產品中(zhōng)心(xīn)
PCR檢測(cè)試(shì)劑盒(hé)
商品(pǐn)屬性(xìng)
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 貨(huò)號(hào) |
|
人(rén)白(bái)細胞(bāo)抗(kàng)原PCR檢測(cè)試劑(jì)盒(hé) |
50T |
YS-P015199 |
儲存(cún)條件：-20℃避光(guāng)保存(cún)，避免(miǎn)反復(fù)凍(dòng)融(róng)。
運(yùn)輸(shū)：低(dī)溫，避(bì)光。
有(yǒu)效(xiào)期：一年(nián)
貨期：現貨PCR試劑(jì)盒的有(yǒu)效期一般為1年，這(zhè)是指(zhǐ)在適當(dāng)的儲存溫度下。核(hé)酸擴增(zēng)部(bù)分的試(shì)劑(jì)一般要(yào)貯存(cún)於(yú)-20℃下(xià)，產物檢(jiǎn)測部(bù)分試劑(jì)則(zé)貯(zhù)存於2-8℃。盡量避(bì)免(miǎn)反復凍(dòng)融。
【結果分析條件設定(dìng)】
u 閾值(Threshold)設定：將閾值綫(xiàn)設(shè)定(dìng)在(zài)剛好(hǎo)超過(guò)正常陰(yīn)性質控品(pǐn)擴(kuò)增(zēng)曲(qū)綫的最高(gāo)點(diǎn)。
【質控標準】
2. 陽(yáng)性質控(kòng)品的檢(jiǎn)測結果應(yīng)為陽(yáng)性，有(yǒu)明(míng)顯的指數擴增(zēng)期，Ct值應小(xiǎo)於等於(yú)35；
3. 以上要求需在一次實(shí)驗中同時(shí)滿(mǎn)足，否則該(gāi)次實驗(yàn)視為無(wú)效(xiào)。
【結(jié)果判(pàn)斷(duàn)】
2.可疑：有明顯(xiǎn)的指(zhǐ)數擴(kuò)增期(qī)，且(qiě)38≤Ct<40，此時樣(yàng)本(běn)為(wéi)可(kě)疑(yí)樣(yàng)本；對於(yú)可(kě)疑樣本(běn)建(jiàn)議復核(hé)一(yī)次(cì)，若(ruò)復(fù)核結(jié)果Ct<40且有(yǒu)指數擴增期，則(zé)判(pàn)定為陽性(xìng)，否則判定為陰性(xìng)；
3. 陰性(xìng)：無指(zhǐ)數(shù)擴增期，Ct=40或無Ct值(zhí)均(jūn)判(pàn)定為(wéi)陰(yīn)性樣(yàng)本(běn)。
【對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果(guǒ)的(dí)解(jiě)釋】
1. 實(shí)驗(yàn)室環(huán)境汙染，試(shì)劑汙染(rǎn)，樣品(pǐn)交叉汙(wū)染會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性(xìng)結(jié)果；
2. 試(shì)劑(jì)運輸，保存(cún)不當或試劑配製不(bù)準(zhǔn)確引起(qǐ)的試(shì)劑檢(jiǎn)測(cè)效(xiào)能下降(jiàng)，可能(néng)會導(dǎo)致出現假陰(yīn)性結果。
PCR反應(yīng)的特(tè)異(yì)性(xìng)：
②鹼基配對(duì)原則；
③Taq DNA聚合酶合成(chéng)反(fǎn)應(yīng)的(dí)忠實性；
④靶基因的特(tè)異(yì)性(xìng)與保守(shǒu)性。
人白細胞抗(kàng)原PCR檢測試(shì)劑盒(hé)其(qí)中引(yǐn)物與(yǔ)模(mó)板(bǎn)的正(zhèng)確結合是(shì)關(guān)鍵。引物(wù)與模(mó)板的(dí)結(jié)合(hé)及引物鏈的延(yán)伸(shēn)是遵循鹼(jiǎn)基配對(duì)原(yuán)則(zé)的。聚合酶(méi)合成(chéng)反應(yīng)的忠(zhōng)實性及(jí)Taq DNA聚(jù)合酶(méi)耐高溫(wēn)性(xìng)，使(shǐ)反(fǎn)應中(zhōng)模板(bǎn)與引物(wù)的(dí)結合(hé)(復(fù)性(xìng))可(kě)以在較(jiào)高(gāo)的(dí)溫(wēn)度下進(jìn)行，結合的(dí)特異(yì)性大(dà)大(dà)增加(jiā)，被(bèi)擴增的靶(bǎ)基因片(piàn)段(duàn)也就能保(bǎo)持(chí)很(hěn)高的(dí)正確(què)度。再通過選(xuǎn)擇(zé)特(tè)異性和保守(shǒu)性高的(dí)靶基(jī)因(yīn)區(qū)，其(qí)特異(yì)性程度(dù)就更(gēng)高(gāo)。
(2) 靈敏度(dù)高
PCR產物的生(shēng)成量(liáng)是(shì)以指(zhǐ)數方(fāng)式增加的，能將(jiāng)皮克(pg=10-12g)量(liáng)級(jí)的(dí)起始(shǐ)待測模(mó)板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平(píng)。能從100萬個細胞中(zhōng)檢出一(yī)個靶(bǎ)細(xì)胞；在病(bìng)毒(dú)的檢(jiǎn)測中，PCR的靈敏(mǐn)度可達3個RFU(空斑形成(chéng)單(dān)位(wèi))；在細菌學中zui小(xiǎo)檢出(chū)率為3個(gè)細(xì)菌。
(3) 簡(jiǎn)便(biàn)，快(kuài)速(sù)
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合(hé)酶，一(yī)次性(xìng)地(dì)將反(fǎn)應液(yè)加好(hǎo)後，即(jí)在DNA擴(kuò)增液和(hé)水浴(yù)鍋上(shàng)進行(háng)變性(xìng)-退火(huǒ)-延伸反應，一般(bān)在2～4 小時(shí)完成(chéng)擴(kuò)增(zēng)反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物(wù)一(yī)般用電泳(yǒng)分析，不一(yī)定(dìng)要用(yòng)同(tóng)位素(sù)，無放射性汙(wū)染，易推廣。
(4) 對標本的純度(dù)要求低
不需(xū)要(yào)分離病(bìng)毒或細(xì)菌(jūn)及培養細(xì)胞(bāo)，DNA 粗(cū)製(zhì)品(pǐn)及總RNA均(jūn)可作(zuò)為擴(kuò)增(zēng)模(mó)板。可直接用臨床(chuáng)標本如(rú)血液，體(tǐ)腔(qiāng)液，洗嗽(sòu)液(yè)，毛發(fā)，細(xì)胞(bāo)，活PCR技術(shù)概論。
