。盡(jìn)量避免(miǎn)反復凍融(róng)。
【結果分(fēn)析條件設定】
u 閾值(Threshold)設(shè)定：將(jiāng)閾值(zhí)綫設定在剛好超(chāo)過(guò)正常陰性質控品(pǐn)擴增(zēng)曲(qū)綫(xiàn)的最(zuì)高(gāo)點。
【質(zhì)控標準(zhǔn)】
2. 陽性質控(kòng)品(pǐn)的檢(jiǎn)測(cè)結(jié)果應(yīng)為陽性，有(yǒu)明顯的指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct值(zhí)應小於(yú)等於(yú)35；
3. 以(yǐ)上(shàng)要求需在一次實(shí)驗中(zhōng)同時滿足，否則該(gāi)次實驗視(shì)為(wéi)無效(xiào)。
【結果判斷(duàn)】
2.可疑：有(yǒu)明顯的(dí)指數(shù)擴增期，且38≤Ct<40，此時樣本為(wéi)可(kě)疑(yí)樣(yàng)本(běn)；對於可(kě)疑(yí)樣本建議復(fù)核(hé)一(yī)次(cì)，若復(fù)核結果Ct<40且(qiě)有指(zhǐ)數擴增期，則判(pàn)定為陽(yáng)性，否則(zé)判(pàn)定為(wéi)陰(yīn)性；
3. 陰(yīn)性：無指(zhǐ)數擴(kuò)增期，Ct=40或(huò)無(wú)Ct值均判定(dìng)為陰性樣本。
【對檢(jiǎn)驗結(jié)果的解釋(shì)】
1. 實驗室(shì)環境(jìng)汙(wū)染(rǎn)，試劑汙染，樣(yàng)品交(jiāo)叉(chā)汙染(rǎn)會(huì)出(chū)現假陽(yáng)性結果(guǒ)；
2. 試(shì)劑運(yùn)輸，保存(cún)不當或(huò)試劑配(pèi)製不準(zhǔn)確引起的試(shì)劑檢測效(xiào)能下(xià)降，可(kě)能會導(dǎo)致(zhì)出現(xiàn)假(jiǎ)陰性結(jié)果。
PCR反應(yīng)的特異性：
②鹼(jiǎn)基(jī)配對(duì)原則；
③Taq DNA聚合酶合成(chéng)反應的忠(zhōng)實性；
④靶基(jī)因的特異(yì)性與保守性(xìng)。
鵝特定基因(yīn)序列PCR檢(jiǎn)測試劑盒其(qí)中(zhōng)引(yǐn)物與模板的(dí)正確(què)結(jié)合是關鍵。引(yǐn)物與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的結合(hé)及引物鏈(liàn)的(dí)延(yán)伸是(shì)遵(zūn)循鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對原則(zé)的。聚(jù)合酶(méi)合成(chéng)反(fǎn)應的(dí)忠實性及Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)耐高溫性(xìng)，使反應(yīng)中(zhōng)模(mó)板與(yǔ)引(yǐn)物的(dí)結合(復性(xìng))可以(yǐ)在較高的溫度下進行，結合(hé)的特(tè)異性大大增加，被(bèi)擴增(zēng)的(dí)靶(bǎ)基因(yīn)片段(duàn)也(yě)就能(néng)保(bǎo)持很(hěn)高的(dí)正確度。再(zài)通過選(xuǎn)擇(zé)特異(yì)性(xìng)和保守性(xìng)高(gāo)的靶(bǎ)基(jī)因(yīn)區，其(qí)特異性程度(dù)就更(gēng)高。
(2) 靈敏(mǐn)度高
PCR產物(wù)的生(shēng)成(chéng)量(liáng)是以(yǐ)指數方式(shì)增加的，能(néng)將皮克(pg=10-12g)量(liáng)級的(dí)起(qǐ)始待測(cè)模(mó)板(bǎn)擴增(zēng)到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水平。能從(cóng)100萬個細胞中(zhōng)檢(jiǎn)出一(yī)個靶細(xì)胞；在病毒的(dí)檢(jiǎn)測中(zhōng)，PCR的靈(líng)敏(mǐn)度可(kě)達(dá)3個RFU(空斑形成單(dān)位)；在細(xì)菌學中(zhōng)zui小檢出(chū)率(shuài)為3個細菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快速(sù)
PCR反應用(yòng)耐高溫(wēn)的Taq DNA聚合酶(méi)，一(yī)次性(xìng)地將(jiāng)反應液(yè)加(jiā)好(hǎo)後(hòu)，即(jí)在DNA擴(kuò)增液(yè)和(hé)水(shuǐ)浴(yù)鍋上進行變性(xìng)-退火(huǒ)-延伸(shēn)反應(yīng)，一般在2～4 小(xiǎo)時完(wán)成(chéng)擴(kuò)增(zēng)反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一(yī)般用電泳(yǒng)分析(xī)，不(bù)一定要用同位(wèi)素，無(wú)放射(shè)性汙染，易(yì)推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本的(dí)純(chún)度要求低
不需(xū)要(yào)分(fēn)離(lí)病(bìng)毒或(huò)細菌(jūn)及(jí)培養(yǎng)細胞(bāo)，DNA 粗(cū)製(zhì)品(pǐn)及(jí)總(zǒng)RNA均可作為(wéi)擴增模(mó)板(bǎn)。可直接用臨床標本(běn)如血(xiě)液(yè)，體腔(qiāng)液，洗嗽(sòu)液，毛(máo)發，細(xì)胞，活(huó)PCR技術概論(lùn)。
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