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PCR檢(jiǎn)測試劑(jì)盒
驢特(tè)定(dìng)基因(yīn)序(xù)列(liè)PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒(hé)
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2024-3-18 瀏覽(lǎn)次數：652
商品屬性(xìng)
| 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
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驢(lǘ)特(tè)定基因(yīn)序列(liè)PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑(jì)盒 |
50T |
YS-P015118 |
儲存(cún)條件：-20℃避(bì)光保存(cún)，避免反(fǎn)復凍融(róng)。
運輸：低(dī)溫，避(bì)光。
有效(xiào)期：一年
貨期：現貨PCR試劑(jì)盒的有(yǒu)效期(qī)一(yī)般(bān)為1年，這(zhè)是(shì)指(zhǐ)在(zài)適(shì)當的儲存溫(wēn)度下。核酸擴(kuò)增(zēng)部分的試(shì)劑(jì)一般要貯(zhù)存於-20℃下，產(chǎn)物(wù)檢測部分(fēn)試(shì)劑則貯(zhù)存(cún)於(yú)2-8℃。盡量避(bì)免反復凍(dòng)融。
【結果分(fēn)析條(tiáo)件(jiàn)設定】
u 閾(yù)值(zhí)(Threshold)設定：將閾值綫設(shè)定(dìng)在剛(gāng)好超(chāo)過正(zhèng)常陰性質控(kòng)品(pǐn)擴增(zēng)曲綫(xiàn)的最高點(diǎn)。
【質控標(biāo)準】
2. 陽(yáng)性(xìng)質控品的檢(jiǎn)測(cè)結(jié)果(guǒ)應(yīng)為陽(yáng)性，有(yǒu)明(míng)顯的指(zhǐ)數擴增(zēng)期，Ct值(zhí)應小(xiǎo)於(yú)等於35；
3. 以上要求需在一次(cì)實驗(yàn)中(zhōng)同(tóng)時(shí)滿足，否(fǒu)則該(gāi)次實(shí)驗(yàn)視為無(wú)效。
【結果判(pàn)斷】
2.可疑：有(yǒu)明(míng)顯的指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣(yàng)本為(wéi)可(kě)疑(yí)樣本(běn)；對於可(kě)疑(yí)樣(yàng)本建(jiàn)議(yì)復核一(yī)次(cì)，若復核結果Ct<40且(qiě)有(yǒu)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期(qī)，則判(pàn)定為陽(yáng)性(xìng)，否則(zé)判(pàn)定(dìng)為陰性；
3. 陰性(xìng)：無(wú)指數擴增(zēng)期，Ct=40或(huò)無Ct值(zhí)均(jūn)判定為陰(yīn)性樣本。
【對檢驗結果(guǒ)的(dí)解(jiě)釋(shì)】
1. 實驗(yàn)室環境汙(wū)染(rǎn)，試劑汙染，樣(yàng)品(pǐn)交叉汙染(rǎn)會出現假陽(yáng)性結果；
2. 試(shì)劑(jì)運輸，保(bǎo)存不(bù)當或(huò)試(shì)劑(jì)配製不(bù)準確引(yǐn)起的試劑檢(jiǎn)測效(xiào)能下(xià)降(jiàng)，可(kě)能(néng)會導(dǎo)致出(chū)現假陰(yīn)性結(jié)果。
PCR反應的特異(yì)性(xìng)：
②鹼(jiǎn)基配(pèi)對(duì)原則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合(hé)酶合成(chéng)反應的忠實(shí)性；
④靶(bǎ)基因(yīn)的特異性與(yǔ)保守性(xìng)。
驢特(tè)定基因序列(liè)PCR檢測試劑盒(hé)其(qí)中(zhōng)引(yǐn)物與(yǔ)模(mó)板的(dí)正確(què)結合是(shì)關(guān)鍵。引物與模(mó)板(bǎn)的結合及引物(wù)鏈的延(yán)伸(shēn)是遵循鹼基(jī)配(pèi)對原則的。聚(jù)合(hé)酶合成反應的(dí)忠實性(xìng)及Taq DNA聚(jù)合(hé)酶耐高溫(wēn)性(xìng)，使反(fǎn)應(yīng)中模板與(yǔ)引物(wù)的結合(hé)(復性)可以(yǐ)在較高的溫(wēn)度(dù)下進行(háng)，結合(hé)的特異性大大增加(jiā)，被擴增(zēng)的(dí)靶(bǎ)基因片段(duàn)也就(jiù)能保持(chí)很高(gāo)的正(zhèng)確度。再通(tōng)過選擇(zé)特(tè)異性和保(bǎo)守性高的靶(bǎ)基因(yīn)區，其(qí)特(tè)異(yì)性程(chéng)度就更高。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產(chǎn)物的生成(chéng)量是(shì)以(yǐ)指(zhǐ)數(shù)方式增加(jiā)的(dí)，能將皮克(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的(dí)起始(shǐ)待測模板擴增到(dào)微克(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞(bāo)中檢出一(yī)個靶(bǎ)細(xì)胞；在(zài)病毒的(dí)檢(jiǎn)測中(zhōng)，PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空(kōng)斑形成(chéng)單位)；在細菌(jūn)學中zui小檢(jiǎn)出率(shuài)為3個細(xì)菌。
(3) 簡便(biàn)，快速
PCR反應用耐高溫(wēn)的(dí)Taq DNA聚合(hé)酶，一(yī)次(cì)性地將(jiāng)反應(yīng)液加(jiā)好(hǎo)後，即在DNA擴(kuò)增液和水浴(yù)鍋(guō)上進行變性-退火(huǒ)-延(yán)伸(shēn)反應，一般在2～4 小時(shí)完成(chéng)擴(kuò)增反應。擴(kuò)增產(chǎn)物一(yī)般(bān)用電泳分析(xī)，不一定要用同(tóng)位(wèi)素(sù)，無(wú)放射(shè)性汙染，易推廣。
(4) 對標本的純(chún)度要求(qiú)低(dī)
不(bù)需(xū)要分(fēn)離病毒(dú)或(huò)細(xì)菌及培養細胞(bāo)，DNA 粗製(zhì)品(pǐn)及總RNA均可(kě)作(zuò)為(wéi)擴增模板(bǎn)。可(kě)直(zhí)接(jiē)用臨床標本如血液(yè)，體(tǐ)腔(qiāng)液，洗(xǐ)嗽(sòu)液(yè)，毛發，細胞，活PCR技(jì)術概(gài)論(lùn)。
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