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PCR檢測(cè)試劑(jì)盒(hé)
商品(pǐn)屬(shǔ)性
| 產(chǎn)品名稱 | 規格(gé) | 貨號 |
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利什曼原(yuán)蟲PCR檢測試劑盒(hé) |
50T |
YS-P015104 |
儲存條件(jiàn)：-20℃避光(guāng)保存，避免(miǎn)反(fǎn)復(fù)凍融。
運輸：低溫，避光。
有(yǒu)效(xiào)期：一年(nián)
貨期：現(xiàn)貨(huò)PCR試(shì)劑盒的(dí)有效期(qī)一(yī)般(bān)為(wéi)1年，這是(shì)指(zhǐ)在適(shì)當(dāng)的儲存(cún)溫(wēn)度下。核酸(suān)擴增部分的試劑一般(bān)要貯存於(yú)-20℃下，產物檢(jiǎn)測(cè)部(bù)分試(shì)劑則(zé)貯存(cún)於2-8℃。盡(jìn)量(liáng)避(bì)免反(fǎn)復凍融(róng)。
【結果(guǒ)分(fēn)析條(tiáo)件設定(dìng)】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定：將閾值(zhí)綫(xiàn)設定(dìng)在剛(gāng)好(hǎo)超(chāo)過(guò)正常陰性質控品(pǐn)擴增(zēng)曲綫(xiàn)的最高(gāo)點。
【質(zhì)控標準】
2. 陽性(xìng)質控品(pǐn)的檢測(cè)結(jié)果(guǒ)應為(wéi)陽性，有(yǒu)明顯(xiǎn)的(dí)指數擴增期(qī)，Ct值應小於等於(yú)35；
3. 以上要求(qiú)需(xū)在一(yī)次實驗(yàn)中同時滿足(zú)，否(fǒu)則該次實驗(yàn)視為(wéi)無效。
【結果(guǒ)判斷(duàn)】
2.可疑(yí)：有明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴增期(qī)，且38≤Ct<40，此時(shí)樣(yàng)本為可疑(yí)樣本；對於(yú)可疑(yí)樣本(běn)建(jiàn)議復(fù)核一次，若(ruò)復(fù)核(hé)結果Ct<40且有指(zhǐ)數擴增期，則判(pàn)定(dìng)為(wéi)陽性，否則判定為陰性(xìng)；
3. 陰性：無指數(shù)擴增(zēng)期(qī)，Ct=40或無(wú)Ct值均(jūn)判定為陰性樣本(běn)。
【對(duì)檢(jiǎn)驗(yàn)結(jié)果的解釋】
1. 實驗(yàn)室(shì)環境汙(wū)染，試(shì)劑(jì)汙染(rǎn)，樣品(pǐn)交叉(chā)汙染(rǎn)會(huì)出現假陽性(xìng)結果；
2. 試(shì)劑(jì)運輸，保(bǎo)存不當或試劑(jì)配製不準(zhǔn)確(què)引起(qǐ)的試(shì)劑檢測(cè)效(xiào)能下降，可能(néng)會(huì)導致(zhì)出現假(jiǎ)陰(yīn)性(xìng)結(jié)果。
PCR反應的(dí)特異性(xìng)：
②鹼基(jī)配對(duì)原則；
③Taq DNA聚(jù)合酶合成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的忠實性；
④靶基因的(dí)特異(yì)性與(yǔ)保守性(xìng)。
利什(shí)曼(màn)原(yuán)蟲(chóng)PCR檢(jiǎn)測(cè)試(shì)劑(jì)盒(hé)其(qí)中(zhōng)引物與(yǔ)模(mó)板的正確結(jié)合是關鍵。引(yǐn)物與(yǔ)模板的(dí)結(jié)合及引(yǐn)物鏈的(dí)延伸是遵(zūn)循(xún)鹼基(jī)配對(duì)原(yuán)則的(dí)。聚合酶(méi)合成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的忠(zhōng)實(shí)性及(jí)Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐高溫性(xìng)，使(shǐ)反(fǎn)應(yīng)中模板(bǎn)與引物的(dí)結(jié)合(hé)(復性)可以在較高(gāo)的溫度下(xià)進行(háng)，結合(hé)的特(tè)異(yì)性(xìng)大大(dà)增加，被(bèi)擴增(zēng)的靶(bǎ)基因片段也(yě)就能(néng)保(bǎo)持很高的(dí)正確度。再(zài)通(tōng)過選(xuǎn)擇特異性和保守(shǒu)性(xìng)高的靶基因區，其特異(yì)性程度就更高。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產物(wù)的(dí)生成(chéng)量(liáng)是以指(zhǐ)數方式增加(jiā)的，能(néng)將皮克(kè)(pg=10-12g)量級的(dí)起(qǐ)始待測(cè)模(mó)板(bǎn)擴增到(dào)微(wēi)克(ug=10-6g)水平。能(néng)從100萬(wàn)個(gè)細胞(bāo)中檢(jiǎn)出一個靶(bǎ)細胞；在(zài)病(bìng)毒(dú)的(dí)檢測(cè)中，PCR的(dí)靈敏度(dù)可(kě)達(dá)3個RFU(空斑形(xíng)成單位)；在(zài)細菌(jūn)學中zui小(xiǎo)檢出(chū)率(shuài)為3個細菌。
(3) 簡便，快速(sù)
PCR反(fǎn)應用(yòng)耐(nài)高(gāo)溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合酶，一次(cì)性地將(jiāng)反應液加好(hǎo)後，即在DNA擴增液和水(shuǐ)浴(yù)鍋(guō)上進行變性(xìng)-退(tuì)火(huǒ)-延(yán)伸反(fǎn)應(yīng)，一般在(zài)2～4 小時完(wán)成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增(zēng)產物(wù)一般用電(diàn)泳分(fēn)析，不(bù)一(yī)定要(yào)用(yòng)同(tóng)位素，無放射性汙染(rǎn)，易推廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本的(dí)純(chún)度要(yào)求低
不需要分離病(bìng)毒或細菌及培(péi)養細胞(bāo)，DNA 粗製品及(jí)總RNA均(jūn)可作為(wéi)擴(kuò)增模板(bǎn)。可(kě)直接(jiē)用(yòng)臨床標(biāo)本如(rú)血液(yè)，體(tǐ)腔液，洗嗽(sòu)液，毛發，細胞，活(huó)PCR技術概論(lùn)。
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