產(chǎn)品中(zhōng)心
PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒
商品屬性
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | 規格 | 貨(huò)號 |
|
甲(jiǎ)型(xíng)副傷寒(hán)沙(shā)門(mén)氏菌(jūn)PCR檢測試劑盒 |
50T |
YS-P015067 |
儲(chǔ)存條(tiáo)件：-20℃避光保存，避免反(fǎn)復凍融。
運輸：低溫，避(bì)光(guāng)。
有(yǒu)效期：一年(nián)
貨期：現貨PCR試劑(jì)盒(hé)的(dí)有效期(qī)一(yī)般(bān)為1年，這是指在(zài)適當(dāng)的儲存(cún)溫度(dù)下(xià)。核(hé)酸擴(kuò)增(zēng)部分的試劑(jì)一(yī)般要貯(zhù)存於(yú)-20℃下，產物檢(jiǎn)測部分試劑則貯存(cún)於(yú)2-8℃。盡量避免反(fǎn)復凍(dòng)融。
【結果(guǒ)分(fēn)析條件設定】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定：將閾值綫(xiàn)設定(dìng)在(zài)剛好(hǎo)超(chāo)過正常陰性(xìng)質控品擴增(zēng)曲(qū)綫的最高點。
【質控(kòng)標(biāo)準】
2. 陽性質控品的檢(jiǎn)測(cè)結果(guǒ)應為(wéi)陽(yáng)性，有明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，Ct值(zhí)應小於等於(yú)35；
3. 以(yǐ)上要求需在(zài)一(yī)次實(shí)驗(yàn)中同(tóng)時滿(mǎn)足(zú)，否則該次(cì)實驗(yàn)視為(wéi)無效(xiào)。
【結(jié)果(guǒ)判(pàn)斷】
2.可(kě)疑：有明(míng)顯的指數擴(kuò)增期(qī)，且38≤Ct<40，此時樣本(běn)為可(kě)疑樣本；對於(yú)可(kě)疑樣本建議(yì)復核一(yī)次，若復核結(jié)果(guǒ)Ct<40且有指數擴(kuò)增(zēng)期(qī)，則(zé)判定為陽性，否則判(pàn)定為陰性(xìng)；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無(wú)指(zhǐ)數(shù)擴增(zēng)期，Ct=40或(huò)無Ct值均判定(dìng)為陰(yīn)性樣(yàng)本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗(yàn)結果的解(jiě)釋】
1. 實驗室環(huán)境(jìng)汙染，試劑汙染，樣品交叉汙染會出現假陽性結果(guǒ)；
2. 試劑(jì)運輸，保(bǎo)存(cún)不當或(huò)試(shì)劑(jì)配製不準(zhǔn)確(què)引起(qǐ)的試劑檢(jiǎn)測(cè)效能(néng)下(xià)降(jiàng)，可能(néng)會導(dǎo)致(zhì)出(chū)現假(jiǎ)陰(yīn)性結(jié)果。
PCR反應的(dí)特(tè)異性(xìng)：
②鹼基(jī)配對原則；
③Taq DNA聚(jù)合酶(méi)合(hé)成反(fǎn)應的(dí)忠(zhōng)實性；
④靶基(jī)因(yīn)的特(tè)異性與保守性。
甲型副(fù)傷寒(hán)沙(shā)門(mén)氏菌PCR檢測試劑盒(hé)其(qí)中(zhōng)引物(wù)與模板(bǎn)的正(zhèng)確結合(hé)是關(guān)鍵(jiàn)。引物與模板的(dí)結(jié)合及(jí)引(yǐn)物(wù)鏈的延伸(shēn)是遵循(xún)鹼基(jī)配對原則的。聚合(hé)酶合成反應的(dí)忠實(shí)性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合酶耐高(gāo)溫(wēn)性(xìng)，使(shǐ)反(fǎn)應(yīng)中模板與引物(wù)的(dí)結(jié)合(復(fù)性)可以在較(jiào)高的溫(wēn)度下(xià)進(jìn)行(háng)，結合(hé)的特異性大大增(zēng)加，被擴(kuò)增的靶基因片段(duàn)也(yě)就能(néng)保(bǎo)持很高的正確度(dù)。再(zài)通(tōng)過選(xuǎn)擇(zé)特(tè)異(yì)性和保守(shǒu)性(xìng)高的(dí)靶(bǎ)基因(yīn)區(qū)，其特(tè)異性程(chéng)度就(jiù)更(gēng)高。
(2) 靈(líng)敏度(dù)高(gāo)
PCR產物的(dí)生成量是(shì)以指數方式增(zēng)加的，能(néng)將皮(pí)克(pg=10-12g)量級的起(qǐ)始(shǐ)待(dài)測模(mó)板擴增到(dào)微克(ug=10-6g)水平。能(néng)從(cóng)100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶(bǎ)細胞(bāo)；在(zài)病毒(dú)的(dí)檢(jiǎn)測(cè)中，PCR的靈(líng)敏度可達3個(gè)RFU(空(kōng)斑(bān)形成(chéng)單位)；在細菌學中zui小(xiǎo)檢(jiǎn)出率(shuài)為(wéi)3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快(kuài)速(sù)
PCR反應用耐(nài)高(gāo)溫(wēn)的Taq DNA聚合酶，一(yī)次(cì)性地將(jiāng)反應液(yè)加(jiā)好(hǎo)後，即(jí)在DNA擴增(zēng)液和(hé)水(shuǐ)浴鍋(guō)上進行變性-退火(huǒ)-延(yán)伸反應(yīng)，一(yī)般在(zài)2～4 小時完成擴增反應。擴(kuò)增產物一般用電泳分析(xī)，不(bù)一(yī)定(dìng)要(yào)用同位(wèi)素(sù)，無(wú)放射性汙染，易(yì)推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本的(dí)純度要(yào)求低(dī)
不需(xū)要分(fēn)離(lí)病毒(dú)或(huò)細(xì)菌及(jí)培(péi)養細(xì)胞，DNA 粗製品及總(zǒng)RNA均可(kě)作為(wéi)擴(kuò)增模板。可直接用臨床標本(běn)如(rú)血(xiě)液，體腔(qiāng)液，洗(xǐ)嗽液，毛發(fā)，細胞，活PCR技(jì)術概論。
