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PCR檢測試(shì)劑盒(hé)
商品(pǐn)屬(shǔ)性
| 產品名(míng)稱(chēng) | 規(guī)格 | 貨號 |
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甲型流(liú)感病(bìng)毒PCR檢測試(shì)劑盒 |
50T |
YS-P015070 |
儲(chǔ)存(cún)條件：-20℃避光(guāng)保存，避(bì)免反復凍(dòng)融。
運(yùn)輸：低溫(wēn)，避光(guāng)。
有效(xiào)期：一年
貨期(qī)：現貨PCR試(shì)劑(jì)盒(hé)的(dí)有效期(qī)一般(bān)為1年，這(zhè)是指(zhǐ)在適當的儲(chǔ)存溫度(dù)下。核(hé)酸擴增部分的試(shì)劑一(yī)般要(yào)貯(zhù)存於-20℃下(xià)，產物(wù)檢(jiǎn)測部分(fēn)試(shì)劑(jì)則貯存於(yú)2-8℃。盡量(liáng)避免反(fǎn)復凍(dòng)融。
【結(jié)果分析條件設(shè)定(dìng)】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設(shè)定：將閾值綫設定在剛(gāng)好(hǎo)超過(guò)正常陰性(xìng)質(zhì)控品擴增(zēng)曲綫的最(zuì)高點。
【質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)】
2. 陽(yáng)性(xìng)質控品的(dí)檢測結果應為(wéi)陽性，有(yǒu)明顯(xiǎn)的指數擴增期(qī)，Ct值(zhí)應(yīng)小於(yú)等(děng)於(yú)35；
3. 以上要求需在(zài)一次(cì)實驗中同(tóng)時(shí)滿足(zú)，否(fǒu)則該次實驗視為無效(xiào)。
【結(jié)果判斷(duàn)】
2.可疑(yí)：有明顯的(dí)指(zhǐ)數擴增期，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣(yàng)本為可疑樣本；對於可(kě)疑(yí)樣(yàng)本(běn)建議復核(hé)一次(cì)，若(ruò)復(fù)核結(jié)果(guǒ)Ct<40且有指數擴(kuò)增(zēng)期，則(zé)判定為陽性(xìng)，否則(zé)判定(dìng)為陰性(xìng)；
3. 陰(yīn)性(xìng)：無指數(shù)擴增(zēng)期(qī)，Ct=40或無Ct值均(jūn)判(pàn)定(dìng)為陰性樣本(běn)。
【對檢驗結(jié)果的解(jiě)釋(shì)】
1. 實驗室(shì)環(huán)境汙染，試(shì)劑汙染，樣(yàng)品交叉(chā)汙染會(huì)出(chū)現假陽性(xìng)結果(guǒ)；
2. 試劑運輸(shū)，保存不(bù)當或試劑配製不準確引起(qǐ)的試劑(jì)檢(jiǎn)測效能下降，可(kě)能會導致(zhì)出現假(jiǎ)陰(yīn)性結果。
PCR反應的特異性：
②鹼(jiǎn)基配(pèi)對原(yuán)則；
③Taq DNA聚(jù)合酶(méi)合成(chéng)反(fǎn)應的(dí)忠實性(xìng)；
④靶基因的(dí)特異性與保守性。
甲型流感病(bìng)毒PCR檢測試(shì)劑盒其(qí)中引(yǐn)物(wù)與模(mó)板(bǎn)的(dí)正確結合是(shì)關鍵(jiàn)。引物(wù)與(yǔ)模板的結合及(jí)引物鏈(liàn)的延伸(shēn)是遵循鹼基配對(duì)原(yuán)則的(dí)。聚(jù)合酶(méi)合成反應的(dí)忠實(shí)性及(jí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi)耐(nài)高溫性，使(shǐ)反應中模板(bǎn)與引物的結合(復(fù)性(xìng))可以在(zài)較高的(dí)溫(wēn)度下進行(háng)，結合(hé)的(dí)特異性大大增(zēng)加(jiā)，被擴(kuò)增的(dí)靶(bǎ)基因(yīn)片段(duàn)也就(jiù)能(néng)保(bǎo)持很(hěn)高的正確(què)度。再通過(guò)選(xuǎn)擇(zé)特(tè)異性和保(bǎo)守性高(gāo)的靶基(jī)因區(qū)，其特異性(xìng)程(chéng)度(dù)就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏(mǐn)度(dù)高
PCR產物的(dí)生(shēng)成量是(shì)以指數方式增加(jiā)的，能(néng)將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起(qǐ)始待測(cè)模(mó)板(bǎn)擴(kuò)增(zēng)到微(wēi)克(kè)(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬個(gè)細胞中檢(jiǎn)出(chū)一(yī)個(gè)靶細(xì)胞(bāo)；在病(bìng)毒的(dí)檢測(cè)中(zhōng)，PCR的(dí)靈敏度(dù)可達(dá)3個(gè)RFU(空(kōng)斑形(xíng)成(chéng)單(dān)位(wèi))；在細菌學(xué)中(zhōng)zui小檢出(chū)率(shuài)為3個細(xì)菌(jūn)。
(3) 簡便(biàn)，快速
PCR反應(yīng)用(yòng)耐高(gāo)溫的Taq DNA聚合酶，一(yī)次(cì)性地(dì)將反(fǎn)應液加(jiā)好後，即(jí)在DNA擴(kuò)增液和(hé)水(shuǐ)浴(yù)鍋上(shàng)進行變性-退火(huǒ)-延(yán)伸反應，一般(bān)在2～4 小(xiǎo)時(shí)完成擴增反應。擴(kuò)增產物一般(bān)用電泳分(fēn)析，不一定(dìng)要用同(tóng)位素，無放射性汙染(rǎn)，易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的(dí)純度(dù)要求(qiú)低
不需要分(fēn)離病毒(dú)或(huò)細菌及(jí)培(péi)養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗(cū)製品及(jí)總(zǒng)RNA均可作為擴(kuò)增模板(bǎn)。可直接(jiē)用(yòng)臨床標(biāo)本如(rú)血液，體腔(qiāng)液(yè)，洗嗽(sòu)液，毛(máo)發(fā)，細(xì)胞，活(huó)PCR技術(shù)概論(lùn)。
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