產(chǎn)品(pǐn)中心(xīn)
PCR檢(jiǎn)測試劑盒(hé)
| 產品(pǐn)名稱 | 規(guī)格(gé) | 貨(huò)號(hào) |
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禽流感(gǎn)病(bìng)毒H亞型PCR檢(jiǎn)測試(shì)劑(jì)盒 |
50T |
YS-P015179 |
儲存條(tiáo)件(jiàn):-20℃避光(guāng)保(bǎo)存(cún),避(bì)免反(fǎn)復凍融。
運輸(shū):低(dī)溫(wēn),避光(guāng)。
有(yǒu)效(xiào)期:一(yī)年
貨期:現貨(huò)PCR試(shì)劑(jì)盒的(dí)有效期一(yī)般(bān)為(wéi)1年(nián),這是(shì)指(zhǐ)在適當(dāng)的儲(chǔ)存(cún)溫度下。核(hé)酸(suān)擴增(zēng)部分的試(shì)劑一般要貯存(cún)於-20℃下(xià),產(chǎn)物檢(jiǎn)測(cè)部分試劑(jì)則(zé)貯(zhù)存(cún)於2-8℃。盡量避(bì)免(miǎn)反復凍融。

u 閾值(zhí)(Threshold)設定(dìng):將閾(yù)值(zhí)綫(xiàn)設定在剛(gāng)好(hǎo)超(chāo)過正(zhèng)常陰性(xìng)質控品擴增曲綫的最(zuì)高(gāo)點。
2. 陽(yáng)性質控品的(dí)檢(jiǎn)測(cè)結(jié)果應(yīng)為(wéi)陽性,有明(míng)顯的(dí)指數(shù)擴增期,Ct值應(yīng)小(xiǎo)於等於35;
3. 以上要(yào)求需在一次實(shí)驗(yàn)中(zhōng)同(tóng)時(shí)滿(mǎn)足,否(fǒu)則(zé)該(gāi)次實驗視為(wéi)無(wú)效。
2.可疑(yí):有明顯(xiǎn)的(dí)指(zhǐ)數(shù)擴(kuò)增期(qī),且(qiě)38≤Ct<40,此時樣本為(wéi)可疑樣(yàng)本(běn);對於可(kě)疑樣(yàng)本建議(yì)復核一次(cì),若復核結果Ct<40且有指數擴(kuò)增(zēng)期,則(zé)判定為陽性(xìng),否則判定為陰性;
3. 陰(yīn)性:無指(zhǐ)數(shù)擴增期,Ct=40或無Ct值均(jūn)判(pàn)定為陰性(xìng)樣(yàng)本(běn)。
【對檢(jiǎn)驗結果的解釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室環境汙染,試劑(jì)汙染(rǎn),樣品交叉汙(wū)染會出現(xiàn)假陽性結果;
2. 試(shì)劑運(yùn)輸,保存(cún)不當或(huò)試劑配製不準確引起(qǐ)的(dí)試劑檢(jiǎn)測(cè)效(xiào)能下降,可(kě)能會(huì)導致(zhì)出(chū)現(xiàn)假(jiǎ)陰性結果。

②鹼(jiǎn)基(jī)配(pèi)對原(yuán)則(zé);
③Taq DNA聚合酶合(hé)成(chéng)反應(yīng)的忠實(shí)性(xìng);
④靶基因的特(tè)異性與(yǔ)保(bǎo)守(shǒu)性。
禽(qín)流(liú)感病(bìng)毒H亞型(xíng)PCR檢測試劑盒其(qí)中引(yǐn)物(wù)與(yǔ)模(mó)板的(dí)正確結合是(shì)關鍵。引(yǐn)物與(yǔ)模板的(dí)結合及引物鏈的延伸是遵循鹼基配對原則的(dí)。聚(jù)合酶合成(chéng)反應的(dí)忠實性及Taq DNA聚合(hé)酶耐高溫性(xìng),使(shǐ)反應(yīng)中模板與(yǔ)引(yǐn)物的(dí)結合(復性)可以在較高的溫度(dù)下進行,結合(hé)的特異(yì)性大大增(zēng)加,被擴增的靶基(jī)因片段也就能(néng)保(bǎo)持很高(gāo)的正確(què)度。再通過選擇特異性(xìng)和保(bǎo)守(shǒu)性高的靶基因(yīn)區(qū),其特異(yì)性程度就更(gēng)高。
(2) 靈敏度高(gāo)
PCR產物的生(shēng)成量(liáng)是以指數(shù)方(fāng)式增加(jiā)的,能(néng)將皮克(kè)(pg=10-12g)量級(jí)的起(qǐ)始(shǐ)待測模板擴(kuò)增(zēng)到微(wēi)克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個細胞中(zhōng)檢出(chū)一個(gè)靶細胞(bāo);在病毒的檢(jiǎn)測中,PCR的靈(líng)敏度(dù)可達3個RFU(空斑(bān)形(xíng)成單(dān)位(wèi));在細(xì)菌(jūn)學中zui小檢(jiǎn)出(chū)率為(wéi)3個(gè)細菌(jūn)。
(3) 簡(jiǎn)便,快(kuài)速
PCR反應(yīng)用耐高溫(wēn)的Taq DNA聚(jù)合(hé)酶(méi),一(yī)次性(xìng)地將反(fǎn)應液加好後,即在DNA擴(kuò)增液和水浴(yù)鍋上進(jìn)行(háng)變性-退火-延(yán)伸反應(yīng),一(yī)般在(zài)2~4 小時完成(chéng)擴(kuò)增(zēng)反(fǎn)應(yīng)。擴(kuò)增(zēng)產(chǎn)物一般(bān)用電泳(yǒng)分(fēn)析,不一定(dìng)要用同位素,無(wú)放(fàng)射(shè)性(xìng)汙(wū)染,易(yì)推廣。
(4) 對標本的(dí)純度(dù)要(yào)求低(dī)
不(bù)需要(yào)分離病(bìng)毒(dú)或細菌(jūn)及培養細(xì)胞(bāo),DNA 粗製(zhì)品及(jí)總(zǒng)RNA均(jūn)可作為(wéi)擴(kuò)增(zēng)模板。可(kě)直接(jiē)用臨床標本(běn)如血(xiě)液(yè),體(tǐ)腔液,洗(xǐ)嗽液(yè),毛發(fā),細(xì)胞(bāo),活PCR技術概論(lùn)。
- 上一條(tiáo):禽(qín)流感病(bìng)毒PCR檢(jiǎn)測(cè)試劑盒
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