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PCR檢測試(shì)劑盒
商品屬性
| 產品名稱 | 規格(gé) | 貨(huò)號 |
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牛(niú)瘟(wēn)病毒PCR檢測(cè)試(shì)劑(jì)盒 |
50T |
YS-P015162 |
儲存條件(jiàn)：-20℃避光保(bǎo)存，避免(miǎn)反復凍融(róng)。
運(yùn)輸：低溫，避(bì)光。
有效期(qī)：一(yī)年
貨期：現貨(huò)PCR試劑盒(hé)的有效(xiào)期(qī)一(yī)般(bān)為(wéi)1年(nián)，這是(shì)指在適(shì)當(dāng)的(dí)儲存溫度下。核酸擴增部(bù)分的試劑一(yī)般(bān)要貯存(cún)於(yú)-20℃下，產物檢測(cè)部分試劑則貯存於2-8℃。盡(jìn)量避(bì)免反(fǎn)復(fù)凍(dòng)融。
【結果分(fēn)析(xī)條(tiáo)件設定】
u 閾值(Threshold)設定(dìng)：將閾值(zhí)綫(xiàn)設(shè)定(dìng)在剛好超過(guò)正常陰(yīn)性質控品擴(kuò)增(zēng)曲(qū)綫的(dí)最(zuì)高點。
【質控標準】
2. 陽(yáng)性(xìng)質(zhì)控品(pǐn)的檢測(cè)結果(guǒ)應(yīng)為(wéi)陽性，有(yǒu)明顯的(dí)指數擴(kuò)增期，Ct值應小(xiǎo)於等於(yú)35；
3. 以上(shàng)要(yào)求需(xū)在(zài)一次實(shí)驗(yàn)中(zhōng)同時(shí)滿足(zú)，否則(zé)該次(cì)實驗視(shì)為無效(xiào)。
【結果判(pàn)斷(duàn)】
2.可(kě)疑(yí)：有(yǒu)明顯的(dí)指(zhǐ)數擴(kuò)增期，且38≤Ct<40，此(cǐ)時(shí)樣本為可(kě)疑(yí)樣(yàng)本；對於(yú)可疑樣(yàng)本(běn)建(jiàn)議(yì)復(fù)核一(yī)次(cì)，若(ruò)復核(hé)結果Ct<40且有指數擴(kuò)增(zēng)期，則判(pàn)定為(wéi)陽性，否(fǒu)則(zé)判(pàn)定(dìng)為(wéi)陰(yīn)性；
3. 陰(yīn)性：無指數(shù)擴(kuò)增期，Ct=40或(huò)無Ct值均(jūn)判定(dìng)為陰性樣(yàng)本。
【對(duì)檢(jiǎn)驗結果的(dí)解(jiě)釋(shì)】
1. 實(shí)驗室環境汙染(rǎn)，試劑汙染(rǎn)，樣品(pǐn)交叉(chā)汙染會(huì)出現假(jiǎ)陽(yáng)性結果(guǒ)；
2. 試(shì)劑(jì)運輸，保(bǎo)存不(bù)當(dāng)或(huò)試(shì)劑配製不(bù)準(zhǔn)確引起的試(shì)劑(jì)檢(jiǎn)測(cè)效(xiào)能下降，可(kě)能(néng)會導致出現(xiàn)假(jiǎ)陰性(xìng)結(jié)果(guǒ)。
PCR反應的特異(yì)性：
②鹼基(jī)配對(duì)原則(zé)；
③Taq DNA聚(jù)合酶(méi)合(hé)成(chéng)反(fǎn)應的忠實(shí)性(xìng)；
④靶基因的(dí)特異(yì)性與(yǔ)保(bǎo)守性。
牛(niú)瘟病毒PCR檢測試(shì)劑(jì)盒(hé)其(qí)中引物(wù)與模板(bǎn)的正確結合是關鍵(jiàn)。引物(wù)與(yǔ)模板的(dí)結合(hé)及引(yǐn)物鏈(liàn)的(dí)延伸(shēn)是遵(zūn)循(xún)鹼基配對原(yuán)則的。聚合酶(méi)合(hé)成反(fǎn)應的忠(zhōng)實性(xìng)及(jí)Taq DNA聚合(hé)酶(méi)耐高(gāo)溫(wēn)性，使(shǐ)反(fǎn)應(yīng)中(zhōng)模(mó)板與(yǔ)引(yǐn)物(wù)的(dí)結(jié)合(復性)可以在(zài)較(jiào)高的溫(wēn)度(dù)下(xià)進行，結合的特異(yì)性(xìng)大大增(zēng)加，被(bèi)擴(kuò)增的靶基(jī)因片段(duàn)也就(jiù)能(néng)保持很高(gāo)的正確度(dù)。再(zài)通過(guò)選(xuǎn)擇(zé)特異性和保(bǎo)守性高的靶基因區，其(qí)特異(yì)性程(chéng)度(dù)就更(gēng)高。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產物(wù)的生成量(liáng)是以(yǐ)指數(shù)方式增(zēng)加(jiā)的，能(néng)將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量級的(dí)起(qǐ)始待測(cè)模板(bǎn)擴增到(dào)微克(ug=10-6g)水(shuǐ)平。能從100萬個(gè)細胞中檢(jiǎn)出(chū)一個靶細胞(bāo)；在病毒(dú)的檢(jiǎn)測中，PCR的靈(líng)敏(mǐn)度可(kě)達3個RFU(空斑(bān)形成(chéng)單(dān)位(wèi))；在(zài)細菌(jūn)學(xué)中(zhōng)zui小檢(jiǎn)出率為(wéi)3個(gè)細菌。
(3) 簡便，快(kuài)速
PCR反(fǎn)應用(yòng)耐高溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合(hé)酶，一次性地將反應液(yè)加好後(hòu)，即在(zài)DNA擴(kuò)增(zēng)液(yè)和水(shuǐ)浴(yù)鍋(guō)上(shàng)進行變性(xìng)-退火-延伸反應，一(yī)般在2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增(zēng)反(fǎn)應(yīng)。擴(kuò)增產物(wù)一般用(yòng)電泳分(fēn)析，不一定要用同位素，無放射性汙(wū)染，易推(tuī)廣(guǎng)。
(4) 對(duì)標本的(dí)純(chún)度要求低
不需要分(fēn)離病毒(dú)或(huò)細菌(jūn)及培(péi)養(yǎng)細胞，DNA 粗(cū)製品(pǐn)及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨(lín)床(chuáng)標(biāo)本(běn)如血液，體腔液(yè)，洗(xǐ)嗽(sòu)液，毛發，細胞，活PCR技術概論(lùn)。
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